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for 14 days. Median lethal dose（LD50 ）and maximum tolerated dose（MTD）were measured. RESULTS：The optimal formulation
        ratio of Compound renshen jianti formulation included that P. ginseng 1.5 g，D. oppositifolia 10 g，L. barbarum fruit 10 g，A.
        oxyphylla 3 g. Results of anti-fatigue activity validation test showed that the optimal compound formulation could significantly
        prolonged weight-bearing swimming time，reduced serum content of urea nitrogen，blood lactate content and its AUC（except for
        low-dose group），while significantly increased the content of liver glycogen（P＜0.05 or P＜0.01）. Average comprehensive score
        of medium-dose group was 96.95，which was only 0.06％ different from the theoretical prediction value of 97.01. The results of
        acute toxicity test showed that there was no death in mice. The oral MTD of the optimal compound formulation was more than
        15 g/kg，which was non-toxic. CONCLUSIONS：The optimal Compound renshen jianti formulation has effective anti-fatigue
        activity of mice，and has no significant toxic effect.
        KEYWORDS     Compound renshen jianti formulation； Box-Behnken response surface method； Formulation screening；
        Anti-fatigue；Acute toxicity；Mice



            疲劳在中医学上属于“劳”“虚劳”的范畴，《内经·素                      饮片均购自吉林省仙草医药药材有限公司，经长春中医
        问·举痛论》言曰“劳则气耗”，即劳动或运动可导致机体                         药大学药学院姜大成教授鉴定，均为合格的饮片产品。
        阳气不足而引发肢软乏力、神疲倦怠等气虚证候，形成                               人参红景天胶囊（湖南金六谷药业有限公司，批号：
                [1]
        体力疲劳 。世界卫生组织（WHO）的一项全球性调查                          10619002，规格：0.45 g）；尿素氮检测试剂盒、糖原检测
        结果表明，真正健康的人只占 5％，患有疾病的人占                           试剂盒、乳酸检测试剂盒（南京建成生物工程研究所，批
                                                     [2]
        20％，而 75％的人则长期处于疲劳等“亚健康”状态 。                       号：20180628、20180719、20180718）；0.9％氯化钠注射液
        目前，市场上缓解体力疲劳的药物主要以化学药为主，                           （江西省创欣药业集团有限公司，作为生理盐水使用）；
        但长期服用易使患者产生药物依赖性，还可引起过度兴                           其余试剂均为分析纯或实验室常用规格，水为蒸馏水。
                                 [3]
        奋、激素水平失衡等不良反应 。近年来，中药在抗疲劳                          1.3  动物
        方面表现出效果明显、毒副作用低且不会引发兴奋中                                SPF 级昆明种小鼠，雌雄各半，体质量 18～22 g，购
        枢、焦虑、心血管疾病等优势，逐渐受到国内外学者的关                          自辽宁长生生物技术股份有限公司，实验动物生产合格
        注 。                                                证号：SCXK（辽）2015-0003。饲养环境为清洁级，室温
          [4]
            复方人参健体方是长春中医药大学附属医院治未                          为20～25 ℃，相对湿度为40％～60％，通风换气次数为
        病中心的经验方，该方源由金樱膏（《古今医统》卷四十                          14 次/h，光照良好，每日更换垫草料，提供标准饲料喂
        六）、大补元煎（《景岳全书》卷五十）、右归丸（《景岳全                        养。小鼠均适应性饲养 7 d 后，进行相应抗疲劳分组
        书》卷五十一）、守中丸（《圣济总录》卷十六）、加味地黄                        实验。
        丸（《寿世保元》卷五）、延龄固本方（《良朋汇集》卷二引                        2 方法
        王世功集方）、长生固本方（《寿世宝元》卷四）、固本健阳                        2.1  复方健体方提取物制备
        丹（《万病回春》卷六）、大补丸（《竹林女科证治》）等古方                           按照一定的处方配比称取人参、山药、枸杞子、益智
        经加减而得，其组方药材包括人参、山药、枸杞子、益智                          仁 4 味药材，混合后适当粉碎，加 8 倍量水（mL/g），加热
        仁。经该院临床实践证明，该方健补脾胃、益肾固精、缓                          回流提取2次，每次1 h；滤过，合并滤液，水浴蒸干浓缩，
        解疲劳、增强体力之功效显著。为进一步开发利用该方                           减压干燥，粉碎，过80目筛，即得。
        剂，本课题组在上述研究背景下，对该复方进行处方配                           2.2  不同配比复方人参健体方提取物的抗疲劳效果
        比的优化，评价其抗疲劳功效并考察其安全性，为我国                           比较
        中药传统方剂的中药现代化研发与应用奠定实验基础。                           2.2.1  给药剂量确定       假设复方人参健体方4味组方药
        1 材料                                               材人参、山药、枸杞子、益智仁的人日服处方量分别为a、
        1.1 仪器                                             b、c、d（以生药量计，单位均为 g，下同），按成人体质量
                                                                                           [5]
            ALB-224 型万分之一分析天平（德国 Sartorius 公               60 kg 以及人与小鼠的体表面积换算 得小鼠的等效处
        司）；Infinite M200PRO 型全自动酶标仪（瑞士 Tecan 公             方量为 9.2×（a+b+c+d）g/60 kg，为操作方便并取等效剂
        司）；DZTW型电子调温电热套（北京市永光明医疗仪器                         量的2倍，将小鼠的给药剂量设置为20×（a+b+c+d）g/60
        有限公司）；JM01-ZH-XSC 型恒温游泳箱（河南精迈仪                     kg。在前期预实验基础上，小鼠每日灌胃复方人参健体
        器仪表有限公司）；D1008E 型离心机（美国 Scilogex 公                 方提取物药液，灌胃体积为20 mL/kg，每日灌胃1次，连
        司）。                                                续30 d后，进行后续抗疲劳效果考察。
        1.2  药品与试剂                                         2.2.2  小鼠负重游泳时间测定            实验前1 h小鼠禁食不
            人参（批号：20170328）、山药（批号：20170725）、枸              禁水，在其末次给药 30 min 后，在尾根部负荷占体质量
        杞子（批号：20170713）、益智仁（批号：20171025）各药材                5％的铅皮，然后将其置于水深30 cm、水温（30±2）℃的


        中国药房    2020年第31卷第8期                                              China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 8  ·927  ·
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