Page 48 - 2019年10月第30卷第20期
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一恒科学仪器有限公司）；HZS-HA型水浴振荡器（哈尔                        2.3.5  专属性试验       取对照品溶液、供试品溶液、阴性
        滨市东联电子技术开发有限公司）。                                   对照溶液各适量，按“2.3.1”项下色谱条件进样分析，记
        1.2 药品与试剂                                          录色谱图。结果，香叶木苷的保留时间约为 8.7 min，阴
            香叶木苷原料药（本实验室自制，纯度：≥90％）；香                      性对照溶液在相同保留时间处未见干扰，表明本法专属
        叶木苷对照品（批号：039H0692，纯度：≥99.5％）、透析                   性好，详见图1。
        袋（截留分子量：8 000～14 000 Da，批号：20100103012）
                                                             0.08              1     0.04
        均购自美国Sigma公司；卡波姆940（北京市海淀会友精                         V  0.04                V  0.02
        细化工厂，批号：090305）；白凡士林（南昌白云药业有限                        U，                     U，                 1
                                                               0                      0
        公司）；硬脂酸、液体石蜡（天津市天力化学试剂有限公
                                                                0  2.5  5.0  7.5  10.0  0  2.5  5.0  7.5  10.0
        司）；单硬脂酸甘油酯（天津市大茂化学试剂厂）；尼泊金                                     t，min                   t，min
                                                                    A.对照品溶液                 B.供试品溶液
        乙酯（安徽山河药用辅料股份有限公司）；司盘 80（天津
        市博迪化工有限公司）；聚山梨酯80（天津百世化工有限                                       0.04
        公司）；甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯，水为纯                                         V  U，  0.02
        化水。
                                                                           0
        2 方法与结果                                                             0  2.5  5.0  7.5  10.0
                                                                                   t，min
        2.1 香叶木苷凝胶剂的制备                                                          C.阴性对照溶液
            称取卡波姆 940 0.5 g，均匀撒入适量水中，使其充                       注：1.香叶木苷
        分溶胀；称取香叶木苷原料药 10 g 溶解于乙醇 15 mL                         Note：1. diosmin
        中，随后加入丙三醇 10 g、对羟基苯甲酸乙酯 0.05 g，混                                  图1   高效液相色谱图
        匀，加至溶胀的卡波姆940中搅拌均匀；用三乙醇胺调节                                    Fig 1 HPLC chromatograms
        pH 至 6，加水至 100 g，搅拌均匀，即得（每 100 g 凝胶剂               2.3.6  标准曲线的绘制         精密量取“2.3.2”项下对照品
                             [8]
        含香叶木苷原料药10 g） 。                                    溶液1、2、4、6、8、10 mL，分别置于10 mL量瓶中，加甲醇
        2.2  香叶木苷软膏剂的制备                                    定容，摇匀，制得质量浓度分别为 10、20、40、60、80、100
            称取香叶木苷原料药 10 g，充分溶解于水中，加入                      µg/mL 的系列标准溶液，按“2.3.1”项下色谱条件进样
        丙三醇10 g作为水相，加热至85 ℃；取白凡士林3 g、硬                     分析，记录峰面积。以待测物质量浓度（x，µg/mL）为横
        脂酸 5 g、液体石蜡 10 g 和单硬脂酸甘油酯 4 g，作为油                  坐标、峰面积（y）为纵坐标进行线性回归，得标准曲线方
        相，再加入防腐剂尼泊金乙酯 0.2 g，加热至 85 ℃；将水                    程为 y＝346 187x－96.501（R ＝0.999 4），表明香叶木苷
                                                                                    2
        相滴加至油相中，充分搅拌均匀。另取司盘80 1 g和聚                        检测质量浓度的线性范围为10～100 µg/mL。
        山梨酯 80 4 g，混匀，加热至 85 ℃，作为乳化剂，将乳化                   2.3.7  定量限与检测限的考察            取“2.3.2”项下对照品
        剂加至上述水相和油相混合物中，搅拌均匀，冷却，凝                           溶液适量，用甲醇倍比稀释，按“2.3.1”项下色谱条件进
                                                  [9]
        固，即得（每100 g软膏剂含香叶木苷原料药10 g） 。                      样分析，以信噪比 10 ∶ 1、3 ∶ 1 分别计算定量限、检测
        2.3  香叶木苷含量的测定                                     限。结果，香叶木苷的定量限为 4 µg/mL，检测限为 1.5
        2.3.1  色谱条件     色谱柱：Topsil C18 （250 mm×4.6 mm，     µg/mL。
        5 μm）；流动相：甲醇-0.2％磷酸水溶液（47 ∶ 53，V/V）；流              2.3.8  精密度试验 取“2.3.6”项下质量浓度为60 µg/mL
        速：1.0 mL/min；检测波长：275 nm；柱温：30 ℃；进样量：              的标准溶液，按“2.3.1”项下色谱条件重复进样6次，记录
        10 µL。                                             峰面积。结果，香叶木苷峰面积的 RSD 为 0.38％（n＝
        2.3.2  对照品溶液的制备          精密称取香叶木苷对照品               6），表明仪器精密度良好。
        0.005 0 g，置于 50 mL 量瓶中，加甲醇溶解并定容，即得                 2.3.9  稳定性试验       取“2.3.3”项下供试品溶液适量，分
        质量浓度为0.1 mg/mL的对照品溶液。                              别于室温放置0、2、4、8、12、24 h时按“2.3.1”项下色谱条
        2.3.3  供试品溶液的制备         按“2.1”项下方法制备香叶             件进样分析，记录峰面积。结果，香叶木苷峰面积的
        木苷凝胶剂后，精密称取 0.080 0 g，置于 25 mL 量瓶中，                RSD为0.40％（n＝6），表明供试品溶液在24 h内稳定性
        加甲醇溶解并定容，超声（功率：500 W，频率：59 kHz，下                   良好。
        同）处理 20 min。精密量取上述溶液 5 mL，置于 25 mL                 2.3.10  重复性试验       取“2.1”项下同一批次凝胶剂，共
        量瓶中，加甲醇溶解并定容，超声处理 20 min，经 0.45                    6份，按“2.3.3”项下方法制备供试品溶液，再按“2.3.1”项
        µm微孔滤膜滤过后，即得供试品溶液。                                 下色谱条件进样分析，记录峰面积。以香叶木苷对照品
        2.3.4  阴性对照溶液的制备          按“2.1”项下方法制备缺            为外标物、采用外标法计算样品含量。结果，香叶木苷
        香叶木苷原料药的空白凝胶剂，再按“2.3.3”项下方法操                       的平均含量（质量百分比）为 8.58％，RSD 为 0.80％（n＝
        作，即得阴性对照溶液。                                        6），表明本法重复性良好。


        中国药房    2019年第30卷第20期                                            China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 20  ·2779  ·
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