Page 59 - 2019年10月第30卷第20期
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症临床治疗的一线用药 。DOX水溶性好，但长期使用                           司；透析袋（截留分子量：8 000～14 400 Da，美国 Sigma
                             [3]
        会导致多药耐药，而有研究表明，UA可抑制上述多药耐                           公司）；0.22 μm 微孔滤膜（天津市领航实验设备股份有
        药性，两药联用具有一定的协同作用 。                                  限公司）；甲醇、乙腈均为色谱纯，乙醇、三乙胺（TEA）、
                                       [4]
            Pluronic F127（PF127）是一种ABA型的三嵌段共聚               二甲基亚砜（DMSO）等其余试剂均为分析纯，水为纯化
        物，由聚环氧乙烷-聚环氧丙烷-聚环氧乙烷（PEO-PPO-                       水。
                 [5]
        PEO）构成 。在各种类型的 Pluronics 中，PF127 在生物                2 方法与结果
        医学领域中的应用最为广泛，其由PPO疏水性嵌段构成                           2.1 UA含量测定
        的内核可作为疏水性药物的微环境，PEO亲水性嵌段则                               采用HPLC法测定。
        可防止结合蛋白质的吸附和聚集 。聚乙二醇维生素E                            2.1.1  色谱条件 色谱柱：Dikma Diamonsil C 18 （250 mm×
                                     [6]
        琥珀酸酯（TPGS）具有两亲性，被美国 FDA 认定为安全                       4.6 mm，5 μm）；流动相：乙腈-0.5％磷酸水溶液（85 ∶ 15，
        的药用辅料，可作为增溶剂、增塑剂、乳化剂、稳定剂等                           V/V）；检测波长：210 nm；流速：1.0 mL/min；柱温：25 ℃；
        应用于药物制剂中        [7-8] ；此外，TPGS也可用于前体药物的             进样量：20 μL。
        合成，可与其他共聚物形成混合载体以提高药物的溶解                            2.1.2  溶液的配制      ①UA贮备液：精密称取UA对照品
        度、渗透性及稳定性，从而实现缓释、控释及靶向作用，                           4.01 mg，用乙醇溶解并定容至 10 mL 量瓶中，得质量浓
                         [9]
        以促进药物的吸收 。本研究将疏水性药物UA 包载于                           度为 401.00 μg/mL 的 UA 贮备液。②供试品溶液：精密
        PF127 和 TPGS 形成的混合胶束（TPGS-PF127）内核中，                称定处方量 UA 原料药，固定摩尔比的 PF127、TPGS 以
        初步尝试制备 UA/PF127/TPGS，并优化其制备处方工                      及一定量的 TPGS-DOX，用乙醇溶解，旋转蒸发挥去有
        艺 ；同时参考文献方法 ，在琥珀酰化 TPGS 的基础                         机溶剂，于室温真空干燥箱中静置过夜，得透明干燥的
           [10]
                               [11]
        上，利用其末端羧基与亲水性药物DOX上的氨基结合，                           含药薄膜。将上述薄膜用适量水进行水化，于适宜温度
        合成 TPGS-DOX；又将上述 TPGS-DOX 与 TPGS-PF127              水浴中以 700 r/min 搅拌 30 min，冷却至室温，即得 UA/
        作为共同载体，制备 UA/PF127/TPGS-DOX 混合纳米胶                   PF127/TPGS-DOX 混合纳米胶束供试品溶液。③阴性
        束，并对其进行表征以及体外释药行为考察，以期为该                            对照溶液：按“2.1.2②”项下方法制备不含 UA、DOX 的
        制剂的后续体内代谢研究奠定基础。                                    空白胶束溶液，即得阴性对照溶液。
        1 材料                                                2.1.3  专属性考察      分别取“2.1.2”项下 UA 贮备液、供
        1.1  仪器                                             试品溶液、阴性对照溶液各适量，按“2.1.1”项下色谱条
            e2695 型高效液相色谱（HPLC）仪（美国 Waters 公                件进样分析，记录色谱图，详见图 1。结果显示，在该色
        司）；R-205B型旋转蒸发仪、W202B型恒温水浴锅（上海                      谱条件下，UA 峰形较好，保留时间约为 14.9 min；DOX
        申胜生物技术有限公司）；TGL-16C型离心机（上海安亭                        在此波长下无吸收，TPGS、PF127 等对 UA 的测定无干
        科学仪器厂）；HJ-6A型数显恒温磁力搅拌器（金坛市荣                         扰，表明本方法专属性良好。
        华仪器制造有限公司）；BT25S型分析天平（德国Sartori-                     0.060             UA    0.016            UA
                                                                                     0.012
        us公司）；UV9100型紫外-可见分光光度计（北京莱伯泰                        AU  0.040              AU  0.008
                                                             0.020
                                                                                     0.004
        科仪器股份有限公司）；470 型傅里叶红外变换光谱仪                             0                       0
                                                                0  2  4  6  8 10 12 14 16 18 20  0  2 4  6  8 10 12 14 16 18 20
        （美国Nicolet公司）；400型核磁共振光谱仪（美国Bruker                               t，min                  t，min
                                                                       A. UA贮备液              B. 供试品溶液
        公司）；JEM-2100型透射电子显微镜（日本JEOL公司）；
                                                                         0.016
        Zetasizer Nano-ZS90 型纳米粒度及 Zeta 电位分析仪（英                          0.012
                                                                         AU  0.008
        国Malvern公司）。                                                     0.004 0
        1.2 药品与试剂                                                           0  2  4  6  8 10 12 14 16 18 20
                                                                                    t，min
            UA对照品（长沙麓园生物科技有限公司，批号：LY-                                            C. 阴性对照溶液
        UA-20141218012，纯度：≥98％）；UA 原料药（南京道斯                        图1 高效液相色谱图（UA定量分析）
        夫生物科技有限公司，批号：141202R，纯度：＞98％）；盐                     Fig 1 HPLC chromatograms（UA quantitative analy-
        酸多柔比星对照品（DOX·HCl，北京华奉联博化学材料                               sis）
        有限公司，批号：HF150728，纯度：＞98％）；PF127（德国                  2.1.4  线性关系考察       分别取“2.1.2①”项下UA贮备液
        BASF公司，批号：140215）；TPGS（上海阿拉丁生化科技                    适量，用乙醇稀释，制得质量浓度分别为 40.10、100.25、
        股份有限公司，批号：T110277）；琥珀酸酐（SA）（国药集                     200.50、300.75、401.00 μ g/mL 的系列对照品溶液，按
        团化学试剂有限公司，批号：20150128）；二环己基碳二                      “2.1.1”项下色谱条件进样分析，记录色谱图。以待测物
        亚胺（DCC，批号：Z23A6Y9）、N-羟基琥珀酰亚胺（NHS，                   质量浓度为横坐标（c，μg/mL）、其峰面积为纵坐标（A）进
        批号：Z31A8N42796）均购自上海源叶生物科技有限公                       行线性回归，得线性回归方程为 A＝6 127.2c－99 354


        ·2790  ·  China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 20                                中国药房    2019年第30卷第20期
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