Page 66 - 2019年9月第30卷第18期
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目前,药用石斛属植物共有 40 多种,其中金钗石斛                      纯,水为超纯水。
        和铁皮石斛备受关注 。2015年版《中国药典》(一部)收                       1.3 药材
                          [7]
        录了金钗石斛(Dendrobium nobile Lindl.)和铁皮石斛                  金钗石斛、铁皮石斛饮片由重庆市渝和堂药业有限
       (Dendrobium officinale Kimura et Migo),两者均具有益       公司提供,均产自云南,批号均为 20170801。两者经质
        胃生津、滋阴清热之功效 。石斛性甘、微寒,归肺、胃、肾                        检全部符合2015年版《中国药典》(一部、四部)“中药材
                            [8]
        经,为常用贵重药材,药用历史悠久,《神农本草经》将其                         与饮片”项下石斛和铁皮石斛的性状、鉴别及含量测定
        列为上品,可用于热病津伤、口干烦渴、胃阴不足和阴虚                          有关规定,以及“中药其他方法”项下浸出物测定、杂质
                            [9]
        火旺等多种病症的治疗 。现代药理学研究表明,石斛                           检查、灰分测定、二氧化硫残留量测定等有关规定。
        具有护肝、抗胃溃疡、降血糖、提高免疫力等作用                     [10-11] 。  2 双斛胶囊的总多糖含量测定
        上述药用历史和药理学成果均佐证了石斛可对ALD发                           2.1 溶液的制备
        挥治疗作用。金钗石斛和铁皮石斛的主要活性指标成                            2.1.1  对照品溶液       取葡萄糖对照品适量,精密称定,
                        [12]
        分为生物碱和多糖 ,石斛生物碱可缓解高脂血症大鼠                           加水制成质量浓度为 0.207 0 mg/mL 的对照品母液;取
        肝脏脂肪变性等症状         [13-14] ,而石斛多糖则在调节受酒精            该母液,以水逐级稀释成相应质量浓度的对照品溶液,
        影响的肝功能和脂质代谢等方面发挥着重要作用                      [15-16] ,  备用。
        这两类成分均对肝脏有一定的保护和调节作用,其药理                           2.1.2  供试品溶液       称取金钗石斛和铁皮石斛粗粉混
        作用既存在差异又相互关联,从现代药理学角度推测两                           合物(按质量比1∶1混匀,过30目筛,以下同)8 g,置于圆
        者配伍可能会发挥协同功效。                                      底烧瓶中,按前期研究筛选的最佳醇提工艺提取总生物
                                                           碱(以下同)。取醇提后的药渣,加水回流提取(具体参
            基于中医辨证论治的整体观,不局限于某一客观指
                                                           数见本文后续正交试验优选水提取工艺),放冷,用少量
        标的改变,本课题组以金钗石斛和铁皮石斛的优势成分
                                                           水分次洗涤容器并用纱布过滤水提液和洗液;合并滤
        总生物碱和总多糖作为活性成分,通过现代提取和制剂
                                                           液,置于2 000 mL量瓶中,加水定容,摇匀;以3 500 r/min
        手段,制成一种对亚急性 ALD 具有改善作用的双斛胶
                                                           离心 15 min,移取上清液 1 mL,加入 5 倍体积的 80%乙
        囊。该制剂根据2015年版《中国药典》(一部)中成人日
                                                           醇,于4 ℃冷藏1 h后,再于4 ℃下以3 500 r/min离心15
              [8]
        服用量 ,将金钗石斛和铁皮石斛的用量均以 4 g(两种
                                                           min;取沉淀,用4倍体积的80%乙醇继续洗涤,以3 500
        药材质量比为 1 ∶ 1)进行配伍后提取制得。其提取工艺
                                                           r/min 离心 15 min,弃去上清液,重复操作 2 次;取沉淀,
        主要分为两个步骤:首先对金钗石斛和铁皮石斛的混合
                                                           加少量热水溶解,放冷,再加水定容至 10 mL,摇匀,
        物进行醇提取获得总生物碱成分,再将药渣进行水提取
                                                           即得。
        获得总多糖成分。本课题组前期已完成双斛胶囊总生
                                                           2.2  检测波长的选择
        物碱的醇提取工艺的优化(另文刊出),现以总多糖含量
                                                               取“2.1”项下制备的对照品溶液(0.124 2 mg/mL)和
        和干膏得率为指标,采用正交设计优化双斛胶囊总多糖
                                                           供试品溶液,采用硫酸-苯酚法            [8,17] 进行显色反应:向对照
        的水提取工艺,为该制剂的深入开发提供依据和参考。
                                                           品溶液或供试品溶液中加入 5%苯酚溶液 0.5 mL(临用
        1 材料
                                                           时配制),摇匀,再精密加入浓硫酸2.5 mL,摇匀;室温放
        1.1  仪器                                            置 5 min 后,置沸水浴中加热 20 min 进行显色反应,取
            BT125D 型十万分之一电子分析天平[赛多利斯科                      出,置于冰水浴中降温 5 min 终止反应。以水为空白溶
        学仪器(北京)有限公司];FA2004N型电子天平(上海菁                      剂对照,采用紫外分光光度计在 400~600 nm 波长范围
        海仪器有限公司);TU-1900型紫外-分光光度计(北京普                      内进行光谱扫描。结果,两种溶液均在488 nm波长处有
        析通用仪器有限公司);AXTGL16M型高速冷冻离心机                        最大吸收峰,故选择488 nm作为测定波长,详见图1。
       (盐城市安信试验仪器有限公司);HH-6 型数显恒温水                         2.3 方法学考察
        浴锅(上海上登实验设备有限公司);FW135型中药材粉                        2.3.1  显色稳定性考察         称取金钗石斛和铁皮石斛粗
        碎机(天津泰斯特仪器有限公司);XH-B 型旋涡混合器                        粉混合物 8 g,平行 3 份,提取总生物碱后取药渣,按
       (姜堰市康健医疗器具有限公司);BCD-579WE 型冰箱                      “2.1.2”项下方法制备供试品溶液,再按“2.2”项下硫酸-
       (青岛海尔股份有限公司)。                                       苯酚法“加入 5%苯酚溶液 0.5 mL……置于冰水浴中降
        1.2 药品与试剂                                          温 5 min 终止反应”步骤处理,分别于处理完毕后第 0、
            葡萄糖对照品(中国食品药品检定研究院,批号:                         30、60、120、240 min 时,在 488 nm 波长处测定吸光度。
        0833-9501,纯度:100.0%);无水乙醇(成都金山化学试                  结果显示,不同时间点样品吸光度的RSD为0.49%(n=
        剂有限公司);浓硫酸(国药集团化学试剂有限公司);苯                         5),表明供试品溶液在显色后的240 min内稳定。
        酚(上海阿拉丁生化股份有限公司);其余试剂均为分析                          2.3.2  线性关系考察        精密量取“2.1.1”项下对照品母


        中国药房    2019年第30卷第18期                                            China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 18  ·2509  ·
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