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·药学研究·

大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷的体内外遗传毒性评价 Δ

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文海若 ，颜玉静 ，宋 捷 ，鄂 蕊 ，马双成 ，汪 祺 （1.中国食品药品检定研究院国家药物安全评价监测中
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心/药物非临床安全评价研究北京市重点实验室，北京 100176；2.中国食品药品检定研究院中药民族药检定
所，北京 100050）
中图分类号 R994 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2020）01-0018-06
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2020.01.04

摘 要 目的：评价大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷（EG）的体内外遗传毒性，并比较体外细胞试验及大鼠体内实验评价结果的差异。
方法：采用体外二维（2D）、三维（3D）细胞培养法分别构建2D、3D HepaRG细胞模型，造模成功后，分别将2D、3D HepaRG细胞分
为空白对照组[0.5％二甲基亚砜（DMSO）]、丝裂霉素C组（阳性对照，0.1 µg/mL）和EG低、中、高剂量组（10、50、200 µg/mL），然后
检测各组HepaRG细胞的微核形成率和尾DNA百分含量。将SD大鼠分为空白对照组（0.5％羧甲基纤维素钠）、甲磺酸乙酯组（阳
性对照，200 mg/kg）和EG低、中、高剂量组（100、300、1 000 mg/kg），每组6只，连续灌胃给药15 d，每天1次；15 d后检测各组大鼠
骨髓嗜多染红细胞、肝细胞的微核形成率及外周血淋巴细胞、肝细胞的尾DNA百分含量、尾距。结果：在体外2D HepaRG细胞模
型中，与空白对照组比较，丝裂霉素 C 组 HepaRG 细胞的微核形成率和尾 DNA 百分含量均显著升高（P＜0.01），EG 各剂量组
HepaRG细胞的微核形成率和尾DNA百分含量差异无统计学意义（P＞0.05）；在3D HepaRG细胞模型中，与空白对照组比较，丝
裂霉素 C 组 HepaRG 细胞的微核形成率和尾 DNA 百分含量均显著升高（P＜0.01 或 P＜0.001），EG 高剂量组 HepaRG 细胞的尾
DNA百分含量显著升高（P＜0.01）。在大鼠体内实验中，与空白对照组比较，甲磺酸乙酯组大鼠骨髓嗜多染红细胞、肝细胞的微
核形成率和外周血淋巴细胞、肝细胞的尾DNA百分含量、尾距均显著升高（P＜0.01），EG高剂量组大鼠外周血淋巴细胞尾DNA
百分含量显著升高（P＜0.01），EG各剂量组大鼠骨髓嗜多染红细胞、肝细胞的微核形成率和肝细胞尾DNA百分含量、尾距差异无
统计学意义（P＞0.05），但随剂量增加有升高趋势。结论：本研究结果提示在2D细胞模型中，EG未导致染色体断裂及DNA损伤，
但3D细胞模型长期给药和体内重复给药结果均显示EG存在一定DNA损伤风险，故3D HepaRG细胞模型的评价结果更接近大
鼠体内实验结果。
关键词 大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷；遗传毒性；HepaRG细胞；二维培养；三维培养；大鼠；微核试验
Study on in vitro and in vivo Genotoxicity of Emodin-8-O-β-D-glucoside
WEN Hairuo ，YAN Yujing ，SONG Jie ，AO Rui ，MA Shuangcheng ，WANG Qi（1.National Center for Safety
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Evaluation and Monitoring of Drugs，National Institutes for Food and Drug Control/Key Laboratory of Beijing
for Nonclinical Safety Evaluation Research of Drugs，Beijing 100176，China；2.Institute for TCM and Ethnic
Medicine Control，National Institutes for Food and Drug Control，Beijing 100050，China）
ABSTRACT OBJECTIVE：To evaluate the in vitro and in vivo genotoxicity of emodin-8-O-β-D-glucoside（EG），and to compare
the difference of in vitro cell test and in vivo test of rats. METHODS：2D and 3D hepatocyte models were established by in vitro
two-dimensional（2D）and three-dimensional（3D）cell culture. After modeling，2D and 3D hepatocyte were divided into blank
control group（0.5％ DMSO），mitomycin C group（positive control，0.1 µg/mL），EG low-dose，medium-dose and high-dose
groups（10，50，200 µg/mL），respectively. The micronucleus ratio and tail DNA％ of HepaRG cells were detected. SD rats were
divided into blank control group（0.5％ sodium carboxymethyl cellulose），ethyl methanesulfonate group（positive control，200
mg/kg），EG low-dose，medium-dose and high-dose groups（100，300，1 000 mg/kg），with 6 rats in each group. They were given
medicine intragastrically for consecutive 15 d，once a day. 15 days later，the micronucleus formation rate of bone marrow
polychromatic erythrocytes and hepatocytes，the tail DNA％ and tail distance of peripheral blood lymphocytes and hepatocytes were
measured. RESULTS：In the in vitro 2D HepaRG hepatocyte model，compared with blank control group，the micronucleus
formation rate and tail DNA％ of HepaRG cell were increased significantly in mitomycin C group （P＜0.01）. There was no
statistical significance in micronucleus formation rate and tail
Δ 基 金 项 目 ：国 家 自 然 科 学 基 金 资 助 项 目（No.81503347，
DNA％ of HepaRG cell among EG groups（P＞0.05）. In 3D
81503068）；国家重大新药创制专项（No.2018ZX09201-017）
HepaRG cell model， compared with blank control group，
＊ 副 研 究 员 。 研 究 方 向 ：遗 传 毒 理 。 电 话 ：010-67876252。
E-mail：wenhairuo@nifdc.org.cn micronucleus formation rate and tail DNA％ of HepaRG cell
# 通信作者：副研究员。研究方向：中药毒理。电话：010- were increased significantly in mitomycin C group （P＜0.01
67395282。E-mail：sansan8251@sina.com or P＜0.001）， while tail DNA％ of HepaRG cell was

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