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表4 HO-1基因沉默后各组细胞中HO-1蛋白表达水平                              tection on glutamate-induced apoptotic HT22 cells and an
              测定结果(x±±s,n=3)                                     Alzheimer’s disease mouse model[J]. Int J Mol Sci,2017,
        Tab 4 Protein expression of HO-1 in cells after HO-1     18(8):1623-1637.
               gene silencing in each group(x±±s,n=3)       [ 2 ]  张徽,王淑静,袁天宇,等.银杏叶提取物对神经退行性疾
                                                                 病作用机制的研究进展[J].药学研究,2020,39(1):37-
        组别                                 HO-1/β-actin
        空白组                                 1.00±0.07            40.
        夜关门二氯甲烷提取物组                         4.49±0.32 *     [ 3 ]  LAI TW,ZHANG S,WANG YT. Excitotoxicity and stro-
        夜关门二氯甲烷提取物+siRNA HO-1组              1.88±0.24 Δ          ke:identifying novel targets for neuroprotection[J]. Prog
            注:与空白组比较,P<0.05;与夜关门二氯甲烷提取物组比较,                      Neurobiol,2013. DOI:10.1016/j.pneurobio.2013.11.006.
                         *
         Δ
         P<0.05                                             [ 4 ]  LUO P,FEI F,ZHANG L,et al. The role of glutamate re-
            Note:vs. blank group, P<0.05;vs. L. cuneata dichloromethane  ceptors in traumatic brain injury:implications for postsyn-
                           *
        extract group,P<0.05
                  Δ
                                                                 aptic density in pathophysiology[J]. Brain Res Bull,2011,
        表 5 HO-1 基因沉默后各组细胞存活率和细胞中 ROS                            85(6):313-320.
              水平测定结果(x±±s,n=3,%%)                           [ 5 ]  王东艳,唐超,廖彬汛,等.黔产夜关门的显微特征与其微
        Tab 5 Survival rate of cells and the level of ROS in     量元素测定[J].贵州医科大学学报,2018,43(8):37-41.
               cells after HO-1 gene silencing in each group  [ 6 ]  李春晓.土家苗药夜关门功能的本草学相关研究[J].中国
                                                                 中医药咨讯,2011,3(6):30-31.
              (x±±s,n=3,%%)
                                                            [ 7 ]  刘英波,刘亮,潘年松,等.苗药夜关门化学成分、药理作
        组别                       细胞存活率           ROS
        空白组                     100.00±4.90    100.00±6.29       用及临床应用研究进展[J].甘肃中医药大学学报,2017,
        模型组                      45.89±3.09 *  203.21±18.38 *    34(4):90-93.
        夜关门二氯甲烷提取物组              78.21±6.90 #  119.72±12.63 #  [ 8 ]  侯娟,王春元,李春艳,等.大夜关门总黄酮提纯工艺及体
        二氯甲烷提取物+siRNA HO-1组      59.20±6.59 Δ  158.11±13.09 Δ    内体外抗氧化研究[J].中国卫生工程学,2016,15(5):
            注:与空白组比较,P<0.05;与模型组比较,P<0.05;与夜关门                   421-423.
                         *
                                           #
                         Δ
        二氯甲烷提取物组比较,P<0.05                                   [ 9 ]  冯华,刘英波,刘亮,等.苗药夜关门不同部位中槲皮素的
                          *
                                             #
            Note:vs. blank group,P<0.05;vs. model group,P<0.05;vs. L.
                                                                 含量测定及 HPLC 指纹图谱[J].国际药学研究杂志,
        cuneata dichloromethane extract group,P<0.05
                                  Δ
                                                                 2016,43(5):980-984.
        生成,这说明夜关门二氯甲烷提取物具有显著的神经保                            [10]  郜红利,涂星,卢映,等.土家苗药夜关门对小鼠实验性失
        护活性。                                                     眠的疗效观察与机制初探[J].中成药,2014,36(2):
            HO-1 是一种广泛存在的抗氧化防御酶,是热休克                             383-385.
        蛋白家族中的一个成员,可代谢血红素生成一氧化碳                             [11]  RŐSSLER OG,BAUER I,CHUNG HY,et al. Glutamate-
        (CO)、胆红素和游离铁。相关研究表明,HO-1及其代谢                             induced cell death of immortalized murine hippocampal
                             [12]
        产物具有神经保护作用 。Nrf2是体内调控HO-1表达                              neurons:neuroprotective activity of heme oxygenase-1,
                                                                 heat shock protein 70,and sodium selenite[J]. Neurosci
        的重要上游蛋白,在正常状态下,Nrf2 与 Nrf2 的细胞质
                                                                 Lett,2004,362(3):253-260.
        抑制剂 Keap1 结合;在受到外界刺激时,Nrf2 从复合体
                                                            [12]  MAINES MD. Heme oxygenase:function,multiplicity,
        中解离出来后,从细胞质转移到细胞核,与HO-1启动子
                                                                 regulatory mechanisms, and clinical applications[J].
        ARE 结合,激活 HO-1 基因表达,从而发挥细胞保护作                            Faseb Journal,2015,2(10):2557-2568.
        用 [13-15] 。本研究发现,夜关门二氯甲烷提取物及CoPP可                   [13]  KIM KM,PAE HO,ZHENG M,et al. Carbon monoxide
        以诱导细胞中 HO-1 的表达,同时也可以使细胞中 Nrf2                           induces heme oxygenase-1 via activation of protein kinase
        活化并从细胞质转移至胞核;而利用 si-RNA 转染技术                             R-like endoplasmic reticulum kinase and inhibits endothe-
        进行 HO-1 基因沉默后,可以逆转夜关门二氯甲烷提取                              lial cell apoptosis triggered by endoplasmic reticulum
        物的上述作用。                                                  stress[J]. Circ Res,2017,101(9):919-927.
            综上所述,夜关门二氯甲烷提取物可通过激活谷氨                          [14]  LEE BS,HEO JH,KIM YM,et al. Carbon monoxide me-
                                                                 diates heme oxygenase 1 induction via Nrf2 activation in
        酸诱导小鼠海马细胞的 Nrf2 信号通路,来诱导细胞中
                                                                 hepatoma cells[J]. Biochem Biophys Res Commun,2016,
        HO-1 蛋白的表达,从而发挥其对细胞的保护作用。但
                                                                 343(3):965-972.
        本研究结论仍需动物药理学实验等相关研究进一步
                                                            [15]  蓝升,李金泰,刘毅.自噬在血红素氧合酶 1 抑制大鼠肝
        证实。
                                                                 脏缺血/再灌注损伤中的作用[J].中华危重病急救医学,
        参考文献                                                     2017,29(3):233-238.
        [ 1 ]  LI Z,CHEN X,LU WQ,et al. Wanti-oxidative stress ac-       (收稿日期:2019-12-26  修回日期:2020-04-21)
             tivity is essential for amanita caesarea mediated neuropro-                         (编辑:林 静)


        ·1308  ·  China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 11                                中国药房    2020年第31卷第11期
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