Page 27 - 202007

monosassharide components were detected. The peak was identified by comparing with the reference substance，and cluster analysis
was performed by using SPSS 23.0 software. RESULTS：In HPLC fingerprints of the 11 batches of samples，3 common peaks
were identified，namely mannose，glucose and galactose. The similarity of all samples was above 0.94. Cluster analysis classified
11 batches of samples into three categories. S1-S6，and S8 were grouped into category 1；S7，S10 and S11 were grouped into
category 2；S9 was individually grouped into one category. Results of content determination showed that the contents of mannose
ranged from 1.571 to 8.771 mg/g；those of glucose ranged from 26.072 to 132.194 mg/g，and those of galactose ranged from 3.420
to 36.593 mg/g. CONCLUSIONS：Established pre-column derivatization HPLC fingerprints can provide reference for quality
evaluation of P. umbellatus. The monosaccharide composition of different batches of Polyporus polysaccharide is the same；there is
no significant correlation between fingerprint characteristic peak and the origin of herbs；there is significant difference in the
content of monosaccharide of P. umbellatus.
KEYWORDS Polyporus polysaccharide；Monosaccharide；PMP；Pre-column derivatization；HPLC；Fingerprint

猪苓又名猪灵芝、野猪苓、猪屎苓、鸡屎苓，始载于 1.2 药品与试剂
《神农百草经》，是多孔菌科真菌猪苓[Polyporus umbella- 葡萄糖对照品（批号：S10S9I69833，纯度：≥98％）、
[1]
tus（Pers.）Fries]的干燥菌核 。其道地药材产自陕西，此 甘露糖对照品（批号：C25D8H51117，纯度：≥98％）、半
外在河北、河南、云南、四川等地也有分布 。2015 年版 乳糖对照品（批号：Z22J9H64187，纯度：≥98％）均购自
[2]
《中国药典》（一部）猪苓质量标准项只收录了麦角甾醇 上海源叶生物科技有限公司；PMP（美国 Aladdin 公司，
[1]
含量测定 。而文献研究表明，猪苓多糖才是猪苓的主 批号：C1822095）；三氟乙酸（TFA，德国 Sigma 公司，批
要活性部位，具有调节免疫、抗肿瘤、抗炎、抑菌、抗突 号：STBF6942V）；乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯，
[3]
变、保肝、保肾等与猪苓临床应用相关的药理作用 ，且 水为自制超纯水。
[4]
猪苓水提物中多糖含量远高于麦角甾醇 ，因此应将多 11批猪苓原药材分别购自不同厂家，经广州中医药
糖作为中药猪苓药材质量控制和品质评价的指标。但 大学第二临床医学院黎雄副研究员鉴定均为多孔菌科
目前从猪苓中制备获得的多糖结构不一，单糖组成各不 真菌猪苓[P. umbellatus（Pers.）Fries]的干燥菌核，样品保
相同 [5-6] ，猪苓传统用药形式水煎液中多糖结构特征不 存于广州中医药大学第二临床医学院Ⅰ期临床研究分
明。多糖一般是由多种比例相对固定的单糖构成，通过 析室。11批猪苓药材来源信息见表1。
检测中药多糖的单糖组成和摩尔比，可以反映其主要特 表1 猪苓药材来源信息
征，增加鉴别的专属性，在一定程度上对多糖进行质量 Tab 1 Sample information of P. umbellatus
控制 [7-8] 。指纹图谱作为中药质量控制的有效技术 [9-10] ， 编号 批号 产地 厂家
目前主要是针对中药小分子成分，较少用于多糖等生物 S1 170501 贵州 广州市番禺区大岗百和堂药店
S2 170702551 陕西 广东省中医院大学城医院
大分子，这是由大多数糖类成分无紫外吸收、分子量大、 S3 20180901 河南 壹号大药房东山分店
[11]
结构复杂多样特点决定的 。但通过分析各中药中多 S4 20180801 陕西 广州集合堂大药房体育西分店
S5 18010809 陕西 广州二天堂大药房棠石分店
糖的主要单糖组成与含量，建立单糖组成指纹图谱，可
S6 180819 陕西 广州祺和医药锦绣分店
以鉴别不同来源的多糖；通过测定其主要组成单糖的绝 S7 180601 河北 广州泉源堂正佳广场店
对含量，可整体评价不同批次药材质量的优劣。因此， S8 170794 陕西 金康药店广百百货店
S9 160901 陕西 广州大参林红星分店
本研究采用 1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）柱前衍生 S10 160601 陕西 臻品药店广州大学城分店
化-高效液相色谱（HPLC）法分析猪苓水煎液多糖的单 S11 150501 甘肃 海王星辰广州黄村西店
糖组成和含量，并运用指纹图谱技术比较不同产地猪苓 2 方法与结果
多糖中单糖组成与含量差异，为中药猪苓多糖质量标准 2.1 猪苓多糖的提取和纯化
的建立提供参考。 称取各批次猪苓药材 50 g，粉碎后过 60 目筛，以料
1 材料 液比为 1 ∶ 10（g/mL）的比例加水回流提取 2 次，每次 1.5
1.1 仪器 h，合并滤液，减压浓缩至 200 mL；加入无水乙醇至乙醇
1200 型 HPLC 仪（美国 Agilent 公司）；Milli-Q 型超 体积分数为80％，静置过夜；以1 000 r/min离心10 min，
纯水仪系统（美国 Millipore 公司）；Alpha2-4LSC-Plus 型 沉淀加适量水溶解后，按4∶1（V/V）的比例加入Sevage试
冷冻干燥机（德国 Martin Christ 公司）；RV 10 basic V 型 剂[氯仿-正丁醇（4 ∶ 1），V/V]，搅拌混匀，去除下层溶剂和
旋转蒸发仪（德国IKA公司）；AB135-S型十万分之一天 中间层蛋白，反复多次，直至蛋白除尽，冷冻干燥后即得
[10]
平、ET58型pH计（德国Mettler-Toledo公司）。 猪苓多糖。采用苯酚-硫酸法 ，以无水葡萄糖为标准品

中国药房 2020年第31卷第7期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 7 ·789 ·