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表1 各组大鼠足底疼痛阈值测定结果（x±±s，n＝6）
Tab 1 Plantar pain threshold of rats in each group（x±±s，n＝6）
组别 1 d 2 d 3 d 4 d 5 d 6 d 7 d
假手术组 13.92±0.67 13.49±0.80 14.51±1.04 14.70±0.58 13.21±0.76 12.98±0.91 14.13±0.81
模型组 6.12±0.62 ＊＊ 6.33±0.55 ＊＊ 6.39±0.63 ＊＊ 6.08±0.34 ＊＊ 4.36±0.55 ＊＊ 4.79±0.48 ＊＊ 6.06±0.15 ＊＊
8-OaS低剂量组 5.34±0.61 5.16±0.58 # 5.81±0.24 6.11±0.39 6.59±0.39 ## 6.06±0.47 # 5.76±0.48 #
8-OaS中剂量组 7.64±0.48 ##▲▲ 8.04±0.57 ##▲▲ 9.12±0.43 ##▲▲ 10.70±1.19 ##▲▲ 8.24±1.00 ##▲▲ 10.72±1.10 ##▲▲ 10.61±0.67 ##▲▲
8-OaS高剂量组 12.35±0.82 ##▲▲ΔΔ 10.00±0.30 ##▲▲ΔΔ 10.82±1.18 ##▲▲ΔΔ 10.44±0.64 ##▲▲ 11.65±0.87 ##▲▲ΔΔ 11.83±0.83 ##▲▲ 14.26±0.95 ##▲▲ΔΔ
##
▲▲
#
＊＊
注：与假手术组比较， P＜0.01；与模型组比较，P＜0.05，P＜0.01；与8-OaS低剂量组比较， P＜0.01；与8-OaS中剂量组比较，P＜0.01
ΔΔ
#
＊ ＊
▲ ▲
##
Note：vs. sham operation group， P＜0.01；vs. model group，P＜0.05，P＜0.01；vs. 8-OaS low-dose group， P＜0.01；vs. 8-OaS medium-
ΔΔ
dose group，P＜0.01
150 达，黄色为两者双重标记的阳性表达；采用 Image Pro
Plus 6.0 软件分析黄色区域的荧光密度，荧光密度越大
100 #▲Δ 则蛋白表达越强。各组大鼠脊髓背角内 Iba-1 和 p-p38
曲线下面积 #▲ MAPK 蛋白表达的免疫荧光组织染色图见图 2，荧光密
50 ＊＊ 度测定结果见表2。
0 假手术组
假手术组 模型组 8-OaS低 8-OaS中 8-OaS高
剂量组 剂量组 剂量组
注：与假手术组比较， P＜0.01；与模型组比较，P＜0.05；与
#
＊ ＊
8-OaS低剂量组比较，P＜0.05；与8-OaS中剂量组比较，P＜0.05
Δ
▲
＊＊
#
Note：vs. sham operation group， P＜0.01；vs. model group，P＜
0.05；vs. 8-OaS low-dose group， P＜0.05；vs. 8-OaS medium-dose 模型组
▲
group，P＜0.05
Δ
图1 各组大鼠足底疼痛阈值曲线下面积测定结果
Fig 1 Area under the planter pain threshold curve of
rats in each group 8-OaS组
100 μm
8-OaS高剂量组大鼠给药1～7 d后足底疼痛阈值和曲线
下面积均显著升高（P＜0.01）。经量效曲线计算得 A. Iba-1 B. p-p38 MAPK C. Iba-1+p-p38 MAPK
图 2 各组大鼠脊髓背角内 Iba-1 和 p-p38 MAPK 蛋白
8-OaS的ED50为18.87 μg/kg。
表达的免疫荧光组织染色图（×20）
2.3 各组大鼠脊髓背角内 Iba-1、p-p38 MAPK 的表达
Fig 2 Immunofluorescence staining of Iba-1 and p-
情况检测
p38 MAPK protein expression in the spinal
采用免疫荧光组织染色法检测。第二批大鼠末次
dorsal horn of rats in each group（×20）
给药后，各组取 6 只大鼠腹腔注射 7％水合氯醛（0.4
mL/kg）麻醉，迅速开胸，沿心尖位置扎入灌注针，打开灌 表 2 各组大鼠脊髓背角内 Iba-1、p-p38 MAPK 蛋白表
注阀门用 0.01 mol/L 的 PBS 迅速冲出大鼠体内血液，待 达的荧光密度测定结果（x±±s，n＝6）
其肝脏发白时加入4％多聚甲醛固定。取出固定好的大 Tab 2 Fluorescence density of Iba-1 and p-p38 MAPK
鼠脊髓 L4～L6 节段，继续固定 2 h 后取出，置于 30％蔗 in spinal dorsal horn of rats in each group（x±±
糖溶液中脱水48 h，在冷冻切片机中切成25 μm薄片，再 s，n＝6）
用 PBS 漂洗 10 min×3 次，以 5％山羊血清封闭 2 h；加入 组别 Iba-1 p-p38 MAPK Iba-1+p-p38 MAPK
单克隆小鼠抗 Iba-1 抗体和单克隆兔抗 p-p38 MAPK 抗 假手术组 358.83±152.73 129.31±52.39 92.95±21.18
模型组 2 899.77±728.60 ＊＊ 1 858.27±517.33 ＊＊ 1 645.93±485.22 ＊＊
体，于 4 ℃孵育 48 h；用 PBS 漂洗 10 min×3 次，滴加 Al- 8-OaS组 2 027.83±638.19 # 1 408.29±557.45 # 1 225.31±406.65 #
exa Flour 594 标记的驴抗小鼠 IgG 和 Alexa Flour 488 注：与假手术组比较， P＜0.01；与模型组比较，P＜0.05
®
®
＊＊
#
标记的驴抗兔 IgG，置于室温孵育 4 h；用 PBS 漂洗 10 Note：vs. sham operation group， P＜0.01，vs. model group，P＜
#
＊＊
min×3次，在暗光条件下将切片转移至载玻片上，并置于 0.05
暗盒中，待表面水分自然晾干后使用荧光封片剂封片。 由图2和表2可知，p-p38 MAPK表达阳性的细胞主
采用多通道共聚焦显微镜观察切片中表达 Iba-1、p-p38 要与Iba-1表达阳性的细胞（即小胶质细胞）重合。与假
MAPK的阳性细胞，以出现红色和绿色颗粒为其阳性表 手术组比较，模型组大鼠脊髓背角内 Iba-1 和 p-p38

·1586 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 13 中国药房 2020年第31卷第13期