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指纹图谱，并采用中位数法生成对照指纹图谱。结果， 露糖、峰2为葡萄糖、峰3为半乳糖。因峰2的分离度良
共得到 3 个共有色谱峰。11 批衍生化处理的猪苓多糖 好、峰面积大且稳定，故以其保留时间和峰面积为参照，
的叠加指纹图谱详见图2，对照指纹图谱详见图3。 计算得各共有峰相对保留时间的RSD为0～0.29％（n＝
PMP 11），相对峰面积的RSD为0～39.85％（n＝11）。结果表
1 200
1 100 明，不同批次的猪苓多糖虽然具有相同的单糖组成，但
1 000 1 2 3
900 S11 是含量差异较大。11 批样品中共有峰的相对保留时间
800 S10
700 S9 测定结果详见表3，相对峰面积测定结果详见表4。
mV 600 S8
U， 500 S7 表3 11批猪苓多糖中共有峰的相对保留时间测定结果
400 S6
S5
300 S4 Tab 3 Relative retention time of 11 batches of Polypo-
200 S3
100 S2 rus polysaccharide
0 S1 峰号 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 S11 RSD，％
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34
t，min 峰1（甘露糖） 0.510 0.509 0.509 0.508 0.506 0.508 0.509 0.511 0.510 0.511 0.510 0.29
图 2 11 批衍生化处理的猪苓多糖的 HPLC 叠加指纹 峰2（葡萄糖） 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 0
峰3（半乳糖） 1.130 1.131 1.132 1.132 1.132 1.126 1.131 1.130 1.131 1.130 1.131 0.15
图谱
表4 11批猪苓多糖中共有峰的相对峰面积测定结果
Fig 2 HPLC superimposed fingerprint of 11 batches
Tab 4 Relative peak area of 11 batches of Polyporus
of Polyporus polysaccharide after derivatization
polysaccharide
PMP
180
峰号 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 S11 RSD，％
160
峰1（甘露糖） 0.111 0.053 0.076 0.052 0.079 0.124 0.050 0.081 0.130 0.047 0.076 37.40
140
峰2（葡萄糖） 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 0
120 2
峰3（半乳糖） 0.327 0.277 0.256 0.216 0.226 0.260 0.148 0.304 0.495 0.131 0.164 39.85
mV 100
U， 80 2.5.7 聚类分析 将 11 批猪苓多糖样品共有峰的相对
60
峰面积导入 SPSS 23.0 软件中，以平方欧氏距离作为分
40
3
20 1 类依据，采用 Ward 法聚类。结果显示，当欧氏距离为 5
0 时，11批猪苓多糖可聚为3类，其中药材编号为S1～S6、
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34
t，min S8的样品聚为一类，相似度≥0.995；药材编号为S9的样
图3 衍生化处理的猪苓多糖的HPLC对照指纹图谱 品单独聚为一类，相似度在0.995～0.999之间；药材编号
Fig 3 HPLC control fingerprint of Polyporus polysac- 为S7、S10、S11的样品聚为一类，相似度在0.946～0.990
charide after derivatization 之间。以上结果表明，不同来源的猪苓多糖在化学组成
2.5.5 相似度评价 以对照指纹图谱为参照，采用《中 方面具有很好的相似性。11 批猪苓总多糖的聚类分析
药色谱指纹图谱相似度评价系统》（2012A版）进行相似 树状图详见图4。
度评价。结果，11批次猪苓多糖的单糖组成的相似度均 S7
S10
在 0.94 以上，表明药材样品间差异较小，质量稳定性良 S11
好。11批样品的相似度评价结果详见表2。 S4
S5
表2 11批样品的相似度评价结果 药材编号 S2
Tab 2 Similarity evaluation of 11 batches of samples S3
S1
药材编号 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 S11 S8
S1 1.000 0.997 0.999 0.998 0.995 0.999 0.988 0.996 0.993 0.990 0.981 S6
S2 0.997 1.000 0.999 0.995 0.999 0.994 0.987 0.988 0.999 0.997 0.963 S9 0 5 10 15 20 25
S3 0.999 0.999 1.000 0.998 0.997 0.997 0.992 0.992 0.999 0.995 0.971 欧氏距离
S4 0.998 0.995 0.998 1.000 0.992 0.998 0.995 0.996 0.995 0.989 0.980 图4 11批猪苓多糖的聚类分析树状图
S5 0.993 0.999 0.997 0.992 1.000 0.989 0.979 0.987 1.000 0.999 0.951 Fig 4 Cluster analysis tree diagram of 11 batches of
S6 0.999 0.994 0.997 0.998 0.989 1.000 0.998 0.989 0.992 0.986 0.986
S7 0.996 0.987 0.992 0.995 0.979 0.998 1.000 0.985 0.983 0.975 0.994 Polyporus polysaccharide
S8 0.988 0.988 0.992 0.996 0.987 0.989 0.985 1.000 0.991 0.984 0.968 2.6 单糖含量的测定
S9 0.995 0.999 0.999 0.995 1.000 0.992 0.983 0.991 1.000 0.998 0.957
S10 0.990 0.997 0.995 0.989 0.999 0.986 0.975 0.984 0.998 1.000 0.946 2.6.1 线性关系考察 精密吸取“2.2.1”项下甘露糖、葡
S11 0.981 0.963 0.971 0.980 0.951 0.986 0.994 0.968 0.957 0.946 1.000 萄糖、半乳糖单一对照品溶液各500 µL，置于同一5 mL
2.5.6 色谱峰的指认 通过将HPLC对照指纹图谱与对 量瓶中，加水定容至刻度，充分混匀。分别吸取上述混
照品溶液的HPLC图谱（见图1A）比对，指认了峰1为甘 合溶液 500、250、125、100、62.5、50、25、12.5 µL 至 4 mL

中国药房 2020年第31卷第7期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 7 ·791 ·