Page 105 - 202001

μL 10％甲醇水复溶，6 000×g离心10 min，取上清液进样 表3 准确度试验结果（n＝6）
分析，记录内源性峰面积。以加入对照品的质量浓度为 Tab 3 Results of accuracy tests（n＝6）
横坐标（x），加入对照品后的峰面积减去内源性峰面积 待测物 加入量，ng/mL 准确度，％
之差与内标峰面积的比值为纵坐标（y），绘制标准曲 均值 RSD
5-羟基吲哚乙酸 20 86.29 12.02
线。9种待测物的线性关系和定量下限结果见表2。 1 000 90.20 9.33
表2 9种待测物的线性关系和定量下限结果 2 500 92.70 5.45
谷氨酰胺 20 89.01 9.89
Tab 2 Linear range and lower limit of quantitation of 1 000 91.94 6.68
9 determinand 2 500 92.22 5.80
马尿酸 2 000 88.15 11.27
待测物 标准曲线 r 线性范围，ng/mL n 定量下限，ng/mL 10 000 86.82 9.26
5-羟基吲哚乙酸 y=0.000 557x+0.012 1 0.996 8 10.00～3 200 7 10.00
50 000 87.29 4.99
谷氨酰胺 y=0.000 806x+0.034 7 0.996 7 10.00～3 200 7 10.00 庚二酸 20 87.00 14.02
马尿酸 y=0.000 67x+0.138 0.998 8 10.00～3 200 7 10.00 1 000 90.90 12.44
庚二酸 y=0.000 057 8x+0.007 16 0.993 8 10.00～3 200 7 10.00
2 500 93.88 9.48
脯氨酸 y=0.003 71x+0.038 1 0.998 9 10.00～3 200 7 10.00 脯氨酸 20 90.17 12.58
酪氨酸 y=0.000 210x+0.021 7 0.999 7 1 600～51 200 6 1 600 1 000 93.30 11.32
色氨酸 y=0.000 509x+0.097 0.999 2 1 600～51 200 6 1 600 2 500 95.84 11.79
酪胺 y=0.003 27x+0.331 0.999 6 1 600～51 200 6 1 600 酪氨酸 2 000 86.45 10.50
缬氨酸 y=0.001 91x+0.181 0.994 2 10.00～3 200 7 10.00
10 000 93.10 6.76
2.6 准确度试验 50 000 88.11 4.20
色氨酸 2 000 86.68 11.29
精密量取“2.2.1”项下一系列对照品贮备液，分别以
10 000 87.06 10.45
健康受试者尿液稀释，制成3个质量浓度的溶液，每个浓 50 000 91.92 5.82
度制备6份，其中5-羟基吲哚乙酸、谷氨酰胺、缬氨酸、庚 酪胺 20 86.47 12.38
1 000 98.65 7.78
二酸、脯氨酸、酪胺的质量浓度分别为 20、1 000、2 500 2 500 95.60 6.24
ng/mL，色氨酸、酪氨酸、马尿酸的质量浓度分别为2 000、 缬氨酸 20 91.06 11.28
10 000、50 000 ng/mL，按“2.3”项下方法处理后进样分 1 000 89.26 8.95
2 500 94.78 6.34
析，以测定值/标示值×100％计算准确度。结果显示，9
表4 精密度试验结果（n＝6）
种待测物的准确度在 86.29％～98.65％之间，均符合相
Tab 4 Results of precision tests（n＝6）
关规定。准确度试验结果见表3。
待测物 加入量，ng/mL 日内RSD，％ 日间RSD，％
2.7 精密度试验 5-羟基吲哚乙酸 20 7.64 8.63
精密量取“2.2.1”项下一系列对照品贮备液，以健康 1 000 5.04 5.70
2 500 3.87 4.27
受试者尿液上清液稀释，制成3个质量浓度的溶液，其中
谷氨酰胺 20 11.13 11.97
5-羟基吲哚乙酸、谷氨酰胺、缬氨酸、庚二酸、脯氨酸、酪 1 000 7.94 7.71
胺的质量浓度分别为20、1 000、2 500 ng/mL，色氨酸、酪 2 500 3.24 3.47
马尿酸 2 000 14.05 15.05
氨酸、马尿酸的质量浓度分别为 2 000、10 000、50 000 10 000 9.25 9.46
ng/mL，按“2.3”项下方法处理后进样分析，每个浓度样 50 000 5.20 6.23
庚二酸 20 14.38 14.65
品日内测定 6 份，连续测定 6 d，记录峰面积，计算日内、
1 000 12.00 10.76
日间精密度。结果显示，9 种待测物的日内、日间 RSD 2 500 4.51 4.39
均不高于 14.65％（n＝6），均符合相关规定。精密度试 脯氨酸 20 10.56 9.56
1 000 11.21 12.21
验结果见表4。
2 500 5.87 6.27
2.8 基质效应考察 酪氨酸 2 000 10.99 12.02
取流动相 200 μL，加入 200 μL 乙腈，涡旋 60 s，于 10 000 8.63 9.56
50 000 7.67 7.05
4 ℃下 6 000×g 离心 10 min，取上清液，分别加入 3 个质 色氨酸 2 000 13.33 14.43
量浓度的混合对照品溶液 100 μL（5-羟基吲哚乙酸、谷 10 000 11.44 11.72
50 000 9.19 9.59
氨酰胺、缬氨酸、庚二酸、脯氨酸、酪胺的质量浓度分别
酪胺 20 9.79 10.36
为 20、1 000、2 500 ng/mL，色氨酸、酪氨酸、马尿酸的质 1 000 9.21 10.21
量浓度分别为 2 000、10 000、50 000 ng/mL）和内标溶液 2 500 6.82 7.84
缬氨酸 20 12.25 13.53
20 μL，每个浓度制备 6 份，吸取上清液于 1.5 mL EP 管 1 000 8.49 9.89
中，于 40 ℃下氮气吹干，再用 100 μL 10％甲醇水复溶， 2 500 7.69 8.87

中国药房 2020年第31卷第1期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 1 ·95 ·