Page 37 - 2020年2月第31卷第3期

UPLC-MS/MS 法测定不同温度定向炮制黄芪中 8 种苷类和 4 种

苷元成分的含量 Δ

刘蓬蓬 1，2，3＊ ，张 凡 1，2，3 ，史 辑 1，2，3 ，单国顺 1，2，3 ，贾天柱 1，2，3 # （1.辽宁中医药大学药学院，辽宁 大连 116600；2.国
家中医药管理局中药炮制原理解析重点实验室，辽宁 大连 116600；3.辽宁省中药炮制工程技术研究中心，辽

宁 大连 116600）

中图分类号 R283 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2020）03-0287-07
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2020.03.07

摘 要 目的：建立测定黄芪中8种苷类（黄芪皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、黄芪异黄烷苷、黄芪紫檀烷苷）及4种
苷元（毛蕊异黄酮、芒柄花素、黄芪异黄烷、黄芪紫檀素）成分含量的方法，并考察不同炮制温度对上述12种成分含量的影响。方
法：分别以生黄芪和不同温度（120、140、160、180、200 ℃）烘制后的黄芪为样品，采用超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）
法测定其中12种成分的含量。色谱柱为ACQUITY UPLC HSS T3，流动相为0.1％甲酸水溶液-0.1％甲酸乙腈溶液（梯度洗脱），流
速为0.5 mL/min，柱温为30 ℃，检测波长为260 nm，进样量为2 μL。采用电喷雾离子源，在正离子模式下进行监测扫描，扫描范围
为质菏比50～1 500，毛细管电压为2 000 V，离子源温度为100 ℃，脱溶剂温度为400 ℃，雾化气（N2 ）流速为40 L/h，脱溶剂气（N2 ）
流速为800 L/h，碰撞能量为20～30 V，数据采集速率为0.5 s/scan。结果：黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅱ、黄芪皂苷Ⅲ、黄芪皂苷Ⅳ、毛蕊
异黄酮苷、毛蕊异黄酮、芒柄花苷、芒柄花素、黄芪异黄烷苷、黄芪异黄烷、黄芪紫檀烷苷、黄芪紫檀素的检测质量线性范围分别为
0.001 16～0.232 0、0.000 276～0.055 2、0.000 22～0.044 0、0.000 225～0.045 0、0.000 734～0.587 0、0.001 17～0.234 0、0.000 742～
2
0.148 0、0.001 30～0.260、0.003 98～0.795 0、0.000 476～0.476 0、0.001 89～0.378 0、0.000 336～0.336 0 μg（R 均不低于0.999 2）；检
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测限分别为 6.2×10 、4.8×10 、3.8×10 、3.4×10 、5.8×10 、4.8×10 、4.2×10 、3.2×10 、5.8×10 、2.6×10 、4.2×10 、6.4×10 －6
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μg；定量限分别为 12.6×10 、16.2×10 、14.4×10 、14.8×10 、18.8×10 、16.4×10 、15.4×10 、10.8×10 、20.2×10 、12.4×10 、
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14.6×10 、23.4×10 －6 μg；精密度、稳定性（24 h）、重复性试验的RSD均小于3.0％（n＝6）；平均加样回收率分别为99.1％、100.2％、
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98.7％、101.9％、98.6％、102.1％、99.2％、100.3％、98.7％、99.2％、99.3％、100.8％，RSD 分别为 1.9％、2.2％、2.4％、1.8％、2.1％、
1.7％、2.3％、1.9％、2.4％、1.8％、2.2％、1.9％（n＝6）。含量测定结果显示，黄芪皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的含量随着烘制温度的升高而逐渐
降低，黄芪皂苷Ⅳ的含量随着温度的升高而逐渐升高；黄酮苷类成分毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、黄芪异黄烷苷、黄芪紫檀烷苷的含
量均随着烘制温度的升高而降低，而对应的苷元成分毛蕊异黄酮、芒柄花素、黄芪紫檀素的含量均随着烘制温度的升高而先升高
后降低；黄芪异黄烷的含量随着烘制温度的升高而降低。结论：所建立的UPLC-MS/MS法可用于黄芪中12种成分含量的测定；黄
芪经不同温度炮制后，苷类成分含量总体呈降低趋势，苷元成分含量总体呈升高趋势。
关键词 黄芪；超高效液相色谱-串联质谱法；苷类；苷元；含量测定；定向炮制
Determination of 8 Glycosides and 4 Aglycones in Directionally Processed Astragalus membranaceus under
Different Temperatures by UPLC-MS/MS
LIU Pengpeng 1，2，3 ，ZHANG Fan 1，2，3 ，SHI Ji 1，2，3 ，SHAN Guoshun 1，2，3 ，JIA Tianzhu 1，2，3 （1.College of Pharmacy，
Liaoning University of TCM，Liaoning Dalian 116600，China；2.Key Laboratory of Processing Theory Analysis，
State Administration of TCM， Liaoning Dalian 116600， China；3.Chinese Materia Medica Processing
Engineering Center of Liaoning Province，Liaoning Dalian 116600，China）
ABSTRACT OBJECTIVE：To establish a method for the determination of 8 glycosides （astragaloside Ⅰ ，Ⅱ ，Ⅲ ，Ⅳ and
calycosin glucopyranoside，2′-hydroxy-3′，4′-dimethoxy-isoflavan-glucoside and 9，10-dimethoxy-pterocarpan-glucoside） and 4
aglycones（calycosin，formononetin，7，2′-dihydroxy-3′，4′-dimethoxy-isoflavan and 3-hydroxy-9，10-dimethoxy-pterocarpan） in
Astragalus membranaceus，and to investigate the effects of different processing temperatures on the contents of above 12
components. METHODS：The contents of 12 components in
Δ 基金项目：国家自然科学基金资助项目（No.81803726）；国家中
A. membranaceus and samples processed under different
医药管理局“中药炮制技术传承基地建设”项目（No.国中医药科技中
temperatures（120，140，160，180，200 ℃）were determined
药便函〔2015〕132号）
by UPLC-MS/MS. The determination was performed on
＊讲师，博士。研究方向：中药炮制原理。电话：0411-85890154。
ACQUITY UPLC HSS T3 column with mobile phase consisted
E-mail：liupengpeng0411@163.com
# 通信作者：教授，博士生导师。研究方向：中药炮制。电话： of 0.1 mol/L formic acid water solution-0.1 mol/L formic acid
0411-85890135。E-mail：tianzhujia0411@163.com acetonitrile solution（gradient elution）at the flow rate of 0.5
中国药房 2020年第31卷第3期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 3 ·287 ·