Page 43 - 2019年11月第30卷第21期

炔苷和毛蕊异黄酮葡萄糖苷的高效液相色谱图谱见图5。 6 份，每份约 1.5 g（已知含党参炔苷 0.053 mg/g、毛蕊异

50 黄酮葡萄糖苷 0.026 mg/g），精密称定，分别置于具塞锥
40 毛蕊异黄酮
葡萄糖苷
mAU 30 党参炔苷 形瓶中，加入 0.4 mL“2.7.2”项下混合对照品溶液（含党
20
10 参炔苷 0.08 mg，毛蕊异黄酮葡萄糖苷 0.04 mg），按
0
“2.7.3”项下方法制备供试品溶液，再按“2.7.1”项下色谱
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120
t，min 条件进样测定，记录峰面积并计算回收率。结果，毛蕊
A.对照品溶液
异黄酮葡萄糖苷、党参炔苷平均回收率分别为 99.25％、
50 毛蕊异黄酮 101.04％，RSD 分别为 1.62％、1.26％（n＝6），表明方法
40 葡萄糖苷 党参炔苷
mAU 30 准确度良好。
20
10 2.7.10 样品含量测定 分别称取 10 批肝肾颗粒样品
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 （批号：201801、201802、201803、201804、201805、201806、
t，min
B.供试品溶液 201807、201808、201809 和 201810），每份约 3 g，精密称
图5 党参炔苷和毛蕊异黄酮葡萄糖苷的高效液相色谱 定，按“2.8.3”项下方法制备供试品溶液，按“2.7.1”项下
图谱 色谱条件进样测定，记录峰面积。结果，10 批肝肾颗粒
Fig 5 HPLC chromatograms of lobetyolin and calyco-
样品中党参炔苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷平均含量分别为
sin-7-glucoside
0.054、0.025 mg/g，RSD分别为2.70％、2.46％（n＝10）。
2.7.5 线性关系考察 分别精密量取“2.7.2”项下混合 2.8 肝肾颗粒的指纹图谱
对照品溶液 1.5、1.25、1.0、0.5、0.25 mL，分别置于 5 mL 由于检测甜菜碱需要使用 ELSD，但经过前期预试
量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得混合对照品系列溶 验发现，ELSD不适于肝肾颗粒指纹图谱研究，经综合考
液。再取系列溶液按“2.7.1”项下色谱条件进样测定，记 虑，选用了在紫外条件下有特征吸收，并且以含量稳定
录峰面积。以对照品溶液的质量浓度为横坐标（x）、峰 的党参炔苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷作为后续肝肾颗粒指
面积为纵坐标（y）进行回归分析，得党参炔苷回归方程 纹图谱研究指标。
为y＝12 479x+6 279.18（r＝0.999 4）；毛蕊异黄酮葡萄糖 2.8.1 HPLC指纹图谱的生成 取10批（编号S1～S10，
苷的回归方程为y＝11 606x－3 023.32（r＝0.999 1）。结 其中 S1～S2 为旧工艺样品，S3～S10 为新工艺样品）肝
果表明，党参炔苷和毛蕊异黄酮葡萄糖苷的检测质量浓 肾颗粒各适量，按“2.7.3”项下方法制备供试品溶液，按
度分别在 10～60、5～30 μg/mL范围内线性关系良好。 “2.7.1”项下色谱条件进样测定，采用《中药指纹图谱相
2.7.6 精密度试验 取“2.7.3”项下供试品溶液适量，按 似度评价系统》（2012A 版）对 10 批肝肾颗粒样品的
“2.7.1”项下色谱条件连续进样测定 5 次，记录党参炔苷 HPLC图谱进行分析，得其HPLC指纹图谱，设计时间窗
和毛蕊异黄酮葡萄糖苷的保留时间和峰面积。结果，党 宽度为0.20 min，以中位数法生成对照指纹图谱。结果，
参炔苷和毛蕊异黄酮葡萄糖苷的保留时间和峰面积的 肝肾颗粒HPLC叠加指纹图谱见图6，HPLC对照指纹图
RSD值均＜1.96％（n＝5），表明本方法精密度良好。 谱见图7。
2.7.7 稳定性试验 取“2.7.3”项下供试品溶液，分别于
毛蕊异黄酮
室温下放置0、4、8、12和24 h后，按“2.7.1”项下色谱条件 葡萄糖苷 党参炔苷
进样测定，记录党参炔苷和毛蕊异黄酮葡萄糖苷的保留
时间和峰面积。结果，党参炔苷和毛蕊异黄酮葡萄糖苷 S10
S9
的保留时间和峰面积的RSD值均＜2.15％（n＝5），表明 mAU S8
S7
供试品溶液室温下放置24 h内稳定。 S6
S5
2.7.8 重复性试验 按“2.7.3”项下方法制备供试品溶 S4
S3
液，共 5 份，再按“2.7.1”项下色谱条件连续进样测定，记 S2
S1
录党参炔苷和毛蕊异黄酮葡萄糖苷的保留时间和峰面
0 20 40 60 80 100 120
积。结果，党参炔苷和毛蕊异黄酮葡萄糖苷的保留时间 t，min
和峰面积的RSD值均＜2.01％（n＝5），表明本方法重复 图6 10批肝肾颗粒HPLC叠加指纹图谱
性良好。 Fig 6 HPLC superposed fingerprint of 10 batches of
2.7.9 加样回收试验 称取肝肾颗粒（批号：201806）共 Ganshen granules

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