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碱等4个指标成分的含量为指标,进行该药材提取工艺                                        表1 正交试验因素与水平
        的单因素考察。                                                 Tab 1 Factors and levels of orthogonal test
        2.4.1  提取溶剂的选择         称取千里光药材粗粉约 2 g,                                      因素
                                                           水平
        精密称定,平行7份,固定提取次数为2次、每次提取1.5                                A,%        B,mL/g      C,h        D,次
                                                           1        50          6          1.0        1
        h,分别加入 10 倍量(mL/g,下同)50%甲醇、60%甲醇、                  2        60          8          1.5        2
        70%甲醇、50%乙醇、60%乙醇、70%乙醇、80%乙醇作                     3        70         10          2.0        3
        为提取溶剂进行回流提取。取提取液,按“2.1.2”项下方                                    表2 正交试验设计和结果
        法滤过后,取续滤液,再按“2.2”“2.3”项下方法分别测定                          Tab 2 Design and results of orthogonal test
        绿原酸、金丝桃苷、总黄酮和总生物碱的含量。结果,以                          试 验      因素      绿原酸含量, 金丝桃苷含量, 总黄酮含量, 总生物碱含量,  M
                                                           号  A(误差) B  C  D   mg/g   mg/g   mg/g   mg/g
        50%乙醇、60%乙醇、70%乙醇为提取溶剂时,提取液中                       1   1   1  1  1    0.42   2.06   1.19   62.70  2.519
        4 种成分含量相对较高,故选择 50%乙醇、60%乙醇、                       2   1   2  2  2    3.18   7.27   0.66   71.79  5.209
                                                           3   1   3  3  3    3.55   1.58   0.12   89.88  3.611
        70%乙醇为提取溶剂进行后续工艺优化。
                                                           4   2   1  2  3    3.88   1.90   0.54   62.86  3.395
        2.4.2  溶剂倍量的选择         称取千里光药材粗粉约 2 g,             5   2   2  3  1    0.39   2.22   1.23   71.78  2.765
        精密称定,平行5份,分别加入5、6、8、10、20倍量的70%                    6   2   3  1  2    3.64   4.10   0.38   69.76  4.156
                                                           7   3   1  3  2    3.88   1.95   0.87   71.76  3.701
        乙醇,回流提取 2 次,每次提取 1.5 h。取提取液,按                      8   3   2  1  3    3.29   4.28   0.39   83.63  4.394
       “2.4.1”项下方法处理并测定绿原酸、金丝桃苷、总黄酮                        9   3   3  2  1    2.46   1.30   0.56   54.79  2.565
                                                               3.780 3.203 3.690 2.617
                                                           K1
        和总生物碱的含量。结果,随着溶剂倍量的增加,提取
                                                           K2  3.437 4.120 3.723 4.357
        液中 4 种成分的含量逐渐上升,但以 10、20 倍量溶剂提                     K3  3.553 3.447 3.357 3.797
                                                           R   0.343 0.917 0.366 1.740
        取后各成分的含量差异不大,故选择溶剂倍量为6、8、10
        倍进行后续工艺优化。                                         2.5.2  基于信息熵赋权计算综合评分(M) 以绿原酸、
                                                           金丝桃苷、总黄酮、总生物碱含量为评价指标,采用信息
        2.4.3  提取时间的选择         称取千里光药材粗粉约 2 g,
                                                           熵赋权法对各指标进行赋值并计算综合评分,参考文献
        精密称定,平行4份,加入10倍量70%乙醇,回流提取2
                                                           方法  [9-11] 建立原始指标矩阵(X)如下:
        次,每次分别均提取 0.5、1.0、1.5、2.0 h。取提取液,按
       “2.4.1”项下方法处理并测定绿原酸、金丝桃苷、总黄酮                                 0.42 3.18 3.55 3.88 0.39 3.64 3.88 3.29 2.46
        和总生物碱的含量。结果,当单次提取时间为 1.0、1.5、                               2.06 7.27 1.58 1.90 2.22 4.10 1.95 4.28 1.30
                                                               X=
        2.0 h 时,提取液中 4 种成分含量相对较高,故选择提取                              1.19 0.66 0.12 0.54 1.23 0.38 0.87 0.39 0.56
        时间为1.0、1.5、2.0 h进行后续工艺优化。                                   62.70 71.79 89.88 62.86 71.78 69.76 71.76 83.63 54.79
        2.4.4  提取次数的选择         称取千里光药材粗粉约 2 g,                 根据公式 Pij=Xij/∑Xij计算 Pij,式中 Pij表示第 j 次试
        精密称定,平行 4 份,加入 10 倍量 70%乙醇进行回流提                    验在 i 指标下的概率,将原始矩阵(X)转换为概率矩阵
        取,按单次提取时间为 1.5 h,分别提取 1、2、3、4 次。取                  (P):
        提取液,按“2.4.1”项下方法处理并测定绿原酸、金丝桃
                                                                   0.0171 0.1288 0.1438 0.1570 0.0159 0.1473 0.1573 0.1331 0.0997
        苷、总黄酮和总生物碱的含量。结果,随着提取次数的
                                                                   0.0771 0.2728 0.0592 0.0711 0.0831 0.1540 0.0731 0.1606 0.0488
        增加,提取液中4种成分的含量均逐渐上升,但分别提取                              P=
                                                                   0.2005 0.1107 0.0197 0.0903 0.2075 0.0649 0.1468 0.0653 0.0943
        3、4次后各成分的含量差异不大,故选择提取次数为1、
                                                                   0.0981 0.1124 0.1407 0.0984 0.1123 0.1092 0.1123 0.1309 0.0857
        2、3次进行后续工艺优化。
                                                                                              n
        2.5 正交设计法优化千里光提取工艺                                     根据信息熵(Hi )计算公式Hi=-(∑ PijlnPij )/lnn计
                                                                                             i=1
        2.5.1  因素与水平      根据单因素试验结果并参考文献
                                                           算各项指标的 H i (式中,n 为试验数),结果 H i=[0.928 6,
        方法  [9-11] ,对千里光的提取工艺进一步优化。以乙醇体
                                                           0.926 0,0.931 5,0.995 4];再根据权重系数(W i )计算公式
        积分数(A)、溶剂倍量(B)、提取时间(C)、提取次数(D)                                  m
                                                           W i=(1-Hi )/[ ∑(1-Hi )]计算各项指标的W i (式中,m为
        等4个因素为考察对象,以绿原酸、金丝桃苷、总黄酮和                                      i=1
                                          4
        总生物碱的含量为评价指标,采用 L9 (3)正交表进行试                       指标个数),结果W i为[0.326 9,0.338 7,0.313 5,0.020 9]。
        验设计,再按“2.2”“2.3”项下方法测定绿原酸、金丝桃                      以此对概率矩阵(P)的数据进行加权处理,计算综合评
        苷、总黄酮和总生物碱的含量。正交试验因素与水平见                           分,Mi=P1iW1+P2iW2+P3iW3+P4iW4,结果见表2。
        表1,试验设计与结果见表2。                                     2.5.3  正交试验结果分析           对正交试验进行极差分


        中国药房    2020年第31卷第12期                                            China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 12  ·1473  ·
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