Page 85 - 2019年10月第30卷第20期

之间的相互作用。
Claudin-1 20 kDa P-gp、Mrp2、Bcrp 这 3 种外排转运蛋白的表达及活
性变化可直接影响药物在肠道环境中吸收情况 。据
[21]
文献报道，附子中的3种代表性乌头类生物碱（乌头碱、
Occludin 60 kDa 苯甲酰乌头碱、乌头原碱）可明显上调人结肠腺癌
LS174T 细胞、Caco-2 细胞以及 FVB 小鼠小肠组织中
P-gp、Mrp2和Bcrp的表达，其中除乌头原碱能明显降低
ZO-1 220 kDa 结肠段中 Bcrp 的 mRNA 表达水平，但对其蛋白影响不
显著之外，上述 3 种生物碱对其他外排转运蛋白及其
mRNA 的调控作用基本一致，并认为乌头类生物碱与
GAPDH 36 kDa P-gp、Mrp2、Bcrp 其他底物类药物联用时可能发生相互
作用 [22-24] 。本研究结果显示，不同剂量的附子水提取物
正常组 附子水提物 附子水提物 附子水提物
低剂量组 中剂量组 高剂量组 均可明显上调大鼠十二指肠组织中上述3种外排转运蛋
图 2 各组大鼠十二指肠组织中 Claudin-1、Occludin、
ZO-1蛋白电泳图 白，其中对 P-gp、Bcrp 蛋白表达水平的影响与其对应基
因的影响具有一致性，与附子中的3种代表性生物碱在
Fig 2 Electrophoresis of Claudin-1，Occludin and
不同生物样本上的影响总体上保持一致，因此推测附子
ZO-1 in duodenum of rats in each group
水提物与上述3种外排转运蛋白的其他底物类药物也可
表3 各组大鼠十二指肠组织中外排转运蛋白和紧密连
能发生相互作用。附子作为一种具有抗肿瘤活性的中
接蛋白对应基因的mRNA表达水平（x±±s，n＝8）
药，当与紫杉醇、阿霉素、长春新碱等同属于P-gp底物的
Tab 3 mRNA expression levels of efflux transporters
抗肿瘤药物 [25-26] 联合应用时，其对外排转运蛋白的上调
and tight junction proteins in duodenum of
作用可能导致上述药物血药浓度降低，从而降低上述药
rats in each group（x±±s，n＝8）
物的疗效。因此，当临床上将附子水提物与其他外排转
组别 P-gp Mrp2 Bcrp Claudin- 1 Occludin ZO-1 运蛋白底物类药物联用时应注意外排转运蛋白表达的
正常组 0.286±0.038 0.200±0.048 7.379±0.552 0.509±0.157 1.892±0.366 0.560±0.155
附子水提物低剂量组 0.363±0.043 # 0.249±0.057 14.259±4.615 # 0.584±0.103 2.031±0.481 0.658±0.440 变化，并可能需要相应增大临床给药剂量，但具体剂量
附子水提物中剂量组 0.444±0.087 # 0.269±0.168 12.653±4.138 1.545±0.709 # 1.958±0.169 0.660±0.317 调整情况还需临床研究进行验证。
#
附子水提物高剂量组 0.391±0.038 # 0.264±0.127 30.943±15.816 2.304±0.749 ## 2.288±0.592 0.660±0.206 紧密连接是许多非载体介导的水溶性成分的重要
#
##
注：与正常组比较，P＜0.05，P＜0.01 吸收途径之一，其上皮细胞吸收主要是通过旁细胞途
#
##
Note：vs. normal group，P＜0.05， P＜0.01
径，该结构十分致密，而上调 Claudin-1、Occludin、ZO-1
3.4 附子水提物对大鼠十二指肠组织中紧密连接蛋白
的表达可明显影响旁细胞途径对药物的吸收 。本研
[27]
对应基因mRNA表达的影响
究结果显示，附子水提取物可明显上调 Claudin-1、Oc-
与正常组比较，附子水提物中、高剂量组大鼠十二
cludin、ZO-1等紧密连接相关蛋白的表达，推测其与以细
指肠组织中 Claudin-1 的 mRNA 表达水平均显著升高，
胞旁路途径为主要转运通道的药物可能在吸收环节发
差异均有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）；其余基因的
生相互作用。例如，有研究报道，阿司匹林和水杨酸可
mRNA 表达水平差异均无统计学意义（P＞0.05）。各组 以通过破坏紧密连接蛋白、打开细胞间隙，从而增加三
大鼠十二指肠组织中紧密连接蛋白对应基因的 mRNA 七皂苷的吸收 ；化疗药物如西莫替尼可通过破坏紧密
[28]
表达水平检测结果见表3。 连接、打开细胞间隙来增加联用药物的吸收，从而提高
4 讨论 头孢克洛、瓦拉昔洛韦和阿昔洛韦的细胞旁路吸收 。
[7]
中药通常与其他中药或/和化学药物联合使用，因此 附子作为一种具有抗炎和抗肿瘤药理活性的中药，当与
不同中药之间或其与化学药物间可能发生相互作用，并 上述抗炎或抗肿瘤药物联用时，也应当注意其对配伍药
可能对临床治疗产生不同的影响 [19-20] 。外排转运蛋白和 物吸收的影响。本研究还发现，附子水提物对Claudin-1
紧密连接蛋白在口服药物吸收途径中均有很高的参与 的 mRNA 表达水平的显著上调作用与其对相应蛋白的
度 ，因此其表达水平的变化对研究药物间的相互作用 影响基本一致，但是对 Occludin、ZO-1 的 mRNA 表达水
[8]
十分重要。 平无显著上调作用，与其对相应蛋白的显著上调作用并
本研究考察了附子水提取物对大鼠十二指肠组织 不完全一致。这提示，附子水提物可能是通过促进上述
中外排转运蛋白P-gp、Mrp2、Bcrp和紧密连接蛋白Clau- 2种蛋白相应基因的mRNA翻译或者提高其蛋白的稳定
din-1、Occludin、ZO-1的蛋白及其对应基因表达的影响， 性，而不是通过促进其基因的转录来发挥作用。
旨在预测附子水提物与外排转运蛋白的其他相关底物 综上所述，附子水提物可从 mRNA 和/或蛋白水平
类药物，以及以旁细胞转运途径为主要吸收通路的药物 上调3种外排转运蛋白和3种紧密连接蛋白相应基因的

·2816 · China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 20 中国药房 2019年第30卷第20期