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各给药组小鼠肝糖原含量显著升高（P＜0.05 或 P＜                        验及 Box-Behnken 响应面优化法，通过抗疲劳实验，以
        0.01），详见表6。                                        小鼠运动能力结合其血液/组织中相关生化指标的综合
        表 5  各组小鼠血清尿素氮和肝糖原含量的测定结果                          评分确定了4种药材的最佳处方用量。同时，对此优化
            （x±±s，n＝10）                                    配比组方进行了小鼠抗疲劳活性验证实验以及急性毒
        Tab 5 Results of content determination of serum urea  性实验，考察优选复方人参健体方的抗疲劳功效和安
               nitrogen and liver glycogen in mice of each  全性。
               group（x±±s，n＝10）                                经查阅相关文献中常用阳性药               [9-11] ，同时考虑本复

               血清尿素氮，   肝糖原含量，          血清尿素氮，  肝糖原含量，     方后续研发方向为抗疲劳制剂，故采用红景天胶囊为阳
         组别                       组别
                mmol/L   mg/100 g        mmol/L  mg/100 g  性对照药，与所优选的复方健体方进行抗疲劳活性的
        空白对照组  7.44±0.64  1 175.91±141.49  复方中剂量组 6.58±0.72 ＊  1 494.73±125.56 ＊＊  比较。
        阳性对照组  5.02±0.48 ＊＊  1 845.00±125.18 ＊＊  复方高剂量组 5.36±0.74 ＊＊  1 566.40±107.86 ＊＊
        复方低剂量组 6.87±0.56 ＊  1 351.12±122.77 ＊                  负重游泳实验是经典抗疲劳活性，本研究在此基础
                                                           上结合小鼠运动后体内血清尿素氮、肝糖原的含量和血
           注：与空白对照组比较，P＜0.05， P＜0.01
                                  ＊＊
                           ＊
                               ＊
                                      ＊＊
           Note：vs. blank control group， P＜0.05， P＜0.01    乳酸含量及曲线下面积变化，多指标综合评价不同配比
        表 6  各组小鼠血乳酸含量及曲线下面积的测定结果                          复方人参健体方的抗疲劳效果，使其结果更加可靠。其
            （x±±s，n＝10）                                    中，血清中尿素是蛋白质的代谢产物，当机体剧烈运动
        Tab 6 Results of blood lactate content and its AUC in  时，蛋白质及氨基酸的分解代谢增强，氨基酸会代谢转
               mice of each group（x±±s，n＝10）               化生成尿素进入血液，使血清尿素氮含量增加，这也是
                         血乳酸含量，mmmol/L                     疲劳时出现肌肉酸痛的主要原因，血清尿素氮含量越
        组别                                    血乳酸曲线下面积
                  游泳前    游泳结束后即刻 游泳结束后休息20 min后            高，表明身体对运动负荷的适应性越差、越易产生疲
        空白对照组    3.52±1.26  5.12±0.75  4.03±0.56  132.30±16.24  劳 [12-14] 。肝糖原的重要性主要体现在饥饿或运动状态下
        阳性对照组    2.67±1.33 ＊＊  3.28±0.32 ＊＊  2.50±0.41 ＊＊  89.25±14.48 ＊＊
        复方低剂量组   3.41±0.85  4.82±0.99  3.52±0.68  125.40±17.45  肝糖原分解进入血液以维持血糖的恒定，当肝糖原被大
        复方中剂量组   2.89±0.81 ＊  4.68±0.44 ＊  3.26±0.65 ＊  118.23±11.69 ＊  量消耗时，机体便会产生疲劳 [15-16] 。因此，肝糖原的含量
        复方高剂量组   2.62±1.33 ＊＊  3.62±0.45 ＊＊  2.78±0.52 ＊＊  96.34±13.47 ＊＊  是检测疲劳是否发生的一项重要指标。乳酸是糖无氧
                                  ＊＊
           注：与空白对照组比较，P＜0.05， P＜0.01                       酵解的产物，血乳酸的堆积会使肌肉发生收缩而挤压血
                           ＊
                                      ＊＊
           Note：vs. blank control group， P＜0.05， P＜0.01
                               ＊
                                                           管，使得血流不畅、肌肉功能下降，继而使机体产生疲
        3.3.5  对小鼠运动后血乳酸含量及曲线下面积的影响
                                                           劳 [17-18] 。因此，血乳酸被认为是影响运动性疲劳的重要
          与空白对照组比较，阳性对照组和复方中、高剂量组
                                                           因素，可作为评判机体疲劳程度的指标。本研究结果显
        小鼠在3个不同时间点的血乳酸含量及曲线下面积均显
                                                           示，最优配比的复方人参健体方可以显著降低运动后小
        著降低（P＜0.05或P＜0.01），详见表6。
                                                           鼠的血清尿素氮水平，显著提高其肝糖原水平，显著减
        3.3.6  综合评分验证结果          按复方中剂量组的验证试
                                                           少其血乳酸的产生和加快乳酸的分解，加之还可显著延
        验结果，小鼠负重游泳运动时间为 26.80 min，运动后
                                                           长小鼠负重游泳时间，因此证实其可增强小鼠的抗疲劳
        血 清 尿 素 氮 为 6.58 mmol/L、肝 糖 原 含 量 为 1 494.73       能力。小鼠急性毒性实验结果显示，小鼠经口 MTD 均
        mg/100 g、血乳酸曲线下面积为118.23，则综合评分平均                   大于15 g/kg，属无毒级。
        值为96.95，与理论预测值97.01仅相差0.06％，由此可见                       综上所述，复方人参健体方的最优组方配比为人参
        经Box-Behnken响应面设计优化的处方配比可行。                        1.5 g、山药 10 g、枸杞子 10 g、益智仁 3 g；该优化复方提
        3.4  小鼠急性毒性实验结果                                    取物对小鼠具有显著的抗疲劳活性，且未见明显毒副作
            两种性别的小鼠均未见死亡现象发生，优化复方的                         用，具有良好的开发应用前景，但其具体作用机制还需
                                                   [8]
        经口 MTD 均大于 15 g/kg，急性毒性分级属无毒级 ，详                   要一步研究。
        见表7。                                               参考文献
                   表7 小鼠急性毒性实验结果                           [ 1 ]  李红琼，王天芳，薛晓琳，等.疲劳性亚健康判定标准及中
              Tab 7 Results of acute toxic test of mice         医常见证候的文献研究[J].世界中西医结合杂志，2019，
                给药前体质量   给药后第14天体质量      中毒   死亡   MTD，         14（6）：768-771.
        小鼠性别 n                       形态
                 （x±s），g   （x±s），g       特征   只数   g/kg    [ 2 ]  吴良文，陈宁.运动性疲劳的机制与大豆多肽对其调控的
        雄性   10  19.25±1.32  31.54±2.19  正常  无  0   16          研究进展[J].食品科学，2019，40（17）：302-308.
        雌性   10  18.97±1.47  30.92±1.75  正常  无  0   16
                                                           [ 3 ]  王换换，申正杰，肖航，等.灵芝孢子粉对小鼠抗疲劳作用
        4 讨论                                                    及生化机制初探[J].营养学报，2019，41（2）：173-177.
            本课题组以中医经典古方为参照，确定复方人参健                         [ 4 ]  麻海娟，曾丽梅，黄诚.植物雌激素类抗运动疲劳的研究
        体方的组方药材分别为人参、山药、枸杞子和益智仁。                                现状[J].赣南医学院学报，2018，38（4）：410-412.
        为优化该方的药材组方配比，本研究先后采用单因素试                           [ 5 ]  徐叔云，卞如濂，陈修.药理实验方法学[M].2版.北京：人


        中国药房    2020年第31卷第8期                                              China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 8  ·931  ·
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