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6 000×g 离心 10 min，取上清液进样分析，记录峰面积 测物提取回收率为 86.21％～98.14％，RSD 为 4.14％～
A1。另取已知含量的健康受试者尿液上清液200 μL，按 14.29％，均符合相关规定，提取回收率试验结果见表6。
上述方法操作记录峰面积 A2。再取已知含量的健康受 表6 提取回收率试验结果（n＝6）
试者尿液200 μL，加入200 μL乙腈，涡旋60 s，于4 ℃下 Tab 6 Results of extraction recovery tests（n＝6）
6 000×g 离心 10 min，取上清液，于 40 ℃下氮气吹干，再 提取回收率，％
待测物 加入量，ng/mL
用100 μL 10％甲醇水复溶，6 000×g离心10 min，取上清 均值 RSD
5-羟基吲哚乙酸 20 86.30 14.29
液进样分析，记录峰面积A3。以（A2－A3 ）/A1×100％计算 1 000 89.34 10.64
基质效应。结果显示，9 种待测物基质效应的 CV 均＜ 2 500 95.28 5.86
谷氨酰胺 20 88.80 11.95
15％，均符合相关规定，基质效应考察结果见表5。
1 000 92.26 6.72
表5 基质效应考察结果（n＝6） 2 500 90.32 6.24
Tab 5 Results of matrix effect（n＝6） 马尿酸盐 2 000 87.97 12.56
10 000 86.89 11.03
基质效应，％
待测物 加入量，ng/mL 50 000 87.77 5.61
均值 CV
庚二酸 20 87.13 15.61
5-羟基吲哚乙酸 20 85.78 11.20 1 000 90.23 13.42
1 000 87.54 10.66 2 500 92.14 9.68
2 500 93.17 9.48
脯氨酸 20 89.48 14.17
谷氨酰胺 20 89.98 10.38 1 000 93.16 12.46
1 000 91.33 9.41 2 500 94.81 11.20
2 500 92.74 6.18
酪氨酸 2 000 86.21 11.13
马尿酸 2 000 91.33 13.95 10 000 92.33 6.62
10 000 87.63 12.18 50 000 88.54 4.14
50 000 92.12 8.54
色氨酸 2 000 86.77 13.53
庚二酸 20 88.13 14.37 10 000 87.65 11.58
1 000 87.55 10.72 50 000 92.20 6.25
2 500 90.81 10.85 酪胺 20 86.47 14.26
脯氨酸 20 86.02 14.12 1 000 98.14 7.67
1 000 89.88 10.72 2 500 97.88 6.23
2 500 94.28 8.26 缬氨酸 20 90.83 12.58
酪氨酸 2 000 85.62 11.07 1 000 89.73 10.23
10 000 91.38 9.31 2 500 94.82 8.32
50 000 92.46 6.61
色氨酸 2 000 92.07 12.37 2.10 稳定性试验
10 000 90.55 11.17 2.10.1 室温稳定性 取同一份已知含量的健康人体尿
50 000 93.91 9.66
酪胺 20 90.32 13.44 液上清液，分别加入不同质量浓度的混合对照品溶液，
1 000 86.76 11.90 分别制成3个质量浓度的溶液，每个浓度制备3份，其中
2 500 92.35 9.24 5-羟基吲哚乙酸、谷氨酰胺、缬氨酸、庚二酸、脯氨酸、酪
缬氨酸 20 86.81 14.11
1 000 90.22 12.80 胺的质量浓度分别为20、1 000、2 500 ng/mL，色氨酸、酪
2 500 95.81 9.84 氨酸、马尿酸的质量浓度分别为 2 000、10 000、50 000
2.9 提取回收率试验 ng/mL，分别在室温下放置 0、3、6、9、12 h 后，按“2.3”项
取已知分析物含量的健康受试者尿液200 μL，分别 下方法处理后进样分析，计算测定值与标示值的 RE。
加入3个质量浓度的混合对照品溶液100 μL（5-羟基吲哚 结果显示，9种待测物的RE均＜14.71％（n＝5），均符合
乙酸、谷氨酰胺、缬氨酸、庚二酸、脯氨酸、酪胺的质量浓度 相关规定。
分别为 20、1 000、2 500 ng/mL，色氨酸、酪氨酸、马尿酸 2.10.2 处理后稳定性 取同一份已知含量的健康人体
的质量浓度分别为 2 000、10 000、50 000 ng/mL）和内标 尿液上清液，分别加入不同质量浓度的混合对照品溶
溶液20 μL，每个浓度制备6份，涡旋30 s，加入200 μL乙 液，分别制成 3 个质量浓度的溶液，每个浓度制备 3 份，
腈，涡旋 60 s，于 4 ℃ ，6 000×g 离心 10 min，取上清液于 其中 5-羟基吲哚乙酸、谷氨酰胺、缬氨酸、庚二酸、脯氨
1.5 mL离心管中，于40 ℃下氮气吹干，再用100 μL 10％ 酸、酪胺的质量浓度分别为20、1 000、2 500 ng/mL，色氨
甲醇水复溶，6 000×g 离心 10 min，取上清液进样分析， 酸、酪氨酸、马尿酸的质量浓度分别为 2 000、10 000、
记录峰面积 A4。再分别取已知含量的健康受试者尿液 50 000 ng/mL，按“2.3”项下方法处理后，在室温下放置
200 μL，按“2.8”项下方法操作，记录峰面积 A2和 A3。以 0、3、6、9、12、24 h，再按“2.1”项下条件进样分析，计算测
（A4－A3 ）/A2×100％计算提取回收率。结果显示，9 种待 定值与标示值的 RE。结果显示，9 种待测物的 RE 均＜

·96 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 1 中国药房 2020年第31卷第1期