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（批号：171237-201510，纯度：≥98％）均购自中国食品                   时间和峰面积为参照，计算各共有峰的相对保留时间和
        药品检定研究院；柚皮苷对照品（批号：wkq19012809，纯                     相对峰面积。结果，18 个共有峰相对保留时间的 RSD
        度：≥98％）、桂皮醛对照品（批号：wkq19031207，纯                     为0.69％～1.31％（n＝6），相对峰面积的RSD为0.51％～
        度：≥98％）均购自四川维克奇生物有限公司；东莨菪苷                          1.83％（n＝6），表明供试品溶液于室温下放置 24 h 内稳
        对照品（批号：16040805）、东莨菪内酯对照品（批号：                       定性良好。
        161208）、绿原酸对照品（批号：1701904）、隐绿原酸对照                   2.1.6  重复性试验       取样品（编号：S1）约 10 mL，共 6
        品（批 号 ：17061401）、新 绿 原 酸 对 照 品（批 号 ：                份，按“2.1.3”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1.1”项
        17062003）、异绿原酸 A 对照品（批号：18090301）、异绿                下色谱条件进样测定，以东莨菪内酯峰的保留时间和峰
        原酸B对照品（批号：17121201）、异绿原酸C对照品（批                      面积为参照，计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面
        号：18070401）均购自上海圻明生物科技有限公司（纯度                       积。结果，18个共有峰相对保留时间的RSD为0.19％～
        均不低于 98％）；乙腈、甲醇为色谱纯，其余试剂均为分                         0.81％（n＝6），相对峰面积的 RSD 为 0.41％～1.59％
        析纯，水为超纯水。                                          （n＝6），表明本方法重复性良好。
        2 方法与结果                                             2.1.7 HPLC指纹图谱的建立           取10批样品，按“2.1.3”
        2.1 指纹图谱的建立                                         项下方法制备供试品溶液，再按“2.1.1”项下色谱条件进
        2.1.1  色谱条件      色谱柱：Inertsil ODS-3 C18 （150 mm ×   样测定，记录色谱图。采用《中药色谱指纹图谱相似度
        4.6 mm，5 μm）；流动相：乙腈（A）-0.1％磷酸水溶液（B），                评价系统（2012版）》，以S4样品（随机选取）色谱图作为
        梯 度 洗 脱（0～15 min，5％ A；15～15.01 min，5％ A→            对照色谱，设定时间窗为 0～120 min，时间宽度为 0.3
        10％ A；15.01～40 min，10％ A→15％ A；40～70 min，           min，经多点校正后自动匹配，采用平均值法生成 HPLC
        15％A→25％A；70～90 min，25％A→40％A；90～110                叠加指纹图谱和对照指纹图谱，详见图1、图2。
        min，40％A→70％A；110～120 min，70％A）；检测波长：                 400
        210 nm（10～15 min，盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱）、300
                                                              300
        nm（70～120 min，桂皮醛）、345 nm（15～70 min，新绿原                                                         S10
                                                                                                        S8
        酸、东莨菪苷、绿原酸、隐绿原酸、东莨菪内酯、异绿原酸                           mAU  200                                   S9
                                                                                                        S7
                                                                                                        S6
        A、异绿原酸C、柚皮苷、异绿原酸B）；流速：1.0 mL/min；                     100                                       S5
                                                                                                        S4（R）
                                                                                                        S3
        柱温：25 ℃，进样量：10 μL。                                     0                                        S2
                                                                                                        S1
        2.1.2  混合对照品溶液Ⅰ的制备             精密称取盐酸麻黄                 0      20    40     60    80     100   120
                                                                                   t，min
        碱、盐酸伪麻黄碱、新绿原酸、东莨菪苷、绿原酸、隐绿原                          图1   10批冯了性风湿跌打药酒的HPLC叠加指纹图谱
        酸、东莨菪内酯、异绿原酸 B、柚皮苷、异绿原酸 A、异绿                        Fig 1  HPLC superimposed fingerprint of 10 batches
        原酸 C、桂皮醛对照品各适量，置于 25 mL 量瓶中，加甲                            of Fengliaoxing fengshi dieda wine
        醇制成上述12种成分质量浓度分别为0.247 5、0.260 0、                      200
        0.382 0、0.390 0、0.306 0、0.476 0、0.454 0、0.463 0、0.389 5、  150
        0.490 0、0.450 0、0.759 0 mg/mL的混合对照品Ⅰ溶液。               mAU  100
        2.1.3  供试品溶液的制备          精密量取样品 10 mL，置于
                                                               50
        20 mL 量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，经 0.45 μm 微
        孔滤膜滤过，取续滤液，即得。                                          0
                                                                 0     20     40     60    80     100   120
        2.1.4  精密度试验       取“2.1.3”项下供试品溶液（编号：                                      t，min
        S1）适量，按“2.1.1”项下色谱条件连续进样测定6次，以                        图2 冯了性风湿跌打药酒的HPLC对照指纹图谱
        东莨菪内酯峰的保留时间和峰面积为参照，计算各共有                            Fig 2 HPLC control fingerprint of Fengliaoxing feng-
        峰的相对保留时间和相对峰面积。结果，18个共有峰相                                 shi dieda wine
        对保留时间的 RSD 为 0.29％～1.68％（n＝6），相对峰面                  2.1.8  相似度评价      采用《中药色谱指纹图谱相似度评
        积的 RSD 为 0.22％～1.27％（n＝6），表明本方法精密度                  价系统（2012版）》对10批样品进行相似度分析。结果，
        良好。                                                 10 批样品的相似度均大于 0.980，提示不同批次样品的
        2.1.5  稳定性试验       取“2.1.3”项下供试品溶液（编号：              相似度较高，生产工艺相对稳定，结果见表1。
        S1）适量，分别于室温下放置 0、2、4、8、12、24 h 时，按                  2.1.9  共有峰的指认        10 批样品共有 18 个共有峰，通
       “2.1.1”项下色谱条件进样测定，以东莨菪内酯峰的保留                         过与混合对照品溶液Ⅰ（图 3）的保留时间比对，指认了


         ·934  ·  China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 8                                  中国药房    2020年第31卷第8期
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