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不同产地茯苓中总蛋白的含量差异比较 Δ

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罗心遥 ，刘 俊，李慧君，王天合，杨玉莹，夏和元，叶晓川（湖北中医药大学药学院/中药资源与中药化学省级
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重点实验室，武汉 430065）

中图分类号 R286.0 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2020）06-0692-04
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2020.06.11

摘 要 目的：比较不同产地茯苓中总蛋白的含量差异。方法：以牛血清白蛋白为对照，0.4 mol/L氢氧化钠溶液为提取溶剂，考马
斯亮蓝G-250为显色剂，采用紫外分光光度法于595 nm波长处测定茯苓中总蛋白含量，并通过聚类分析对34批（S1～S34）不同产
地的茯苓进行分类。结果：牛血清白蛋白检测质量浓度的线性范围为1.45～17.40 μg/mL（r＝0.999 6）；精密度、稳定性（20 min）、
重复性试验的 RSD 均小于 3％；加样回收率为 100.14％～104.26％（RSD＝1.43％，n＝9）；34 批不同产地茯苓中总蛋白的含量为
0.388 4％～1.129 7％。聚类分析结果显示，34 批茯苓中，湖北省英山县产茯苓（S2、S3）的总蛋白含量＞1％，归为一类；湖北、云
南、安徽和湖南产茯苓（S1、S5～S10、S12、S13、S16、S17、S19～S21、S23～S25、S28、S30、S31）的总蛋白含量为0.653 5％～0.946 1％归
为一类；剩余批次含量为0.388 4％～0.601 2％，归为一类。结论：所建方法可用于获苓中总蛋白的含量测定。34批不同产地茯苓
总蛋白含量以湖北省英山县产茯苓最高，云南、安徽等地次之。
关键词 茯苓；蛋白；含量测定；差异；聚类分析

Comparison of Total Protein Content Difference of Poria cocos from Different Producing Areas
LUO Xinyao，LIU Jun，LI Huijun，WANG Tianhe，YANG Yuying，XIA Heyuan，YE Xiaochuan（College of
Pharmacy，Hubei University of TCM/Provincial Key Lab of TCM Resource and TCM Chemistry，Wuhan
430065，China）

ABSTRACT OBJECTIVE：Compare the difference of total protein content of Poria cocos from different producing areas.
METHODs：Using bovine serum albumin （BSA） as control，0.4 mol/L sodium hydroxide solution as exctraction solution，
Coomassie brilliant blue G-250 as chromogenic reagent，visible spectrophotometry at 595 nm was used to determine the contents of
total protein of P. cocos；cluster analysis was used to classify 34 batches（S1-S34）of P. cocos from different producing areas.
RESULTS： The linear range of BSA was 1.45-17.40 μ g/mL （r＝0.999 6）. RSDs of precision， stability （20 min） and
reproducibility tests were all lower than 3％；recoveries were 100.14％-104.26％（RSD＝1.43％，n＝9）. The contents of total
protein in 34 batches of P. cocos from different producing areas were 0.388 4％-1.129 7％. The results of cluster analysis showed
that among 34 batches of P. cocos，the total protein content of P. cocos produced in Yingshan county of Hubei province（S2，S3）
was higher than 1％，clustered into one category；the total protein contents of P. cocos produced in Hubei，Yunnan，Anhui and
Hunan（S1，S5-S10，S12，S13，S16，S17，S19-S21，S23-S25，S28，S30，S31）were 0.653 5％-0.946 1％，clustered into one
categony，and the remaining batch content were 0.388 4％-0.601 2％，clustered into one category. CONCLUSIONS：Established
method is suitable for the content determination of total protein content of P. cocos. The protein content of P. cocos from Yingshan
county of Hubei province is the highest，followed by Yunnan and Anhui in 34 batches of P. cocos from different producing areas.
KEYWORDS Poria cocos；Protein；Content determination；Difference；Cluster analysis

茯 苓 为 多 孔 菌 科 真 菌 茯 苓 [Poria cocos（Schw.） 抗氧化、抗肿瘤等生理活性 [10-13] 。而现有关于茯苓活性
[1]
Wolf]的干燥菌核，始载于《神农本草经》 ，是我国公布 成分的研究主要集中在多糖及三萜类成分 [4-5] ，对其蛋白
[2]
的第一批食药同源品种之一 。茯苓性平，味甘、淡，归 成分的研究甚少，其原因可能与茯苓蛋白的提取较为困
[14]
心、肺、脾、肾经，具有利水渗湿、健脾和胃、宁心安神的 难有关 。本课题组前期研究发现，以水为溶剂几乎不
功效 。现代药理研究表明，茯苓含有多糖类、三萜类、 能提取茯苓总蛋白，这增加了含量测定难度。为此，本
[3]
蛋白类以及甾体类等化学成分，具有抗肿瘤、调节免疫、 研究采用紫外分光光度法，以0.4 mol/L氢氧化钠溶液为
抑菌、抗炎、抗氧化、抗纤维化等作用 [4-9] 。目前，有关植 提取溶剂测定茯苓中总蛋白的含量，并对全国8个省份
物蛋白及真菌蛋白的药用价值已引起学者的广泛关注， 34批不同产地茯苓中总蛋白的含量进行检测，同时结合
聚类分析进行分类，旨在为茯苓资源质量评价及后续进
多种植物蛋白及真菌蛋白被报道具有降血糖、降血脂、
一步研究奠定基础。
Δ 基金项目：国家重点研发计划项目（No.2017YFC1703004） 1 材料
＊硕士研究生。研究方向：中药及其制剂的物质基础。E-mail：
1.1 仪器
xzdiyi@qq.com
1800 型紫外-可见分光光度计（日本 Shimadzu 公
# 通信作者：研究员，博士生导师，博士。研究方向：中药及其制
剂的物质基础。E-mail：Chuan9069@hbtcm.edu.cn 司）；BT25S型十万分之一分析天平[赛多利斯科学仪器

·692 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 6 中国药房 2020年第31卷第6期