Page 38 - 2019年10月第30卷第19期

匀，制成质量浓度为 0.123 mg/mL 的梓醇对照品溶液和 70 桃叶珊瑚苷A
质量浓度为0.108 mg/mL的桃叶珊瑚苷对照品溶液。 60
50
2.3 供试品溶液的制备 mAU 40
30
精密称量根、茎、叶、花等部位样品粉末各 0.5 g，置 20
10
于具塞锥形瓶中，精密加入40％甲醇5 mL，摇匀并称定 0
-10
质量，超声处理（功率：250 W，频率：35 kHz）30 min，静 0 10 20 30 40
t，min
置 5 min，用 40％甲醇补足减失的质量，吸取溶液，用 A.桃叶珊瑚苷对照品
0.45 µm的微孔滤膜滤过，即得。
100
2.4 梓醇和桃叶珊瑚苷测定的色谱条件
80
梓醇测定条件：色谱柱为 Agilent TC-C18（250 mm× mAU 60
4.6 mm，5 µm）；流动相为甲醇-0.1％磷酸溶液（1 ∶ 99， 40 桃叶珊瑚苷A
20
V/V）；检测波长为 210 nm；流速为 1 mL/min；进样量为 0
20 µL；柱温为35 ℃。 0 10 20 30 40
t，min
桃叶珊瑚苷测定条件：色谱柱为 SPHERI-5RP-C18 B.野生化血丹根样品
（250 mm×4.6 mm，5 µm）；流动相为乙腈-水（3 ∶ 97， 图2 桃叶珊瑚苷对照品及野生化血丹根样品的HPLC
V/V）；检测波长为 205 nm；流速为 1 mL/min；进样量为 图
20 µL；柱温为25 ℃。 Fig 2 HPLC chromatograms of aucubin reference
2.5 系统适用性试验 and the root of wild C. grandiflora
分别精密吸取两种对照品溶液和根、叶的供试品溶 照品溶液和桃叶珊瑚苷质量浓度为 0.000 36、0.003 6、
液，按“2.4”项下色谱条件分别进样测定，记录色谱图。 0.036、0.072、0.108、0.144、0.180、0.216 mg/mL 的系列对
结果发现，根、叶供试品中待测成分梓醇、桃叶珊瑚苷的 照品溶液。在“2.4”项色谱条件下进样测定，记录峰面
峰面积适中，与其他成分可达到基线分离，分离度均大
积。以对照品溶液质量浓度为横坐标（x），峰面积为纵
于 2.0；且梓醇理论板数不低于 9 000、桃叶珊瑚苷理论 坐标（y）绘制标准曲线，得到梓醇、桃叶珊瑚苷的回归方
板数不低于 5 000，分离效果良好。典型色谱图见图 1、 程分别为 y＝7 097 432.24x+3 001.34（r＝0.999 9）和 y＝
图2。
16 899 435.83x+1 356.56（r＝0.999 9），表明梓醇、桃叶珊
30 梓醇 瑚苷在进样质量浓度分别为 0.061 5～3.321、0.000 36～
20 0.216 mg/mL范围内与其峰面积线性关系良好。
mAU 2.7 检测限试验
10
取梓醇和桃叶珊瑚苷对照品，按“2.2”项下制备成对
0
照品溶液后，按“2.4”项下色谱条件进样测定，以信噪比
0 10 20 30 40
t，min 为3计，梓醇和桃叶珊瑚苷的检测限分别为0.016 μg/mL
A.梓醇对照品
和0.007 μg/mL。
2.8 定量限试验
400
300 梓醇 取梓醇和桃叶珊瑚苷对照品，按“2.2”项下方法制备
mAU 200 成对照品溶液后，按“2.4”项下色谱条件进样测定，以信
100 噪比为 10 计，梓醇和桃叶珊瑚苷的定量限分别为 0.052
0 μg/mL和0.023 μg/mL。
0 10 20 30 40
t，min 2.9 精密度试验
B.野生化血丹叶样品
精密吸取“2.2”项下两种对照品溶液各 20 µL，分别
图1 梓醇对照品及野生化血丹叶样品HPLC图 按“2.4”项下色谱条件进样测定，连续进样 6 次，记录峰
Fig 1 HPLC chromatograms of catalpol reference 面积。结果，梓醇、桃叶珊瑚苷峰面积的 RSD 分别为
and the leaves of wild C. grandiflora 0.68％、0.63％（n＝6），表明仪器具有良好进样精密度。
2.6 线性关系考察 2.10 稳定性试验
分别制备梓醇质量浓度为 0.061 5、0.092 25、0.123、 取野生化血丹根供试品溶液，分别在放置0、2、4、8、
0.153 75、0.184 5、0.553 5、1.107、3.321 mg/mL 的系列对 12、24 h 后，按“2.4”项下色谱条件进样测定，记录峰面

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