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relative error between the relative retention time of components to be tested predicted by two-point correction combined with
        relative retention time correction and measured value was less than 2％ . The contents measured by QAMS were 2.790-3.416，
        14.526-17.907，3.763-4.531，1.625-1.982，1.087-1.523，1.434-2.219，3.631-5.078 mg/g；the contents measured by SCM method
        were 2.811-3.438，14.512-17.893，3.739-4.508，1.656-2.012，1.108-1.544，1.460-2.245，3.597-5.045 mg/g；relative errors of the
        two methods were within±2％. CONCLUSIONS：Two-point correction method combined with relative retention time correction
        can accurately locate the peaks of each constituent；established QAMS method is simple，rapid，accurate and reliable，it can be
        used for simultaneous determination of 7 constituents in Xiao’er jinqiao granules.
        KEYWORDS     QAMS；Xiao’er jinqiao granules；Content determination；Peak location；Two-point correction method；Relative
        retention time correction


            小儿金翘颗粒是由金银花、连翘、葛根、大青叶、山                         1   材料
        豆根、柴胡、甘草等中药组成的复方制剂，具有疏风清                            1.1 仪器
        热、解毒利咽、消肿止痛之功效 ，临床上主要用于治疗                               P680-PDA 型 HPLC 仪，包括四元梯度泵、二极管阵
                                   [1]
        小儿急性上呼吸道感染、流行性感冒、急性扁桃体炎、小                           列检测器、柱温箱和色谱工作站（美国 Dionex 公司）；
        儿手足口病等       [2-5] 。该制剂中金银花为君药，含有绿原                 LC2030型HPLC仪，包括四元梯度泵、紫外检测器、自动
        酸、新绿原酸、隐绿原酸和异绿原酸A、B、C等多种酚酸                          进样器、柱温箱和色谱工作站（日本 Shimadzu 公司）；
                                                      [6]
        类成分，具有较强的抗菌、抗炎、抗氧化等生物活性 。                           MS105DU 型十万分之一电子天平（瑞士 Mettler-Toledo
        连翘酯苷 A 是臣药连翘的主要活性成分，具有抗菌、抗                          公司）；AS7240A型超声波清洗器（天津奥特赛恩斯仪器
        病毒、抗氧化等药理活性 。《国家药品标准：新药转正标                          有限公司）；Direct-Q3 型超纯水系统（美国 Millipore 公
                              [7]
        准（第 66 册）》 中记载，小儿金翘颗粒以绿原酸为质量                        司）。
                    [1]
        控制指标，采用高效液相色谱法（HPLC）检测。虽然也                          1.2  药品与试剂
                                                                小儿金翘颗粒（四川凯京制药有限公司，批号：
        有文献报道了小儿金翘颗粒的质量控制，但均以绿原酸
                                                            20180912、20181106、20181228，规格：5 g/袋）；小儿金翘
        或连翘苷含量为指标          [8-9] 。由于绿原酸类成分性质不稳
                                                            阴性对照颗粒（由本课题组按该制剂的处方工艺分别制
        定，在储存过程中可与其异构体发生相互转化 ，因此
                                                 [10]
                                                            得的缺金银花、连翘的阴性样品）；新绿原酸对照品（批
        以绿原酸单一成分作为评价指标具有一定的片面性，无
                                                            号：A0023-19031001，纯度：99.67％）、绿原酸对照品（批
        法准确反映制剂的质量。连翘的有效成分连翘苷含量
                                                            号：A0022-19030620，纯度：99.39％）、隐绿原酸对照品
        较低，且在本研究前期试验中发现，其在小儿金翘颗粒
                                                           （批号：A0024-19032403，纯度：99.07％）、异绿原酸 B 对
        中难以检测，故连翘苷不宜作为评价指标，而宜选择含
                                                            照品（批号：A0026-19031602，纯度：99.05％）、异绿原酸
        量更高且更稳定的活性成分连翘酯苷A作为指标成分。
                                                            A 对照品（批号：A0025-19032601，纯度：98.82％）、异绿
            在中药多指标定量分析中，由于部分对照品紧缺、
                                                            原酸 C 对照品（批号：A0027-19031603，纯度：99.84％）、
        昂贵，导致传统多指标定量检测成本较高。而一测多评
                                                            连 翘 酯 苷 A 对 照 品（批 号 ：A0590-18061301，纯 度 ：
        法（QAMS）能以一种便宜、易得的对照品为内参物，通
                                                            99.15％）均购自成都曼斯特生物科技有限公司；乙腈、甲
                                          [11]
        过相对校正因子测定其他成分的含量 。QAMS 法的
                                                            醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯，水为超纯水。
        关键是如何准确定位各成分的色谱峰，但由于仪器、色                            2 方法与结果
        谱柱不同，待测成分的保留时间会发生明显飘移，从而
                                                            2.1 色谱条件
        影响其准确定位。目前，常用的色谱峰定位方法包括相                                色 谱 柱 ：Lubex Kromasil C18 （250 mm × 4.6 mm，5
        对保留时间校正法和两点校正法，其中相对保留时间校                            µm）；流动相：乙腈（A）-0.1％磷酸水溶液（B），梯度洗脱
        正法仅适用于保留时间靠前的色谱峰，随着保留时间的                           （0～5 min，10％A→15％A；5～15 min，15％A→30％A；
        增加，其定位误差越大 ；两点校正法适用于相对保留                            15～16 min，30％A→10％A；16～20 min，10％A）；检测
                            [11]
        时间靠后的色谱峰，但唯一不足的是保留时间靠前的                             波长：326 nm；流速：1.0 mL/min；柱温：40 ℃；进样量：10
                                     [11]
        （特别是第 1 个）色谱峰定位不准 。基于此，本研究采                         µL。
        用 QAMS 法同时测定小儿金翘颗粒中绿原酸、新绿原                          2.2 溶液的制备
        酸、隐绿原酸、异绿原酸 A、异绿原酸 B、异绿原酸 C、连                       2.2.1  混合对照品溶液        分别精密称取新绿原酸、绿原
        翘酯苷A的含量；通过两点校正法结合相对保留时间校                            酸、隐绿原酸、连翘酯苷 A、异绿原酸 B、异绿原酸 A、异
        正法对待测成分进行色谱峰定位，旨在为进一步完善和                            绿原酸C对照品适量，加75％甲醇溶解，制成上述7种成
        提高该药的质量标准提供参考。                                      分 质 量 浓 度 分 别 为 0.927、3.736、1.302、0.715、0.456、


        ·1180  ·  China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 10                                中国药房    2020年第31卷第10期
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