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10 μL。 10 ∶ 1 分别计算检测限和定量限。结果，GA 的检测限为
2.3.2 溶液的制备 对照品贮备液：精密称取 GA 对照 1 μg/mL，定量限为4 μg/mL。
品50 mg，用甲醇定容至50 mL量瓶中，制成质量浓度为 2.3.6 精密度试验 精密量取“2.3.2”项下GA对照品贮
1 mg/mL的对照品贮备液。供试品溶液：分别精密称取 备液 2 mL，用甲醇定容至 10 mL 量瓶中，制成质量浓度
GA 原料药及纳米粒各 30 mg，加水 5 mL 超声（功率： 为 200 μg/mL 的标准溶液，按“2.3.1”项下色谱条件连续
300 W，频率：50 Hz）处理20 min后，制成过饱和溶液，置 进样测定 6 次，记录峰面积，考察精密度。结果，GA 峰
于 37 ℃的恒温振荡器中以 100 r/min 振摇 12 h，所得溶 面积的RSD为0.32％（n＝6），表明仪器精密度良好。
液静置30 min后，经0.22 μm微孔滤膜滤过，即得供试品 2.3.7 重 复 性 试 验 取 GA 纳 米 粒 共 6 份 ，分 别 按
溶液。阴性对照溶液：取 PVP K30 适量，按上述供试品 “2.3.2”项下方法制备供试品溶液，再按“2.3.1”项下色谱
溶液配制方法制备，即得。 条件进样测定，记录峰面积，按标准曲线法计算 GA 含
2.3.3 专属性试验 取 GA 对照品溶液（取“2.3.2”项下 量。结果，GA含量的RSD为1.26％（n＝6），表明本方法
GA对照品贮备液用流动相溶解，质量浓度为50 μg/mL）、 重复性良好。
GA纳米粒供试品溶液、阴性对照溶液各适量，按“2.3.1” 2.3.8 稳定性试验 取 GA 纳米粒适量，按“2.3.2”项下
项下色谱条件进样测定，记录色谱图。结果，GA对照品 方法制备供试品溶液，分别于室温放置 0、6、12、24、48、
及其纳米粒在相同保留时间处均有类似的色谱峰，且
72 h 时按“2.3.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积。
PVP K30对定量分析无干扰，详见图5。
结果，GA峰面积的RSD为1.17％（n＝6），表明供试品溶
350 液在室温下放置72 h内稳定性良好。
300
250 2.3.9 加样回收率试验 精密称取已知含量的GA纳米
mAU 200 粒适量，共 9 份，分别按已知量的 120％、100％、80％加
150
100
50
0 入 GA 对照品，用甲醇定容至 10 mL，制得相应溶液，再
2 4 6 8 10 12 14
t，min 按“2.3.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并计算加
A. GA对照品溶液 样回收率。结果，不同加样量样品的平均回收率分别为
200 98.78％、98.89％、98.84％，RSD 均小于 1％（n＝3），详见
175
150 表1。
125
mAU 100 表1 加样回收率试验结果（n＝3）
75
50
25 Tab 1 Results of recovery tests（n＝3）
0
2 4 6 8 10 12 14
t，min 纳米粒称样量，mg 已知量，mg 加入量，mg 测得量，mg 回收率，％ 平均回收率，％ RSD，％
B. GA纳米粒供试品溶液 14.96 2.39 1.91 4.28 98.95 98.78 0.79
14.97 2.39 1.92 4.27 97.92
14.93 2.39 1.91 4.29 99.48
120
100 14.95 2.39 2.41 4.78 99.17 98.89 0.49
80 14.92 2.39 2.39 4.74 98.33
mAU 60 14.96 2.39 2.41 4.78 99.17
40
20 14.94 2.39 2.88 5.24 98.96 98.84 0.88
0 14.95 2.39 2.87 5.20 97.91
2 4 6 8 10 12 14 14.93 2.39 2.89 5.27 99.65
t，min
C.阴性对照溶液 2.4 溶解度的测定
图5 高效液相色谱图 取 GA 原料药和 GA 纳米粒各适量，按“2.3.2”项下
Fig 5 HPLC chromatograms 方法制备供试品溶液，再按“2.3.1”项下色谱条件进样分
2.3.4 标准曲线的绘制 精密量取“2.3.2”项下GA对照 析，记录峰面积。以标准曲线法计算GA含量，并计算溶
品贮备液适量，用甲醇稀释，制成质量浓度分别为1 000、 解度：溶解度（μg/mL）＝溶质质量/溶剂体积。每种样品
500、200、100、50、10、5 μg/mL 的 GA 系列标准溶液，按 平行测定 3 次。结果，GA 原料药在水中的溶解度为
“2.3.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积。以待测物 （1.05±0.01）μg/mL；制成纳米粒后，GA 的溶解度为
质量浓度（x，μg/mL）为横坐标、峰面积（y）为纵坐标进 （250.00±0.15）μg/mL，提示纳米粒对 GA 的增溶效果
2
行 线 性 回 归 ，得 回 归 方 程 为 y＝12.63x － 57.67（R ＝ 明显。
0.998 4）。结果，GA 检测质量浓度的线性范围为 5～ 2.5 载药量的测定
1 000 μg/mL。 精密称取GA纳米粒5 mg，共3份，加甲醇5 mL，按
2.3.5 检测限与定量限 取“2.3.4”项下质量浓度为 50 “2.3.2”项下供试品溶液制备方法处理后，再按“2.3.1”项
μg/mL的GA标准溶液适量，用甲醇稀释，以信噪比3∶1、 下方法进样分析，记录峰面积。采用标准曲线法计算含

·1592 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 13 中国药房 2020年第31卷第13期