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表3 各组细胞早期凋亡率测定结果(x±±s,n=3)
Caspase 3 32 kDa
Tab 3 Results of early apoptosis rate of cells in each
group(x±±s,n=3) Cleaved-Caspase 3 19 kDa
组别 浓度,μmol/L 细胞早期凋亡率,% β-actin 42 kDa
空白对照组 2.63±0.46
白鲜碱150 μmol/L组
白鲜碱50 μmol/L组
白鲜碱组 50 3.44±0.75 空白对照组
100 2.61±0.20 白鲜碱100 μmol/L组
150 2.53±0.11
图4 各组细胞中Caspase 3、Cleaved-Caspase 3蛋白表
达的电泳图
Fig 4 Electrophoregrams of protein expressions of
Caspase 3 and Cleaved-Caspase 3 of cells in
each group
表5 各组细胞中Caspase 3、Cleaved-Caspase 3蛋白表
50 μm 50 μm
A.空白对照组 B.白鲜碱50 μmol/L组 达测定结果(x±±s,n=3)
Tab 5 Results of protein expressions of Caspase 3 and
Cleaved-Caspase 3 of cells in each group(x±±s,
n=3)
蛋白表达相对量
组别 浓度,μmol/L
Caspase 3/β-actin Cleaved-Caspase 3/β-actin
空白对照组 0.66±0.02 0.56±0.04
50 μm 50 μm 白鲜碱组 50 0.67±0.01 0.75±0.05 *
C.白鲜碱100 μmol/L组 D.白鲜碱150 μmol/L组 100 0.70±0.03 0.77±0.06 *
图3 各组细胞坏死检测的Hoechst 33342和PI双染图 150 0.72±0.01 0.66±0.01
*
Fig 3 Hoechst 33342 and PI double staining pictures 注:与空白对照组比较,P<0.05,
*
Note:vs. blank control group,P<0.05
for cell necrosis detection in each group
表4 各组细胞坏死率测定结果(x±±s,n=3)
Tab 4 Results of necrosis rate of cells in each group
(x±±s,n=3)
组别 浓度,μmol/L 细胞坏死率,%
空白对照组 42.47±10.55 50 μm
50 μm
白鲜碱组 50 66.12±6.38
100 75.14±3.59 A.空白对照组 B.白鲜碱50 μmol/L组
150 78.64±7.23 *
*
注:与空白对照组比较,P<0.05
*
Note:vs. blank control group,P<0.05
3.5 白鲜碱对脾淋巴细胞 Caspase 3、Cleaved-Caspase
3蛋白表达的影响
在细胞孵育24 h后,与空白对照组比较,白鲜碱50、
50 μm 50 μm
100、150 μmol/L 组细胞中 Caspase 3 蛋白表达水平差异
C.白鲜碱100 μmol/L组 D.白鲜碱150 μmol/L组
均无统计学意义(P>0.05);但白鲜碱 50、100 μmol/L 组
图5 各组细胞DNA损伤检测的荧光图
细胞中 Cleaved-Caspase 3 蛋白表达水平显著升高(P<
Fig 5 Fluorescence charts of DNA damage detection
0.05),结果见图4、表5。
3.6 白鲜碱对脾淋巴细胞DNA损伤影响 of cells in different group
在细胞孵育24 h后,与空白对照组比较,白鲜碱50、 作用于体外培养的原代小鼠脾淋巴细胞,以筛选出对原
100、150 μmol/L 组脾淋巴细胞 DNA 拖尾区域比例均不 代小鼠脾淋巴细胞具有损伤作用的药物浓度,并初步阐
同程度升高,呈剂量依赖性趋势;其中,白鲜碱 100、150 述损伤机制,此浓度梯度亦在白鲜碱产生肝细胞损伤的
μmol/L 组差异有统计学意义(P<0.01),结果见图 5、 浓度范围内 。本研究发现,150 μmol/L 白鲜碱可以显
[8]
表6。 著抑制细胞活力、增加细胞LDH释放率,这提示白鲜碱
4 讨论 对脾淋巴细胞确有一定的损伤。细胞凋亡可以导致细
本研究采用 50、100、150 μmol/L 3 个浓度的白鲜碱 胞活力下降,脾淋巴细胞自身在体外存在着自发性凋
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