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组显著高于紫杉醇、PD98059 单用组（P＜0.05），详见图 佳，可能与胃癌细胞对紫杉醇的敏感性较差和频发的耐
2、表2。 药有关 [8，11-12] 。
丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）参与了细胞内多条
Cleave-caspase3 信号通路的调节，在多种肿瘤的发生、发展过程中发挥
着重要的作用。ERK是MAPK家族中的重要成员，含有
Tyr、Thr两个磷酸化位点，当上游分子MEK将其磷酸化
GAPDH
后，ERK 被激活，活化的 ERK 可进一步调节细胞的增
对照组 紫杉醇组 PD98059组 紫杉醇+PD98059 殖、分化、凋亡和衰老等多种生物学过程 [13-14] 。PD98059
联用组
图 2 PD98059 联合紫杉醇对 KATO ⅢⅢ细胞凋亡蛋白 是一种非底物依赖性的MEK/ERK通路竞争抑制剂。相
表达影响的电泳图 关研究表明，该药可通过阻止MEK对ERK的磷酸化，从
[16]
[15]
Fig 2 Electrophoretograms of the effects of PD98059 而发挥对卵巢癌 、肝癌 等多种肿瘤的治疗作用，且具
combined with paclitaxel on the expression of 有一定的剂量依赖性，但该药在胃印戒细胞癌治疗中的
[9]
apoptosis related protein of KATO ⅢⅢ cells 应 用 尚 鲜 有 报 道 。 Li Y 等 研 究 发 现 ，紫 杉 醇 与
PD98059联用能明显增强紫杉醇对结肠癌细胞的抑制、
3.4 PD98059联合紫杉醇对KATO ⅢⅢ细胞迁移能力的
杀伤能力。同时本课题组前期预试验结果显示，不同
影响
剂量（1、5、20、40、80、160 μmol/L）的PD98059对胃印戒
与对照组比较，各给药组的迁移细胞数均显著减
细胞癌细胞的增殖均有抑制作用，且药物剂量越大，抑
少，且联用组显著少于紫杉醇、PD98059 单用组（P＜
制作用亦越强；当 PD98059 与紫杉醇联用时，这种抑制
0.05），详见图3、表2。
作用更强。基于此，本研究考察了PD98059联合紫杉醇
对人胃印戒细胞癌 KATO Ⅲ细胞增殖、凋亡、迁移的
影响。
CCK-8试验结果显示，各给药组细胞的增殖抑制率
均较对照组显著升高，且两药联用组的抑制率显著高于
紫 杉 醇 、PD98059 同 剂 量 单 用 组 ；同 时 ，20 μ mol/L
A.对照组 B.紫杉醇组 PD98059 的抑制作用与 1 μg/mL 紫杉醇相当，且抑制率
有随PD98059剂量增加而升高的趋势。由此可见，两药
联用对细胞增殖的抑制作用明显优于紫杉醇、PD98059
单独使用，这可能与PD98059对细胞增殖的抑制主要是
[17]
作用于G1期，将细胞周期阻滞在G0/G1期 ，而紫杉醇则
主要是将细胞周期阻滞在G2/M期 [10-11] 有关。
C.PD98059组 D.紫杉醇+PD98059联用组 有研究指出，减少细胞凋亡信号通路中ERK的磷酸
图3 PD98059联合紫杉醇对KATO ⅢⅢ细胞迁移能力影 化能有效抑制胱天蛋白酶 9（Caspase-9）的表达，从而发
响的显微图（×200） 挥减少细胞凋亡的作用，因此抑制 MEK/ERK 通路常作
Fig 3 Micrographs of the effects of PD98059 com- 为诱导肿瘤凋亡的靶点 。Caspase-9 作为凋亡通路的
[18]
bined with paclitaxel on the migration ability 启动者，在收到上游信号后，可通过自剪接而激活，随后
of KATO ⅢⅢ cells（×200） 引发 Caspase 的级联反应。Caspase-3 作为 Caspase-9 的
4 讨论 响应分子之一，在被Caspase-9激活后，其可通过剪切产
紫杉醇是最常见的作为配伍使用的化疗药物，其可 生活性 Cleaved-caspase-3，后者可直接降解细胞内的结
通过结合微管蛋白来诱导有功能障碍的有丝分裂纺锤 构蛋白和功能蛋白，从而诱导细胞凋亡 [18-19] 。本研究通
体的形成，从而使细胞周期阻滞在G2/M期，最终导致肿 过流式细胞术和 Western blotting 法分别检测了 KATO
瘤细胞凋亡 [10-11] 。本研究结果显示，紫杉醇组细胞的增 Ⅲ细胞的凋亡情况和凋亡蛋白Cleaved-caspase-3的表达
殖抑制率、早期及晚期凋亡率均较对照组显著升高，迁 水平。结果显示，与对照组比较，紫杉醇组和紫杉醇+
移细胞数均较对照组显著减少，提示紫杉醇对人胃印戒 PD98059联用组细胞的早期、晚期凋亡率和Cleaved-cas-
细胞癌 KATO Ⅲ细胞的增殖和迁移均有明显的抑制效 pase-3 的相对表达量均显著升高，且联用组显著高于紫
果，同时亦可促进肿瘤细胞的凋亡。但相关研究指出， 杉醇、PD98059 单用组；而虽 PD98059 有增加细胞凋亡
紫杉醇虽然可在临床上有效抑制肿瘤细胞的增殖并促 和凋亡蛋白表达的趋势，但组间比较差异均无统计学意
进其凋亡，但在胃印戒细胞癌等胃癌的治疗上疗效欠 义。这提示PD98059单独使用时，对胃印戒细胞癌细胞

·706 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 6 中国药房 2020年第31卷第6期