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最易辨认的色谱峰（如最后一个色谱峰异绿原酸C）进行 用于预测各成分的出峰时间，随后将Lubex Kromasil C18
[15]
两点校正 ，同法绘制校正曲线。结果发现，两点校正 的标准保留时间带入校正方程，计算各成分的预测保留
与7个点绘制的标准曲线基本重合，提示两点校正法可 时间，结果见表3。

表3 两点校正法预测出峰时间定位色谱峰
Tab 3 Peak time to locate chromatographic peaks predicted by correction equation
仪器 色谱柱 保留时间 新绿原酸 绿原酸 隐绿原酸 连翘酯苷A 异绿原酸B 异绿原酸A 异绿原酸C
Dionex Lubex Kromasil C18 标准保留时间（tR，x） 6.400 8.592 8.975 13.625 15.350 16.100 16.825
5.850 7.900 8.342 13.117 14.725 15.375 16.183
AkzoNobel Kromasil C18 实测tR
预测tR （y＝1.006x－0.744） 5.694 7.900 8.285 12.963 14.698 15.453 16.182
实测tR与预测tR的RE，％ －2.66 －0.01 －0.69 －1.18 －0.18 0.50 －0.01
5.925 7.967 8.400 13.242 14.775 15.383 16.242
Dikma Silversil C18 实测tR
预测tR （y＝1.005x－0.669） 5.763 7.966 8.351 13.024 14.758 15.512 16.240
实测tR与预测tR的RE，％ －2.73 －0.01 －0.58 －1.65 －0.12 0.84 －0.01
Shimadzu Lubex Kromasil C18 实测tR 5.837 7.853 8.288 13.018 14.614 15.261 16.058
预测tR （y＝0.997x－0.710） 5.671 7.856 8.238 12.874 14.594 15.342 16.065
实测tR与预测tR的RE，％ －2.85 0.04 －0.60 －1.11 －0.14 0.53 0.04
5.609 7.542 7.971 13.036 14.646 15.291 16.102
AkzoNobel Kromasil C18 实测tR
预测tR （y＝1.040x－1.392） 5.265 7.545 7.943 12.779 14.573 15.353 16.107
实测tR与预测tR的RE，％ －6.13 0.04 －0.35 －1.97 －0.50 0.41 0.03
5.629 7.486 7.884 13.406 15.118 15.795 16.816
Dikma Silversil C18 实测tR
预测tR （y＝1.133x－2.251） 5.000 7.484 7.918 13.186 15.141 15.990 16.812
实测tR与预测tR的RE，％ －11.17 －0.03 0.43 －1.64 0.15 1.24 －0.03
由表3可知，即使采用不同的仪器和色谱柱，随着保 法测得含量的RE绝对值均小于2％，表明两者测定结果
留时间的增加，采用两点校正法的预测保留时间和实测 基本一致，QAMS法可用于小儿金翘颗粒中多指标成分
保留时间的 RE 绝对值较低，且非常接近。但若选择的 的测定[RE＝（QAMS 法测得值－标准曲线法测得值）/
点不包含第 1 个色谱峰，则第 1 个色谱峰的定位不准。 标准曲线法测得值×100％]。
因此对于第1个色谱峰新绿原酸，可采用相对保留时间 表4 含量测定结果比较（n＝3，mg/g）
校正法预测定位，其余成分的色谱峰可采用两点校正法 Tab 4 Comparison of the results of content determi-
预测定位，这可使每个色谱峰均能获得准确的预测保留 nation（n＝3，mg/g）
时间（RE＜2％）。若色谱峰临近处还有其他色谱峰，则 20180912 20181106 20181228
待测成分
可根据各成分的紫外吸收光谱（图 2）、整体峰形或峰面 标准曲线法 QAMS法 RE，％ 标准曲线法 QAMS法 RE，％ 标准曲线法 QAMS法 RE，％
新绿原酸 2.903 2.882 －0.73 3.438 3.416 －0.62 2.811 2.790 －0.75
[15]
积百分比进一步确认 。 绿原酸 15.288 15.302 0.09 17.893 17.907 0.08 14.512 14.526 0.10
隐绿原酸 3.739 3.763 0.63 4.508 4.531 0.52 3.801 3.824 0.62
120
连翘酯苷A 1.656 1.625 －1.82 2.012 1.982 －1.49 1.940 1.910 －1.55
％ 100 异绿原酸B 1.516 1.495 －1.37 1.544 1.523 －1.35 1.108 1.087 －1.88
relative absorbance， 60 异绿原酸C 4.428 4.461 0.75 5.045 5.078 0.66 3.597 3.631 0.93
80
1.434 －1.80
异绿原酸A
2.245
1.905 －1.36
1.460
2.219 －1.17
1.931
40
3 讨论
20
3.1 相对校正因子计算
0
本研究采用斜率校正法计算相对校正因子，即以各
200 220 240 260 280 300 320 340 360 380
λ，nm 待测成分与内参物标准曲线斜率之比作为校正因子，该
注：1.新绿原酸；2.绿原酸；3.隐绿原酸；4.异绿原酸 B；5.异绿原酸
方法相对于多点校正更加简便、快捷 。采用斜率校正
[12]
A；6.异绿原酸C；7.连翘酯苷A
法的结果与标准曲线法结果之间的差异主要由斜率截
Note：1. neochlorogenic acid；2. chlorogenic acid；3. cryptochloro-
genic acid；4. isochlorogenic acid B；5. isochlorogenic acid A；6. iso- 距造成，故当标准曲线线性关系较好，斜率截距之比＞
chlorogenic acid C；7. forsythoside A 100时，二者之间的差异才能足够小，以斜率校正法计算
图2 紫外吸收光谱图
[16]
校正因子才具有较好的可行性和准确性 。
Fig 2 UV absorption spectra
3.2 色谱峰的定位
2.11 含量测定结果比较 有研究认为，在色谱峰定位时，以各条件下相对保
分别采用 QAMS 法和标准曲线法测定样品中各成 留时间的RSD＜5％作为色谱峰准确定位的依据 。但
[11]
分的含量，平行操作3次，结果见表4。结果显示，2种方 本研究结果发现，即使满足该条件，保留时间靠后的色
中国药房 2020年第31卷第10期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 10 ·1183 ·