Page 78 - 2019年10月第30卷第20期

表2 加样回收率试验结果（n＝6）
0.600 1
Tab 2 Results of recovery tests（n＝6）
取样量，g 样品含量，mg 加入量，mg 测得量，mg 加样回收率，％ 平均加样回收率，％ RSD，％
0.400
0.202 3.434 3.488 6.770 95.64
Abs 2 0.201 3.417 3.488 6.900 99.86
0.200 3.400 3.488 6.780 96.90
0.200 97.17 2.71
0.200 3.400 3.488 6.810 97.76
0.201 3.417 3.488 6.660 92.98
0 0.201 3.417 3.488 6.900 99.86
400 500 600 700 800
λ，nm 2.1.11 样品含量测定 取 10 批药材样品粉末各约 1.0
注：1.供试品溶液；2.对照品溶液
g，精密称定，按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，再按
Note：1. test sample solution；2. substance control solution
图1 紫外扫描图 “2.1.4”项下方法显色反应并定容后，于406 nm波长处测
Fig 1 UV scanning spectra 定吸光度。平行操作3次，并按“2.1.9”项下公式计算总黄
酮的含量。结果，10批药材样品中总黄酮的平均含量为
0.75、1、1.25、1.5 mL，分别置于 10 mL 量瓶中，加“2.1.4”
1.70％～2.10％。
项下 1％三氯化铝水溶液5 mL进行显色反应，再加70％
2.2 水石榴中总黄酮提取工艺单因素试验
乙醇稀释至刻度，得质量浓度分别为0.012、0.018、0.024、
[8]
参考相关文献 进行水石榴中总黄酮提取工艺单因
0.030、0.036 mg/mL的系列线性工作溶液。将上述工作
素试验。
溶液于45 ℃水浴加热20 min后，冷却至室温，于406 nm
2.2.1 乙醇体积分数 取药材样品粉末，共 15 份，每份
波长处测定吸光度。以芦丁质量浓度（x，mg/mL）为横
1.0 g，分为5组，固定料液比为1 ∶ 30（g/mL）、提取次数为
坐标、吸光度（y）为纵坐标进行线性回归，得芦丁回归方
1次、提取温度为70 ℃、提取时间为60 min的条件下，考
程为y＝24.093 4x+0.017 410 3（r＝0.999 9），结果表明芦
察不同乙醇体积分数（10％、30％、50％、70％、95％）对
丁在0.012～0.036 mg/mL范围内线性关系良好。
总黄酮含量的影响，详见图 2A。由图 2A 可知，随着乙
2.1.7 精密度试验 取“2.1.1”项下对照品溶液1 mL，按
醇体积分数的增加，药材提取后总黄酮的含量呈现先增
“2.1.4”项下方法显色反应并定容后，于406 nm波长处连
加后降低的趋势；当乙醇体积分数为 30％时，总黄酮的
续测定 6 次吸光度。结果，芦丁吸光度的 RSD＝0.17％
含量最高，故选择乙醇体积分数为30％乙醇。
（n＝6），表明仪器精密度良好。
4 2.5
2.1.8 稳定性试验 取“2.1.2”项下供试品溶液（编号： 2.0
％ 3 ％
S10）1 mL，按“2.1.4”项下方法显色反应并定容后，分别 1.5
于室温下放置 5、10、20、30、40、50、60 min 时，于 406 nm 总黄酮含量， 2 总黄酮含量， 1.0
波长处测定吸光度。结果，芦丁吸光度的 RSD＝0.74％ 1 0.5
0 0
（n＝7），表明供试品溶液在室温下放置 60 min 内基本 10 30 50 70 95 1 ∶20 1∶40 1∶60
稳定。 乙醇体积分数，％ 料液比，g/mL
A.体积分数的影响 B.料液比的影响
2.1.9 重复性试验 取药材样品粉末（编号：S10），共 6
2.0
份，每份1.0 g，按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，再按 2.0
％ ％
“2.1.4”项下方法显色反应并定容后，于 406 nm 波长处 1.5
测定吸光度。并入计算方法按公式[总黄酮含量（％）＝ 总黄酮含量， 1.5 总黄酮含量，
c 测×DV1/mV2×100％。式中，c 测为总黄酮的实际测得浓 1.0 1.0
40 50 60 70 80 90 100 30 60 90 120 150
度，D为稀释倍数，V1为溶剂体积，m为药材样品质量，V2 提取温度，℃ 提取时间，min
C.提取温度的影响 D.提取时间的影响
为取样量]计算样品中总黄酮的含量。结果，总黄酮的
平均含量为1.75％，RSD＝2.46％（n＝6），表明本方法重 5
％ 4
复性良好。 3
2.1.10 加样回收率试验 精密称取药材样品粉末（编 总黄酮含量， 2
号：S10），共 6 份，每份 0.2 g，分别加入质量浓度为 1
0.218 mg/mL 的对照品溶液 16 mL，按“2.1.2”项下方法 0 1 2 3
提取次数，次
制备供试品溶液，再按“2.1.4”项下方法显色反应并定容 E.提取次数的影响
后，于406 nm波长处测定吸光度并计算加样回收率，结 图2 单因素试验结果
果见表2。 Fig 2 Results of single factor tests

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