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2.1.3 供试品和空白对照溶液的配制 精密称定“1.2” 供试品溶液，分别于室温下放置 0、2、4、8、12、24 h 时按
项下铁筷子不同加工炮制品，粉碎。取上述粉末1 g，置 “2.1.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积。结果，东
于250 mL圆底烧瓶中，精密加入80％甲醇100 mL，称定 莨菪苷、秦皮苷、东莨菪内酯、异嗪皮啶峰面积的RSD分
质量，回流提取2 h，放冷，再次称定质量，用80％甲醇补 别为 1.39％、1.39％、0.54％、1.84％（n＝6），表明供试品
足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶 溶液在室温下放置24 h内稳定性良好。
液。以80％甲醇作为空白对照溶液。 2.1.8 重复性试验 取铁筷子药材阴干品粉末适量，按
2.1.4 系统适用性考察 精密吸取“2.1.2”项下混合对 “2.1.3”项下方法平行制备 6 份供试品溶液，再按“2.1.1”
照品溶液、“2.1.3”项下供试品和空白对照溶液各 10 项下色谱条件进样测定，记录峰面积，并按标准曲线法
μL，按“2.1.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱图，见图 计算含量。结果，东莨菪苷、秦皮苷、东莨菪内酯、异嗪
1。结果，各待测成分的分离度均大于 1.5，理论板数以 皮啶含量的 RSD 分别为 0.59％、0.41％、1.37％、0.69％
秦皮苷计不小于 40 000。 （n＝6），表明本方法重复性良好。

1 2 1 2 2.1.9 加样回收率试验 精密称取已知含量铁筷子药
100
mAU 50 0 3 4 mAU 100 0 3 4
50
10 20 30 40 50 60 10 20 30 40 50 60 材阴干品粉末 0.5 g，共 6 份，加入与已知含量等量的东
t，min t，min 莨菪苷、秦皮苷、东莨菪内酯、异嗪皮啶对照品，按
A.阴干品（编号：S1） B.烘干品（编号：S2）
“2.1.3”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1.1”项下色谱
1 2 4 120 3 4
100
mAU 50 0 3 mAU 60 0 条件进样测定，记录峰面积并计算加样回收率，结果见
10 20 30 40 50 60 10 20 30 40 50 60 表2。
t，min t，min
C.蒸制品（编号：S3） D.炒炭品（编号：S4） 表2 加样回收率试验结果（n＝6）
600 1 3 200 Tab 2 Results of recovery tests（n＝6）
mAU 400 2 4 mAU 100
200
0 0 样品， 已知含量， 加入量， 测得量， 加样回收率， 平均加样回收率，RSD，
10 20 30 40 50 60 10 20 30 40 50 60 待测成分
t，min t，min g mg mg mg ％ ％ ％
E.混合对照品 F.空白对照 东莨菪苷 0.500 1 5.665 0 5.336 0 11.221 0 104.12 104.49 0.58
注：1. 东莨菪苷；2. 秦皮苷；3. 东莨菪内酯；4. 异嗪皮啶 0.499 9 5.662 7 5.336 0 11.246 2 104.64
Note：1. scopolin；2. fraxin；3. scopoletin；4. isofraxin 0.500 0 5.663 9 5.336 0 11.184 4 103.46
图1 高效液相色谱图 0.499 8 5.661 6 5.336 0 11.246 7 104.67
0.500 1 5.665 0 5.336 0 11.263 7 104.92
Fig 1 HPLC chromatograms 0.500 1 5.665 0 5.336 0 11.274 0 105.12
2.1.5 线性关系考察 分别取“2.1.2”项下混合对照品 秦皮苷 0.500 1 4.318 1 4.080 0 8.456 0 101.42 102.22 1.41
0.499 9 4.316 4 4.080 0 8.603 2 105.07
溶液 2 mL，置于 2、5、10、25、50、100、200 mL 量瓶中，用 0.500 0 4.317 2 4.080 0 8.459 5 101.55
80％甲醇稀释至刻度，混匀。取上述溶液各适量，按 0.499 8 4.315 5 4.080 0 8.463 0 101.65
0.500 1 4.318 1 4.080 0 8.492 3 102.31
“2.1.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱图，以进样量
0.500 1 4.318 1 4.080 0 8.452 9 101.34
（x，μg）为横坐标、峰面积（y）为纵坐标进行线性回归。 东莨菪内酯 0.500 1 0.333 4 0.351 0 0.685 0 100.17 101.45 1.64
0.499 9 0.333 3 0.351 0 0.689 8 101.57
结果见表1。
0.500 0 0.333 3 0.351 0 0.681 6 99.15
表1 4种待测成分的回归方程和线性范围 0.499 8 0.333 2 0.351 0 0.688 7 101.28
Tab 1 Regression equarion and Linear range of 4 ana- 0.500 1 0.333 4 0.351 0 0.697 2 103.65
0.500 1 0.333 4 0.351 0 0.694 5 102.88
lytes
异嗪皮啶 0.500 1 0.510 4 0.546 0 1.064 1 101.41 99.26 1.22
待测成分 回归方程 R 2 线性范围，μg 0.499 9 0.510 2 0.546 0 1.055 2 99.82
东莨菪苷 y＝1 942.6x－16.187 0 0.999 5 0.019～1.856 0.500 0 0.510 3 0.546 0 1.051 8 99.18
秦皮苷 y＝2 875.3x－8.071 8 0.999 7 0.016～1.616 0.499 8 0.510 1 0.546 0 1.048 2 98.55
东莨菪内酯 y＝4 172.2x－17.978 0 0.999 6 0.009～0.920 0.500 1 0.510 4 0.546 0 1.047 2 98.32
异嗪皮啶 y＝6 073.0x+3.651 7 0.999 8 0.006～0.624 0.500 1 0.510 4 0.546 0 1.047 0 98.28
2.1.6 精密度试验 取“2.1.2”项下混合对照品溶液适 2.1.10 样品含量测定 精密称取“1.2”项下铁筷子不同
量，按“2.1.1”项下色谱条件连续进样测定6次，记录峰面 炮制品各适量，粉碎，按“2.1.3”项下方法制备供试品溶
积。结果，东莨菪苷、秦皮苷、东莨菪内酯、异嗪皮啶峰 液，再按“2.1.1”项下色谱条件进行测定，记录峰面积并
面积的 RSD 分别为 0.84％、0.62％、0.52％、0.58％（n＝ 按标准曲线法计算各样品中4种成分的含量。每样品平
6），表明仪器精密度良好。 行操作3次。结果，与阴干品比较，烘干品、蒸制品、炒炭
2.1.7 稳定性试验 取“2.1.3”项下铁筷子药材阴干品 品中东莨菪苷、秦皮苷含量均下降，而东莨菪内酯、异嗪

中国药房 2020年第31卷第12期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 12 ·1477 ·