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冰箱冻存;另参照文献报道的方法 ,用手术线结扎各组 显著延长(P<0.01);与模型组比较,干预组大鼠的
[11]
大鼠右主支气管;抽取生理盐水 1 mL 注入左肺后回收 MAN显著增加,MLI显著缩短(P<0.01),详见表1。
BALF,反复4次,共收集BALF约4 mL,以1 500 r/min离 表1 各组大鼠肺组织中MAN、MLI比较(x±±s,n=8)
心10 min后取上清液,置于-80 ℃冰箱冻存。 Tab 1 Comparison of MAN and MLI in lung tissue of
2.5 指标检测 rats in each group(x±±s,n=8)
参照本课题组前期经验 ,取各组大鼠右肺制作石 组别 MAN,×10 个/m 2 MLI,×10 m/个
[11]
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6
蜡切片,经HE染色后,使用光学显微镜观察肺组织的病 对照组 673.00±25.96 34.88±3.44
理变化。随机选取每张HE染色切片3个视野,测量长、 模型组 225.88±42.24 * 59.63±4.63 *
干预组 425.13±55.96 # 46.38±4.63 #
宽,计算视野面积,并计数总肺泡数,以总肺泡数/视野面
#
注:与对照组比较,P<0.01;与模型组比较,P<0.01
*
积计算单位面积内的肺泡数(MAN)。然后取视野长和
*
Note:vs. control group,P<0.01;vs. model group,P<0.01
#
宽中点,画一个十字交叉线,算出十字线总长度,并计数 3.2 氧化应激相关指标变化
该线上的肺泡隔数,以总长度/肺泡隔数计算内衬间隔
与对照组比较,模型组大鼠 BALF 中 MDA 含量显
(MLI)。使用分光光度仪按相应检测试剂盒说明书方
著升高,GSH 含量和 SOD、GSH-Px 活性均显著降低
法 检 测 各 组 大 鼠 BALF 中 MDA、GSH 含 量 和 SOD、 (P<0.01);与模型组比较,干预组大鼠BALF中MDA含
GSH-Px活性,以及BALF和血清中AECA含量。 量显著降低,GSH含量和SOD、GSH-Px活性均显著升高
2.6 统计学方法
(P<0.01),详见表2。
采用SPSS 22.0软件对数据进行统计分析。所有数
据经 K-S 检验,符合正态分布且方差齐时,计量资料以 表 2 各 组 大 鼠 BALF 中 MDA、GSH 含 量 和 SOD、
GSH-Px活性比较(x±±s,n=8)
x±s 表示,多组间比较采用单因素方差分析,组间两两
Tab 2 Comparison of MDA and GSH contents,SOD
比较采用LSD-t检验;不符合正态分布时,计量资料以四
分位数间距表示,采用非参数检验。相关性分析采用 and GSH-Px activities in BALF of rats in each
group(x±±s,n=8)
Pearson相关分析。P<0.05为差异有统计学意义。
组别 GSH,μmol/L MDA,μmol/L SOD,U/mL GSH-Px,U/mL
3 结果
对照组 0.78±0.12 28.54±9.04 34.01±4.89 18.11±3.22
3.1 肺组织病理变化 模型组 0.23±0.11 * 253.43±41.80 * 13.98±3.98 * 6.11±1.93 *
对照组大鼠肺泡间隔完整,肺组织结构正常,详见 干预组 0.50±0.18 # 160.20±31.37 # 21.49±2.43 # 11.79±1.29 #
#
图1A;模型组大鼠肺组织可见部分区域肺泡扩张,部分 注:与对照组比较,P<0.01;与模型组比较,P<0.01
*
#
*
肺泡间隔变窄,肺泡间隔断裂所致的相邻肺泡融合成一 Note:vs. control group,P<0.01;vs. model group,P<0.01
个大的囊腔,呈现出明显的肺气肿病理现象,详见图1B; 3.3 AECA含量变化
干预组大鼠肺组织可见肺气肿病理改变,但改变程度不 与对照组比较,模型组大鼠 BALF 和血清中 AECA
及模型组严重,详见图1C。 含量均显著升高(P<0.01);与模型组比较,干预组大鼠
BALF和血清中AECA含量均显著降低(P<0.01),详见
表3。
表3 各组大鼠BALF和血清中AECA含量比较(x±±s,
n=8)
Tab 3 Comparison of AECA contents in BALF and se-
rum of rats in each group(x±±s,n=8)
A.对照组 B.模型组 AECA,ng/mL
组别
BALF 血清
对照组 14.56±4.29 10.77±7.16
模型组 55.04±8.41 * 47.46±9.78 *
干预组 35.79±7.08 # 31.16±7.41 #
*
#
注:与对照组比较,P<0.01;与模型组比较,P<0.01
*
#
Note:vs. control group,P<0.01;vs. model group,P<0.01
3.4 AECA与氧化应激指标相关性
C.干预组 通过对模型组大鼠BALF中AECA与氧化应激指标
图 1 各组大鼠肺组织病理切片的显微图(HE 染色,× 进行相关性分析发现,AECA 与 MDA 呈正相关(r=
400) 0.710,P<0.05);AECA与GSH、SOD、GSH-Px呈负相关
Fig 1 Micrographs of pathological sections of lung tis- (r=-0.754、-0.781、-0.736,P<0.05),详见图2。
sues of rats in each group(HE staining,×400) 4 讨论
与对照组比较,模型组大鼠的MAN显著减少,MLI 众所周知,慢性气道炎症、氧化应激反应、蛋白酶-
·1210 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 10 中国药房 2020年第31卷第10期