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2.2 溶液的制备 取同一例临床抑郁症患者尿液6份，按“2.3”项下方
2.2.1 对照品贮备液 精密称取5-羟基吲哚乙酸、谷氨 法处理后进样分析，在该条件下，谷氨酰胺、脯氨酸、缬
酰胺、马尿酸、庚二酸、脯氨酸、酪氨酸、色氨酸、酪胺、缬 氨酸、酪胺、酪氨酸、色氨酸、庚二酸、马尿酸、5-羟基吲
氨酸对照品适量，分别置于量瓶中，加2％甲酸-水 ∶ 甲醇 哚乙酸和内标可的松的保留时间依次为 2.01、2.11、
（90 ∶ 10，V/V）溶解并定容，制成质量浓度均为 1.000 2.33、4.42、4.72、7.40、8.80、8.90、9.11、12.01 min，
mg/mL的对照品贮备液。 LC-MS/MS 图见图 2。
2.2.2 内标溶液 精密称取可的松对照品适量，置于量 2.5 线性关系和定量下限考察
瓶中，加甲醇溶解并定容，制成质量浓度为30.02 mg/mL 精密量取“2.2.1”项下一系列对照品贮备液，分别以
的内标溶液。 健康受试者尿液上清液稀释，制成下列质量浓度的对照
2.3 尿液样品的处理 品混合工作液，其中 5-羟基吲哚乙酸、谷氨酰胺、缬氨
精密吸取尿液上清液200 μL，置于1.5 mL EP管中， 酸、庚二酸、脯氨酸、酪胺的质量浓度分别为 10.00、
精密加入内标溶液20 μL，涡旋30 s，再加入200 μL的乙 25.00、100.00、200.00、400.00、1 600、3 200 ng/mL，色氨
腈，涡旋60 s，于4 ℃下6 000×g离心10 min，吸取上清液 酸、酪氨酸、马尿酸的质量浓度分别为1 600、3 200、6 400、
1.5 mL，置于 EP 管中，于 40 ℃下氮气吹干，残渣用 100 12 800、25 600、51 200 ng/mL，按“2.3”项下方法处理后
μL 10％甲醇水溶液溶解，于4 ℃下6 000×g离心10 min， 进样分析，记录峰面积。另取已知含量的健康受试者尿
取上清液进样分析。 液200 μL，加入200 μL乙腈，涡旋60 s，于4 ℃下6 000×g
2.4 专属性试验 离心 10 min，取上清液，于 40 ℃下氮气吹干，再用 100

3.0×10 5
5
cps 6.0×10 5 cps 2.0×10 5
离子强度， 2.0×10 5 离子强度， 1.0×10 5
4.0×10
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 0 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
m/z m/z
A.谷氨酰胺 B.脯氨酸
8.0×10 5 8.0×10 5
cps 6.0×10 5 cps 6.0×10 5
离子强度， 4.0×10 5 5 离子强度， 4.0×10 5 5
2.0×10
2.0×10
0 0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
m/z m/z
C.缬氨酸 D.酪胺
1.4×10 6 6
1.2×10
cps 1.0×10 5 cps 1.0×10 6 5
离子强度， 5.0×10 4 离子强度， 6.0×10 5 5 5
8.0×10
4.0×10
2.0×10
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 0 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
m/z m/z
E.酪胺酸 F.色氨酸
1.0×10 5 6
cps cps 1.5×10 6
离子强度， 5.0×10 4 离子强度， 5.0×10 5
1.0×10
0 0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
m/z m/z
G.庚二酸 H.马尿酸
1.5×10 6 3.0×10 5
cps 1.0×10 6 cps 2.5×10 5 5
离子强度， 5.0×10 5 离子强度， 1.5×10 5 5
2.0×10
1.0×10
0 5.0×10 4
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
m/z m/z
I. 5-羟基吲哚乙酸 J.内标
图2 LC-MS/MS色谱图
Fig 2 LC-MS/MS chromatogram

·94 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 1 中国药房 2020年第31卷第1期