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片重50 mg。 6 405.5（R ＝0.999 8），结果表明，灯盏乙素检测质量浓
2
2.2 灯盏乙素的含量测定 度的线性范围为4.80～76.80 μg/mL。
采用HPLC法测定。 2.2.7 精密度试验 精密吸取灯盏乙素对照品溶液适
2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取灯盏乙素对照品 量，用甲醇稀释至 57.6 μg/mL，按“2.2.4”项下色谱条件
适量，加入甲醇溶解并定容至 10 mL 量瓶中，制成质量 连续进样 6 次，记录峰面积。结果，灯盏乙素峰面积的

浓度为0.96 mg/mL的对照品溶液，备用。 RSD为1.19％（n＝6），表明仪器精密度良好。
2.2.2 供试品溶液的制备 取灯盏花素胃黏附片10片， 2.2.8 重复性试验 取灯盏花素胃黏附片适量，共6份，
研细，精密称取 50 mg，置于 10 mL 量瓶中，加入 pH 6.8 按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，再按“2.2.4”项下色
的磷酸盐缓冲液，超声（功率：500 W，频率：53 kHz）处理 谱条件进样分析，记录峰面积并按标准曲线法计算灯盏
30 min，放冷，并用磷酸盐缓冲液定容，经0.45 μm微孔滤 乙素的含量。结果，灯盏乙素含量的RSD为1.59％（n＝
膜滤过，取续滤液，置于25 mL量瓶中，用甲醇定容，即得。 6），表明方法重复性良好。
2.2.3 空白对照溶液的制备 按灯盏花素胃黏附片处 2.2.9 加样回收率试验 精密称取已知含量（灯盏乙素
方比例精密称取除灯盏花素外的其余辅料 21 mg 于 10 含量为 287.42 mg/g）的灯盏花素胃黏附片粉末 0.1 g，共
mL量瓶中，按“2.2.2”项下方法制备空白对照溶液。 6份，分别精密加入等量灯盏乙素对照品，按“2.2.2”项下
2.2.4 色谱条件 色谱柱：Agilent Zorbax SB-C18 （250 方法制备供试品溶液，再按“2.2.4”项下色谱条件进样分
mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：甲醇-0.2％磷酸水溶液 析，记录峰面积并计算加样回收率。结果，平均加样回
（45 ∶ 55，V/V）；流速：1.0 mL/min；检测波长：335 nm；柱 收率为97.10％（RSD＝1.94％，n＝6）。
温：35 ℃；进样量：10 μL。 2.2.10 稳定性试验 取“2.2.2”项下供试品溶液适量，
2.2.5 专属性试验 取对照品溶液（用甲醇稀释成 分别在室温下放置0、2、4、6、12、24 h时按“2.2.4”项下色
57.6 μg/mL）、供试品溶液和空白对照溶液各适量，按 谱条件进样分析，记录峰面积并按标准曲线法计算灯盏
“2.2.4”项下色谱条件进样分析，记录色谱图。结果，灯 乙素的含量。结果，灯盏乙素含量的RSD为1.23％（n＝
盏乙素的保留时间约为 7.0 min，色谱峰峰形对称，溶剂 6），表明供试品溶液在室温下24 h内稳定性良好。
与辅料对其测定无干扰，表明方法专属性较好，详见 2.3 体外释放度试验
图1。 精密称取灯盏花素胃黏附片适量，采用 2015 年版

50 000 灯盏乙素 《中国药典》（四部）通则“特征检查法”中的溶出度与释
U，V μ 25 000 放 度 测 定 法 —— 篮 法 ，转 速 为 100 r/min，温 度 为
[9]
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 （37.0±0.5）℃，释放介质为 pH 6.8 磷酸盐缓冲液 500
t，min
A.对照品溶液 mL，分别于2、6、12 h取释放液5 mL，同时补加相应释放
50 000 灯盏乙素 介质5 mL，释放液经0.45 μm微孔滤膜滤过，取续滤液3
U，V μ 25 000 mL，按“2.2.4”项下色谱条件进样测定，记录峰面积，按
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 标准曲线法计算灯盏乙素的质量浓度，并按下式计算其
t，min
i＝n－1
B.供试品溶液
累积释放度（Q）：Q（％）＝（cn×V0+ ∑ ci×V1 ）/W×100％
50 000 i＝0
U，V μ 25 000 （式中cn为第n个点测得的药物质量浓度，V0为释放介质
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 的体积，ci为第 i 个点测得的药物质量浓度，i＝n－1，V1
t，min 为每次取样体积，W为灯盏乙素的总含量）。
C.空白对照溶液
图1 高效液相色谱图 2.4 体外胃组织黏附力试验
Fig 1 HPLC chromatograms 根据实验室条件并查阅相关文献资料 [10-11] ，采用自
2.2.6 标准曲线绘制 精密量取灯盏乙素对照品溶液 制黏附力测定装置进行体外胃组织黏附力试验。取禁
0.05、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8 mL，分别置于 10 mL 量瓶中， 食不禁水24 h的家兔1只，于耳缘静脉注射空气处死，取
加入甲醇稀释至刻度，混匀，得不同质量浓度的系列线 其胃组织，用水冲洗除取胃内容物，用 0.1 mol/L 盐酸溶
性工作溶液，按“2.2.4”项下色谱条件进样分析，记录峰 液冲洗除去胃表面黏液质并浸泡，保存备用。将灯盏花
面积。以灯盏乙素质量浓度（x，μg/mL）为横坐标、峰面 素胃黏附片在 0.1 mol/L 盐酸溶液中浸泡 5 min 后，用滤
积（y）为纵坐标进行线性回归，得回归方程为y＝25 950x+ 纸吸去表面液体，放在有机玻璃板上（a板）；将胃组织剪

·1692 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 14 中国药房 2020年第31卷第14期