Page 80 - 2019年10月第30卷第20期

乙醇体积分数（A）、料液比（B）、提取次数（E）为自变量， 表9 Box-Behnken试验方差分析结果
以总黄酮含量（Y）为因变量，采用 3 因素 3 水平设计试 Tab 9 Results of variance analysis of Box-Behnken re-
验 [11-12] ，同时结合单因素试验结果确定提取时间为 60 sponse surface methodology
min、提取温度为80 ℃。因素与水平见表7，试验设计方 方差来源 偏差平方和 自由度 均方差 F P
模型 4.38 9 0.49 97.32 ＜0.000 1
案与结果见表8。 A 0.01 1 0.01 2.40 0.165 2
表7 Box-Behnken响应面法的因素与水平 B 2.45×10 －3 1 2.45×10 －3 0.49 0.506 7
E 2.39 1 2.39 477.08 ＜0.000 1
Tab 7 Factors and levels of Box-Behnken response AB 0.01 1 0.01 2.64 0.148 0
surface methodology AE 4.90×10 －3 1 4.90×10 －3 0.98 0.355 3
BE 9.03×10 －3 1 9.03×10 －3 1.80 0.221 2
因素
水平 A 2 0.23 0.23 46.47 0.000 2
A，％ B，g/mL E，次
B 2 0.47 1 0.47 93.03 ＜0.000 1
－1 35 1∶25 1 E 2 1.07 1.07 214.60 ＜0.000 1
0 45 1∶29 2 残差 0.04 7 5.00×10 －3
1 55 1∶33 3
失拟项 0.28 3 9.28×10 －3 5.15 0.073 6
表8 Box-Behnken试验设计方案与结果 纯误差 7.20×10 －3 4 1.80×10 －3
总离差 4.42 16
Tab 8 Trial plan and results of Box-Behnken re-
总黄酮含量，％
sponse surface methodology 3.8 1∶33
1∶31
试验号 A B E Y，％ ％ 3.6 1∶29
3.4
1 0 0 0 3.67 总黄酮含量， 3.2 B
2 －1 0 1 3.55 3.0 1∶27
3 0 0 0 3.71 1∶25
1∶33 55.00
4 0 0 0 3.77 1∶31 1∶29 45.00 35.00 40.00 45.00 50.00 55.00
5 －1 0 －1 2.39 B 1∶27 1∶25 35.00 A A
6 1 0 －1 2.50 A. A-B响应面图 B. A-B等高线图
总黄酮含量，％
7 0 －1 －1 2.31 4.0 3.00
8 －1 －1 0 3.34 ％ 3.5 2.50
9 1 0 1 3.52 3.0
10 0 1 －1 2.38 总黄酮含量， 2.5 E 2.00
11 0 0 0 3.73 2.0 1.50
12 0 －1 1 3.50 3.0 55.00
2.5 45.00 1.00
13 －1 1 0 3.18 E 2.0 1.5 1.0 35.00 A 35.00 40.00 45.00 50.00 55.00
A
14 1 1 0 3.10 C. A-E响应面图 D. A-E等高线图
15 0 1 1 3.38 总黄酮含量，％
3.00
16 1 －1 0 3.03
4.0
17 0 0 0 3.77 ％ 3.5 2.50
采用 Design Expert 8.0.6 软件对表 8 数据进行二次 总黄酮含量， 3.0 E 2.00
2.5
多元拟合，得Y＝3.37－0.04A－0.02B+0.55E+0.06AB－ 2.0 1.50
3.0 1∶33 1.00
0.04AE－0.05BE－0.24A －0.33B －0.51E（R＝0.996）， 2.5 2.0 1∶29 1∶31 1∶25 1∶27 1∶29 1∶31 1∶33
2
2
2
B
E 1.5 1.0 1∶25 1∶27 B
这提示模型拟合度及预测性均较好。对模型进行方差 E. B-E响应面图 F. B-E等高线图
分析，结果见表9。由表9可知，所建模型拟合显著性具
图3 各因素对总黄酮含量影响的响应面和等高线图
有统计学意义（P＜0.01），表明模型与实际情况吻合良 Fig 3 Response surface and contour plots for the ef-
好；模型失拟项显著性无统计学意义（P＝0.073 6），表明 fects of each factor on the total flavonoids con-
未知因素对模型拟合结果干扰小，模型误差较小。 tent
2.3.4 响应面分析 采用 Design-Expert 8.0.6 软件，以 2.3.5 最优提取工艺的确定 基于 Design-Expert 8.0.6
乙醇体积分数（A）、料液比（B）、提取次数（E）为响应因 软件分析得到水石榴中总黄酮的最优提取工艺为：乙醇
[13]
子，以总黄酮含量为响应值，绘制响应面和等高线图 ， 体积分数 59.18％，料液比 1 ∶ 33.63（g/mL），提取次数
详见图3。 由图3可知，在因素A与B的交互作用下，总 3.18次，提取时间60 min，提取温度80 ℃；总黄酮含量预
黄酮的含量呈现先增加后降低的趋势；在因素A与E的 测值为2.64％。考虑到实际操作的可行性，确定最优提
交互作用下，总黄酮的含量呈现逐渐增加的趋势；在因 取工艺为：乙醇体积分数 60％，料液比 1 ∶ 34（g/mL），提
素B与E的交互作用下，总黄酮的含量呈现逐渐增加的 取次数3次，提取时间60 min，提取温度80 ℃。
趋势。 2.3.6 验证试验 按最优提取工艺平行操作 6 次，结果

中国药房 2019年第30卷第20期 China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 20 ·2811 ·