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冰箱冻存;另参照文献报道的方法 ,用手术线结扎各组                           显著延长(P<0.01);与模型组比较,干预组大鼠的
                                     [11]
        大鼠右主支气管;抽取生理盐水 1 mL 注入左肺后回收                         MAN显著增加,MLI显著缩短(P<0.01),详见表1。
        BALF,反复4次,共收集BALF约4 mL,以1 500 r/min离                 表1 各组大鼠肺组织中MAN、MLI比较(x±±s,n=8)
        心10 min后取上清液,置于-80 ℃冰箱冻存。                           Tab 1 Comparison of MAN and MLI in lung tissue of
        2.5 指标检测                                                   rats in each group(x±±s,n=8)
            参照本课题组前期经验 ,取各组大鼠右肺制作石                          组别              MAN,×10 个/m 2         MLI,×10 m/个
                                 [11]
                                                                                                      -6
                                                                                 6
        蜡切片,经HE染色后,使用光学显微镜观察肺组织的病                           对照组             673.00±25.96           34.88±3.44
        理变化。随机选取每张HE染色切片3个视野,测量长、                           模型组             225.88±42.24 *         59.63±4.63 *
                                                            干预组             425.13±55.96 #         46.38±4.63 #
        宽,计算视野面积,并计数总肺泡数,以总肺泡数/视野面
                                                                                             #
                                                               注:与对照组比较,P<0.01;与模型组比较,P<0.01
                                                                            *
        积计算单位面积内的肺泡数(MAN)。然后取视野长和
                                                                               *
                                                               Note:vs. control group,P<0.01;vs. model group,P<0.01
                                                                                                  #
        宽中点,画一个十字交叉线,算出十字线总长度,并计数                           3.2 氧化应激相关指标变化
        该线上的肺泡隔数,以总长度/肺泡隔数计算内衬间隔
                                                                与对照组比较,模型组大鼠 BALF 中 MDA 含量显
        (MLI)。使用分光光度仪按相应检测试剂盒说明书方
                                                            著升高,GSH 含量和 SOD、GSH-Px 活性均显著降低
        法 检 测 各 组 大 鼠 BALF 中 MDA、GSH 含 量 和 SOD、            (P<0.01);与模型组比较,干预组大鼠BALF中MDA含
        GSH-Px活性,以及BALF和血清中AECA含量。                          量显著降低,GSH含量和SOD、GSH-Px活性均显著升高
        2.6 统计学方法
                                                           (P<0.01),详见表2。
            采用SPSS 22.0软件对数据进行统计分析。所有数
        据经 K-S 检验,符合正态分布且方差齐时,计量资料以                         表 2   各 组 大 鼠 BALF 中 MDA、GSH 含 量 和 SOD、
                                                                  GSH-Px活性比较(x±±s,n=8)
        x±s 表示,多组间比较采用单因素方差分析,组间两两
                                                            Tab 2  Comparison of MDA and GSH contents,SOD
        比较采用LSD-t检验;不符合正态分布时,计量资料以四
        分位数间距表示,采用非参数检验。相关性分析采用                                    and GSH-Px activities in BALF of rats in each
                                                                   group(x±±s,n=8)
        Pearson相关分析。P<0.05为差异有统计学意义。
                                                            组别       GSH,μmol/L  MDA,μmol/L  SOD,U/mL  GSH-Px,U/mL
        3 结果
                                                            对照组      0.78±0.12  28.54±9.04  34.01±4.89  18.11±3.22
        3.1  肺组织病理变化                                        模型组      0.23±0.11 *  253.43±41.80 *  13.98±3.98 *  6.11±1.93 *
            对照组大鼠肺泡间隔完整,肺组织结构正常,详见                          干预组      0.50±0.18 #  160.20±31.37 #  21.49±2.43 #  11.79±1.29 #
                                                                                             #
        图1A;模型组大鼠肺组织可见部分区域肺泡扩张,部分                              注:与对照组比较,P<0.01;与模型组比较,P<0.01
                                                                            *
                                                                                                  #
                                                                               *
        肺泡间隔变窄,肺泡间隔断裂所致的相邻肺泡融合成一                               Note:vs. control group,P<0.01;vs. model group,P<0.01
        个大的囊腔,呈现出明显的肺气肿病理现象,详见图1B;                          3.3  AECA含量变化
        干预组大鼠肺组织可见肺气肿病理改变,但改变程度不                                与对照组比较,模型组大鼠 BALF 和血清中 AECA
        及模型组严重,详见图1C。                                       含量均显著升高(P<0.01);与模型组比较,干预组大鼠
                                                            BALF和血清中AECA含量均显著降低(P<0.01),详见
                                                            表3。
                                                            表3   各组大鼠BALF和血清中AECA含量比较(x±±s,
                                                                 n=8)
                                                            Tab 3 Comparison of AECA contents in BALF and se-
                                                                   rum of rats in each group(x±±s,n=8)
                  A.对照组                   B.模型组                                       AECA,ng/mL
                                                            组别
                                                                         BALF                   血清
                                                            对照组         14.56±4.29            10.77±7.16
                                                            模型组         55.04±8.41 *          47.46±9.78 *
                                                            干预组         35.79±7.08 #          31.16±7.41 #
                                                                            *
                                                                                             #
                                                               注:与对照组比较,P<0.01;与模型组比较,P<0.01
                                                                               *
                                                                                                  #
                                                               Note:vs. control group,P<0.01;vs. model group,P<0.01
                                                            3.4 AECA与氧化应激指标相关性
                              C.干预组                             通过对模型组大鼠BALF中AECA与氧化应激指标
        图 1   各组大鼠肺组织病理切片的显微图(HE 染色,×                       进行相关性分析发现,AECA 与 MDA 呈正相关(r=
              400)                                          0.710,P<0.05);AECA与GSH、SOD、GSH-Px呈负相关
        Fig 1  Micrographs of pathological sections of lung tis-  (r=-0.754、-0.781、-0.736,P<0.05),详见图2。
               sues of rats in each group(HE staining,×400)  4 讨论
            与对照组比较,模型组大鼠的MAN显著减少,MLI                            众所周知,慢性气道炎症、氧化应激反应、蛋白酶-


        ·1210  ·  China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 10                                中国药房    2020年第31卷第10期
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