Page 79 - 2019年10月第30卷第20期

2.2.2 料液比 取药材样品粉末，共 15 份，每份 1.0 g， 表4 Plackett-Burman试验方案设计与结果
分为 5 组，固定乙醇体积分数为 70％、提取次数为 1 次、 Tab 4 Trial plan and results of Plackett-Burman tests
提取温度为 70 ℃、提取时间为 60 min 的条件下，考察 试验号 A B C D E Y，％
不同料液比（1 ∶ 10、1 ∶ 15、1 ∶ 20、1 ∶ 30、1 ∶ 40、1 ∶ 50，g/mL） 1 1 1 －1 1 1 3.51
2 1 1 1 －1 －1 2.50
对水石榴中总黄酮含量的影响，详见图 2B。由图 2B 可 3 1 －1 1 1 －1 2.31
知，随着料液比的增加，药材提取后总黄酮的含量呈现 4 1 －1 －1 －1 1 2.42
5 －1 －1 －1 －1 －1 1.86
逐渐增加的趋势；当料液比＞1 ∶ 20（g/mL）时，总黄酮
6 1 －1 1 1 1 2.70
的含量增加不明显。考虑节约溶剂，故选择料液比为 7 －1 －1 －1 1 －1 1.85
1∶20（g/mL）。 8 1 1 －1 －1 －1 3.16
9 －1 －1 1 －1 1 2.43
2.2.3 提取温度 取药材样品粉末，共 15 份，每份 1.0
10 －1 1 1 1 －1 2.21
g，分为 5 组，固定乙醇体积分数为 70％、料液比为 1 ∶ 30 11 －1 1 －1 1 1 2.43
（g/mL）、提取次数为1次、提取时间为60 min的条件下， 12 －1 1 1 －1 1 2.64
考察不同提取温度（50、60、70、80、90 ℃）对总黄酮含量 表5 Plackett-Burman试验方差分析结果
的影响，详见图 2C。由图 2C 可知，随着提取温度的增 Tab 5 Results of variance analysis for Plackett-Bur-
加，总黄酮的含量呈现逐渐增加的趋势；当提取温度为 man tests
80 ℃时，总黄酮的含量最高，继续增加提取温度，其含量 误差来源 偏差平方和 自由度 均方差 F P
A 0.84 1 0.84 9.81 0.020 3
不再增加，故选择提取温度为80 ℃。
B 0.69 1 0.69 8.04 0.029 7
2.2.4 提取时间 取药材样品粉末，共 15 份，每份 1.0 C 0.02 1 0.02 0.19 0.679 9
g，分为 5 组，固定乙醇体积分数为 70％、料液比为 1 ∶ 30 D 0.00 1 0.00 0.00 1.000 0
E 0.42 1 0.42 4.87 0.069 5
（g/mL）、提取次数为1次、提取温度为70 ℃的条件下，考 模型 1.97 5 0.39 4.58 0.045 6
察不同提取时间（30、60、90、120、150 min）对总黄酮含 残差 0.52 6 0.09
总离差 2.48 11
量的影响，详见图 2D。由图 2D 可知，随着提取时间的
增加，药材提取后总黄酮的含量呈现先增加后略有降低 采用 Design-Expert 8.0.6 软件对表 4 数据进行多项
的趋势，虽然在提取时间为 90 min 时总黄酮的含量最 式拟合回归，得回归方程为 Y＝2.50+0.27A+0.24B－
高，但与提取时间为60 min时无明显差异。考虑到节约 0.04C+0.00D+0.19E（P＝0.045 6＜0.05），这表明方程拟
时间和成本，故选择提取时间为60 min。 合显著性具有统计学意义。方差分析结果显示，5 个因
2.2.5 提取次数 取药材样品粉末，共9份，每份1.0 g，分 素对总黄酮含量影响的大小顺序为：A＞B＞E＞C＞D。
为3组，固定乙醇体积分数为70％、料液比为1∶30（g/mL）、 2.3.2 最陡爬坡试验 根据Plackett-Burman试验结果，
提取温度为70 ℃、提取总时间为60 min的条件下，考察 选择对总黄酮含量具有显著性影响的因素，即乙醇体积
不同提取次数（1、2、3 次）对总黄酮含量的影响，详见图 分数和料液比进行最陡爬坡试验，再根据其效应大小，
2E。由图2E可知，随着提取次数的增加，药材提取后总 设定变化方向和步长，以逼近其最佳取值范围 [9-10] ；同时
黄酮的含量呈现逐渐增加的趋势；当提取时间为3次时， 结合单因素试验结果，确定提取次数为3次、提取时间为
总黄酮的含量最高，故选择提取次数为3次。 60 min、提取温度为80 ℃，结果见表6。
2.3 水石榴中总黄酮提取工艺优化 表6 最陡爬坡试验设计与结果
2.3.1 Plackett-Burman 试验 在单因素试验基础上，以 Tab 6 Design and results of steepest climbing test
乙醇体积分数（A）、料液比（B）、提取温度（C）、提取时间 试验号 乙醇体积分数，％ 料液比，g/mL 总黄酮含量，％
（D）、提取次数（E）为考察因素，以总黄酮含量（Y）为指 1 10 1∶10 2.00
2 15 1∶13 2.26
标，采用 Design-Expert 8.0.6 软件进行 Plackett-Burman 3 20 1∶16 2.42
试验 ，每个因素取 2 个水平。因素与水平见表 3，试验 4 25 1∶19 2.55
[8]
5 30 1∶22 2.56
方案设计与结果见表4，方差分析结果见表5。
6 35 1∶25 2.58
表3 Plackett-Burman试验的因素与水平 7 40 1∶27 2.73
Tab 3 Factors and levels of Plackett-Burman tests 8 45 1∶29 2.81
9 50 1∶31 2.72
因素 10 55 1∶33 2.47
水平
A，％ B，g/mL C，℃ D，min E，次
－1 10 1∶10 70 30 1 2.3.3 Box-Behnken响应面法 在Plackett-Burman试验
1 50 1∶20 90 90 3 和最陡爬坡试验的基础上进行 Box-Behnken 试验。以

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