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显示，水石榴中总黄酮的平均含量为 2.71％（RSD＝                         得提取工艺稳定、可行。
        1.69％，n＝6），与预测值的相对误差为2.65％，提示所得                     参考文献
        最优工艺条件稳定、可靠。                                        [ 1 ]  张惠源，张志英.中国中药资源志要[M].北京：科学出版
        3 讨论                                                     社，1994：816.
            Plackett-Burman 试验设计是基于各因素间无交互                  [ 2 ]  陈子隽，陈勇，谢臻，等.风车子属植物研究概况[J].中国
        影响时，以优选因素主效应而进行的多因素高、低两个                                 民族民间医药，2017，26（24）：57-60.
                                                            [ 3 ]  吴晓鹏，陈光英，蒋才武.风车子属植物的化学成分及药
        水平的试验设计，主要用于因素较多且未确定的因素对
                                                                 理作用研究进展[J].海南师范大学学报（自然科学版），
        于响应变量有显著性影响的情况。但该试验设计不能
                                                                 2007，20（1）：63-68.
        区分主效应与交互作用的影响，仅能确定具有显著性影
                                                            [ 4 ]  蒋才武，高淑景，黄健军.壮药风车子叶化学成分研究[J].
                 [14]
        响的因素 。本研究通过 Plackett-Burman 试验发现，乙
                                                                 时珍国医国药，2011，22（5）：1146-1147.
        醇体积分数与料液比是影响水石榴中总黄酮含量的显                             [ 5 ]  刘兆花，王艳婷，刘寿柏，等.长毛风车子的化学成分研究
        著性因素。随后进行最陡爬坡试验以确定这两个因素                                  [J].天然产物研究与开发，2014，26（3）：348-350.
        的正、负效应，正效应即当增大因素水平时，总黄酮含量                           [ 6 ]  王洪石.崖县风车子的化学成分及药理活性研究[D].海
        由低变高，反之则为负效应。通过设计合理的步长、增                                 口：海南师范大学，2015.
        加试验的密集度，以逼近总黄酮含量最高值，确定2个显                           [ 7 ]  刘兆花.风车子树枝叶及臀果木枝叶的化学成分研究
        著性因素的最佳取值范围。                                             [D].青岛：青岛科技大学，2013.
            Box-Behnken响应面的拟合方程仅在考察指标紧接                     [ 8 ]  罗旭东，李成义，李旭，等.当归根、茎中总黄酮的提取工
        区域范围时才能充分反映近似真实情形，在其他区域                                  艺优化[J].中国药房，2018，29（3）：364-368.
        的拟合方程与近似函数方程几乎无相似之处，意义不                             [ 9 ]  李杰，罗建成，李慧星，等.响应面分析法优化西瓜番茄红
                                                                 素提取工艺条件[J].食品研究与开发，2017，38（10）：
        大 。因此，本研究在 Plackett-Burman 试验和最陡爬坡
          [15]
                                                                 53-58.
        试验的基础上结合 Box-Behnken 响应面法，对水石榴中
                                                            [10]  郑辉杰，李志强，刘伟，等.响应面法优化番茄红素提取工
        总黄酮的提取工艺进行优化，可提高试验的精度和预测
                                                                 艺研究[J].北方园艺，2009（2）：5-8.
        性 。
          [16]
                                                            [11]  董满良，董小萍，李鸿翔，等. Plackett-Burman 联用 Box-
            在测定总黄酮含量时，本课题组曾尝试以亚硝酸
                                                                 Behnken效应面与正交试验优化棘茎楤木总皂苷提取工
        钠-硝酸铝-氢氧化钠为显色体系进行显色，并在 400～                              艺及其比较研究[J].中国药房，2013，24（3）：227-230.
        800 nm 波长范围内进行全波长扫描，结果发现供试品溶                        [12]  汪彬彬，车振明. Plackett-Burman 和 Box-Benhnken De-
        液在500 nm波长处没有特征吸收。随后改用以三氯化                               sign 实验设计法优化华根霉产糖化酶发酵培养基的研
        铝法显色，结果发现供试品溶液在406 nm波长处有最大                              究[J].食品科技，2011，36（5）：41-45.
        吸收，且与对照品在410 nm波长处的吸收峰接近，故本                         [13]  徐东伟，王绍辉，刘同祥. Box-Behnken 响应面法优化通
        研究采用三氯化铝法显色。进一步对显色条件进行优                                  关藤总皂苷的超声提取工艺及其纯化工艺研究[J].中国
        化，如取供试品溶液 0.3 mL，分别考察加入不同剂量显                             药房，2016，27（25）：3535-3538.
        色剂（2、3、4、5、6 mL）、显色时间（5、10、15、20、25 min）、           [14]  吴伟，崔光华，星点设计-效应面优化法及其在药学中的
                                                                 应用[J].国外医学药学分册，2000，27（5）：296.
        显色温度（25、35、45、55、65 ℃）时的吸光度，结果发现当
                                                            [15]  程艳刚，谭金燕，叶文冲，等.基于Plackett-Burman设计和
        显色剂剂量为 5 mL、显色时间为 20 min、显色温度为
                                                                 Box-Behnken响应面法优化仙鹤草总黄酮超声提取工艺
        45 ℃时的吸光度最高。
                                                                 及其抗氧化抗肿瘤活性研究[J].中华中医药学刊，2018，
            本 研 究 所 得 最 优 提 取 工 艺 为 ：乙 醇 体 积 分 数
                                                                 36（10）：2414-2419.
        60％，料液比 1 ∶ 34（g/mL），提取次数 3 次，提取时间 60
                                                            [16]  史亚军，王媚，吴星，等. Plackett-Burman 设计与星点设
        min，提取温度 80 ℃。在此条件下，水石榴中总黄酮含                             计-效应面法优化珠子参皂苷磷脂复合物制备工艺[J].中
        量为2.71％。                                                 国药房，2015，26（4）：518-521.
            综上所述，本研究所建含量测定方法稳定性、重复                                       （收稿日期：2019-04-02  修回日期：2019-08-22）
        性均较好，可用于测定水石榴中总黄酮的含量；优化所                                                                 （编辑：陈 宏）










        ·2812  ·  China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 20                                中国药房    2019年第30卷第20期
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