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表 4 TB-ⅡⅡ对血管损伤斑马鱼体内 Flt-l、Kdr、Kdr-l、
VEGF-A mRNA相对表达量的影响(n=3)
SIVs
SIVs
Tab 4 Effects of TB-ⅡⅡ on relative expressions of Flt-
l,Kdr,Kdr-l and VEGF-A mRNA in vascular
injury model zebrafish(n=3)
组别 Flt-l Kdr Kdr-l VEGF-A
空白对照组 1.057±0.043 1.023±0.079 1.033±0.060 1.047±0.068
模型对照组 0.507±0.141 * 0.673±0.0467 * 0.547±0.087 ** 0.643±0.097 *
TB-Ⅱ 100 μg/mL组 0.787±0.116 0.943±0.033 # 1.203±0.059 ## 1.080±0.046 ##
A.空白对照组 B.模型对照组
TB-Ⅱ 200 μg/mL组 1.263±0.053 ## 1.590±0.058 ## 1.503±0.052 ## 1.540±0.052 ##
TB-Ⅱ 400 μg/mL组 1.080±0.046 ## 1.260±0.070 ## 1.053±0.062 ## 1.083±0.079 ##
*
**
SIVs 注:与空白对照组比较,P<0.05, P<0.01;与模型对照组比较,
SIVs # P<0.05,P<0.05
##
*
Note:vs. blank control group, P<0.05, * * P<0.01;vs. model
##
control group,P<0.05,P<0.05
#
0.05),IL-6 mRNA 的相对表达量显著升高(P<0.05 或
P<0.01);而 TB-Ⅱ 200 μg/mL 组斑马鱼体内 TNF-α、
IL-6 mRNA 的相对表达量均显著升高(P<0.01),结果
C. TB-Ⅱ 100 μg/mL组 D. TB-Ⅱ 200 μg/mL组
详见表5。
表 5 TB- ⅡⅡ 对 血 管 损 伤 斑 马 鱼 体 内 TNF-α 、IL-6
SIVs mRNA相对表达量的影响(n=3)
Tab 5 Effects of TB-ⅡⅡ on relative expressions of TNF-
α and IL-6 mRNA in vascular injury model ze-
brafish(n=3)
组别 TNF-α IL-6
空白对照组 1.003±0.003 1.057±0.025
E. TB-Ⅱ 400 μg/mL组
模型对照组 0.800±0.035 ** 0.707±0.023 **
图 2 TB-ⅡⅡ对血管损伤斑马鱼血管新生影响的荧光显 TB-Ⅱ 100 μg/mL组 1.507±0.087 1.183±0.003 ##
微图(×100) TB-Ⅱ 200 μg/mL组 1.483±0.095 ## 1.500±0.031 ##
TB-Ⅱ 400 μg/mL组 1.053±0.137 0.897±0.079 #
Fig 2 Fluorescence micrograph of the effects of TB-
#
**
注:与空白对照组比较, P<0.01;与模型对照组比较,P<0.05,
Ⅱ on vascular angiogenesis of vascular injury
Ⅱ
## P<0.01
model zebrafish(×100)
Note:vs. blank control group, P<0.01;vs. model control group,
**
表3 TB-ⅡⅡ对血管损伤斑马鱼SIVs数的影响(n=16) # P<0.05,P<0.01
##
Tab 3 Effects of TB- ⅡⅡ on SIVs number of vascular 4 讨论
injury model zebrafish(n=16) 在前期研究中,笔者根据经济合作与发展组织提案
组别 SIVs数,条 斑马鱼胚胎毒性试验(OECD,2013)进行了斑马鱼胚胎
空白对照组 8.063±0.281 的急性毒性评价 ,结果显示,在 96 hpf 时,100、200、
[10]
模型对照组 4.938±0.322 **
TB-Ⅱ 100 μg/mL组 5.938±0.347 400、600 μg/mL TB-Ⅱ作用后斑马鱼胚胎的存活率分别
TB-Ⅱ 200 μg/mL组 6.875±0.340 ## 为 100%、94.8%、98.2%、100%;在 72 hpf 时,100、200、
TB-Ⅱ 400 μg/mL组 7.250±0.487 ##
400、600 μg/mL TB-Ⅱ作用后斑马鱼胚胎全部孵化(存活
##
**
注:与空白对照组比较, P<0.01;与模型对照组比较,P<0.01
率为 100%),但是 600 μg/mL TB-Ⅱ作用后斑马鱼胚胎
**
Note:vs. blank control group, P<0.001;vs. model control group,
## 出现了畸形、心包水肿。因此,本研究选用 100、200、
P<0.01
3.4 TB-ⅡⅡ对血管损伤斑马鱼体内TNF-α、IL-6 mRNA 400 μg/mL 这 3 个质量浓度作为本研究的实验浓度。
表达的影响 PTK787 是一种酪氨酸激酶抑制剂,其能够显著抑制
[11]
与 空 白 对 照 组 比 较 ,模 型 对 照 组 斑 马 鱼 体 内 Kdr,从而引起血管损伤 。因此,本研究利用 PTK787
TNF-α、IL-6 mRNA 的相对表达量显著降低(P<0.01)。 来构建血管损伤模型,模拟缺血区域的血管内皮损伤。
与模型对照组比较,TB-Ⅱ 100、400 μg/mL 组斑马鱼体 血管新生是指从原有的血管结构中生成新的血管,
内 TNF-α mRNA 的相对表达量差异无统计学意义(P> 涉及内皮细胞增殖和迁移、基底膜降解、血管管腔形成
·814 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 7 中国药房 2020年第31卷第7期