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4
1 500 250 5
1 400
1 300 200
1 200 150
1 100 AU 1 2 3
1 000 100
900 50
mV 800
U， 700 R（19） 0
600 S12（19）
S11（19）
500 S10（19） 0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5
S9（19）
400 S8（19） t，min
300 S7（19） A.混合对照品溶液
S6（19）
200 S5（19）
S4（19）
100 S3（19）
S2（19）
0 S1（19） 700
600
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 500
t，min 400
图1 12批黑豆药材样品的HPLC 叠加指纹图谱 AU 300
200
Fig 1 HPLC superimposed fingerprints of 12 batches 100 1 3 4
of Sojae Semen Nigrum 0 2 5
0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5
t，min
800 B.供试品溶液
700
600
2.5
mV 500 0
U， 400 －2.5
300 AU －5.0
－7.5
200
－10.0
100 －12.5
0 －15.0
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5
t，min t，min
图2 黑豆药材样品的HPLC对照指纹图谱 C.阴性对照溶液
Fig 2 HPLC control fingerprint of Sojae Semen Ni- 注：1.大豆苷；2.黄豆黄苷；3.染料木苷；4.大豆苷元；5.染料木素
grum Note：1. daidzin；2. glycitin；3. genistin；4. daidzein；5. genistein
表3 相似度评价结果 图3 高效液相色谱图
Tab 3 Results of similarity evaluation Fig 3 HPLC chromatograms
编号 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 S11 S12 对照 表4 12批黑豆药材样品HPLC图谱共有峰的相对保留
S1 1 0.999 0.999 0.963 0.960 0.961 0.966 0.968 0.968 0.952 0.956 0.953 0.996 时间
S2 0.999 1 0.999 0.964 0.961 0.961 0.966 0.968 0.968 0.952 0.956 0.953 0.995
S3 0.999 0.999 1 0.965 0.962 0.963 0.968 0.970 0.970 0.955 0.959 0.955 0.996 Tab 4 Relative retention time of common peaks in
S4 0.963 0.964 0.965 1 0.999 0.999 1 0.998 0.998 0.944 0.946 0.944 0.998 HPLC chromatograms for 12 batches of Sojae
S5 0.960 0.961 0.962 0.999 1 0.999 0.999 0.996 0.997 0.944 0.946 0.944 0.998 Semen Nigrum
S6 0.961 0.961 0.963 0.999 0.999 1 0.999 0.997 0.998 0.947 0.949 0.947 0.998
S7 0.966 0.966 0.968 0.999 0.999 0.999 1 0.999 0.999 0.945 0.947 0.945 0.946 峰号 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 S11 S12 RSD，％
S8 0.968 0.968 0.970 0.998 0.996 0.997 0.999 1 0.999 0.944 0.946 0.944 0.948 1 0.228 0.228 0.228 0.227 0.227 0.227 0.227 0.227 0.227 0.227 0.228 0.227 0.11
S9 0.968 0.968 0.970 0.998 0.997 0.998 0.999 0.999 1 0.943 0.945 0.943 0.946 2 0.260 0.260 0.260 0.259 0.260 0.259 0.259 0.259 0.260 0.260 0.260 0.260 0.12
S10 0.952 0.952 0.955 0.944 0.944 0.947 0.945 0.944 0.943 1 0.999 0.999 0.974 3 0.267 0.267 0.267 0.265 0.266 0.265 0.265 0.266 0.266 0.266 0.266 0.266 0.26
S11 0.956 0.956 0.959 0.946 0.946 0.949 0.947 0.946 0.945 0.999 1 0.999 0.974 4 0.327 0.328 0.327 0.327 0.327 0.327 0.326 0.327 0.327 0.327 0.328 0.327 0.12
S12 0.953 0.953 0.955 0.944 0.944 0.947 0.945 0.944 0.943 0.999 0.999 1 0.975 5 0.349 0.349 0.349 0.348 0.349 0.348 0.348 0.348 0.349 0.348 0.349 0.349 0.10
6 0.561 0.561 0.561 0.561 0.561 0.561 0.560 0.560 0.562 0.561 0.561 0.561 0.08
2.1.9 共有峰的指认 12批黑豆药材样品共有19个共
7 0.624 0.624 0.623 0.624 0.624 0.624 0.623 0.624 0.624 0.624 0.624 0.624 0.07
有峰，通过与混合对照品溶液的 HPLC 图（见图 3A）比 8 0.683 0.684 0.682 0.685 0.685 0.684 0.682 0.683 0.683 0.682 0.682 0.683 0.16
对，指认11号峰为大豆苷。因该峰分离度良好、峰面积 9 0.729 0.729 0.728 0.729 0.728 0.728 0.727 0.728 0.729 0.728 0.728 0.729 0.09
大且稳定，故以其保留时间和峰面积为参照，计算其他 10 0.963 0.963 0.963 0.961 0.961 0.961 0.961 0.961 0.961 0.962 0.962 0.962 0.07
11（对照） 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 0
峰的相对保留时间和相对峰面积，结果见表4、表5。
12 1.029 1.030 1.030 1.030 1.030 1.030 1.030 1.030 1.030 1.030 1.030 1.030 0.02
2.2 聚类分析 13 1.287 1.288 1.286 1.287 1.287 1.287 1.288 1.287 1.288 1.288 1.287 1.287 0.05
以各共有峰的峰面积为变量，得到19×12阶数据矩 14 1.358 1.358 1.357 1.355 1.356 1.356 1.358 1.357 1.332 1.359 1.358 1.357 0.53
阵，采用SPSS 20.0软件以离差平方和法（即Ward法）对 15 1.497 1.497 1.496 1.495 1.496 1.495 1.495 1.495 1.496 1.497 1.497 1.496 0.06
16 1.541 1.540 1.540 1.539 1.539 1.538 1.537 1.538 1.539 1.540 1.540 1.540 0.06
12 批黑豆药材样品进行聚类分析，详见图 4。由图 4 可
17 1.573 1.573 1.573 1.572 1.572 1.571 1.570 1.571 1.572 1.573 1.573 1.572 0.07
知，12 批黑豆药材样品可聚为两大类：S4～S12 聚为一 18 1.605 1.606 1.605 1.605 1.605 1.604 1.603 1.604 1.604 1.605 1.605 1.605 0.05
类，S1～S3聚为一类。 19 1.760 1.761 1.761 1.761 1.761 1.761 1.758 1.759 1.760 1.760 1.761 1.760 0.06

中国药房 2020年第31卷第4期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 4 ·431 ·