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量,严格按照相应试剂盒说明书操作。 3.2 血浆中LCAT、PLTP、HL含量变化
2.4 脂质代谢活性酶的测定 与空白对照组比较,模型组大鼠血浆中 HL 含量显
2.4.1 血浆中LCAT、PLTP、HL含量 取“2.2”项下各组 著降低(P<0.01);与模型组比较,各给药组大鼠血浆中
大鼠血浆样品适量,采用酶联免疫吸附测定法以酶标仪 HL 含量均显著升高(P<0.05 或 P<0.01);而各组大鼠
检测血浆中 LCAT、PLTP、HL 的含量,严格按照相应试 LCAT、PLTP 含量组间比较,差异均无统计学意义(P>
剂盒说明书操作。 0.05),详见表2。
2.4.2 肝组织中LPL、MTP、HMG-CoA还原酶含量 取 表2 各组大鼠血浆中LCAT、PLTP、HL含量的测定结
“2.2”项下冷冻贮存的肝组织适量,解冻后,切块,置于玻 果(x±±s,n=10,ng/mL)
璃组织研磨器中,加入9倍量的生理盐水,于冰上研磨3 Tab 2 Content determination results of LCAT,PLTP
min 制备肝组织匀浆。取上述肝组织匀浆适量,于 4 ℃ and HL in plasma of rats in each group(x±±s,
下以 800×g 离心 12 min 后,取上清液,采用酶联免疫吸 n=10,ng/mL)
附测定法以酶标仪检测各组大鼠肝组织中 LPL、MTP、 组别 LCAT PLTP HL
HMG-CoA 还原酶的含量,严格按照相应试剂盒说明书 空白对照组 170.54±56.44 43.41±12.23 45.43±7.83
操作。 模型组 134.43±53.05 43.15±5.80 29.38±5.36 **
阳性对照组 160.54±60.85 46.54±13.24 36.50±7.26 ##
2.5 肝组织病理形态学观察 补阳还五汤低剂量组 131.65±25.64 39.00±9.35 35.46±6.92 #
取“2.2”项下固定于 4%多聚甲醛溶液中的肝组织 补阳还五汤高剂量组 149.82±37.37 50.79±16.45 37.38±5.60 #
适量,常规包埋、切片(厚度约4 μm),依次以二甲苯透明 注:与空白对照组比较, P<0.01;与模型组比较,P<0.05,P<
#
##
**
3 min、二甲苯脱腊8 min、无水乙醇脱水5 min后,以苏木 0.01
* *
#
精染色 8 min,水洗后,以伊红染色 2 min,再次水洗,以 Note:vs. blank control group, P<0.01;vs. model group,P<
##
0.05,P<0.01
乙醇梯度脱水、二甲苯透明2次,经中性树胶封片后,置
3.3 肝组织中LPL、MTP、HMG-CoA还原酶含量变化
于光学显微镜下观察肝组织变化情况。
与空白对照组比较,模型组大鼠肝组织中 LPL、
2.6 统计学方法
MTP 含量均显著降低,HMG-CoA 还原酶含量显著升高
采用SPSS 22.0软件对数据进行统计分析。实验数
(P<0.05 或 P<0.01);与模型组比较,阳性对照组大鼠
据均以 x±s 表示,采用单因素方差分析进行多组间比
肝组织中LPL含量以及各给药组大鼠肝组织中MTP含
较,采用LSD-t检验进行组间两两比较。P<0.05表示差
异有统计学意义。 量均显著升高,各给药组大鼠肝组织中 HMG-CoA 还原
3 结果 酶含量均显著降低(P<0.05或P<0.01),详见表3。
3.1 血脂和肝功能指标变化 表 3 各组大鼠肝组织中 LPL、MTP、HMG-CoA 还原
与空白对照组比较,模型组大鼠血浆中 TG、TC、 酶含量的测定结果(x±±s,n=10,ng/mL)
LDL-C、ALT 含量均显著升高(P<0.05 或 P<0.01);与 Tab 3 Content determination results of LPL,MTP
and HMG-CoA reductase in liver tissue of rats
模型组比较,各给药组大鼠血浆中 TG、TC、LDL-C 含量
以及补阳还五汤低、高剂量组大鼠血浆中 ALT、AST 含 in each group(x±±s,n=10,ng/mL)
量均显著降低(P<0.05或P<0.01),详见表1。 组别 LPL MTP HMG-CoA还原酶
空白对照组 44.86±9.08 12.38±3.64 51.75±11.36
表 1 各组大鼠血脂和肝功能指标的测定结果(x±±s,
模型组 28.55±3.87 ** 7.86±2.70 ** 63.84±13.84 *
n=10) 阳性对照组 33.54±6.61 # 12.51±4.30 ## 50.43±12.05 #
Tab 1 Determination results of plasma lipid and liver 补阳还五汤低剂量组 30.93±6.97 10.41±3.14 # 49.66±7.77 #
补阳还五汤高剂量组 25.90±4.69 11.12±3.82 # 49.65±7.23 #
function indicators in rats of each group(x±±s,
注:与空白对照组比较,P<0.05, P<0.01;与模型组比较,P<
*
**
#
n=10)
0.05,P<0.01
##
组别 TG,mmol/L TC,mmol/L LDL-C,mmol/L ALT,U/L AST,U/L
Note:vs. blank control group, P<0.05, * * P<0.01;vs. model
*
空白对照组 0.52±0.08 1.15±0.14 0.24±0.06 35.00±7.23 62.50±6.06 # ##
模型组 0.71±0.13 ** 3.19±0.81 ** 1.42±0.37 ** 49.63±14.13 * 57.25±13.30 group,P<0.05,P<0.01
阳性对照组 0.54±0.04 ## 2.40±0.41 # 1.02±0.27 ## 47.71±8.96 59.57±5.00 3.4 肝组织病理形态变化
补阳还五汤低剂量组 0.56±0.09 ## 2.51±0.25 # 1.09±0.30 # 31.11±16.65 # 35.10±11.82 # 空白对照组大鼠肝组织中肝细胞无异常变化,排列
补阳还五汤高剂量组 0.56±0.05 ## 2.27±0.29 ## 0.85±0.19 ## 28.33±14.58 ## 36.43±13.78 ##
整齐、大小形态正常、肝小叶正常,模型组大鼠肝组织中
*
注:与空白对照组比较,P<0.05, P<0.01;与模型组比较,P<
**
#
肝细胞排列不规则、细胞索损坏,胞浆内可见脂肪滴且
##
0.05,P<0.01
Note:vs. blank control group, P<0.05, * * P<0.01;vs. model 肝小叶界限不清,出现明显的细胞脂肪变性;阳性对照
*
group,P<0.05,P<0.01 组大鼠肝组织中肝细胞排列整齐、肝小叶正常,胞浆内
##
#
中国药房 2020年第31卷第10期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 10 ·1205 ·