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限公司）。                                               度值的RSD为0.96％（n＝6），表明仪器精密度良好。
        1.2 药品与试剂                                           2.2.5  重复性试验      取无水茶碱原料药适量，按“2.2.1”
            市售茶碱缓释片（参比制剂，白云山光华制药有限                          项下方法制备溶液（7 μg/mL），平行6份，在272 nm波长
        公司，批号：H44020002，规格：0.1 g/片）；无水茶碱对照                  处测定吸光度，并按标准曲线法计算样品含量。结果，
        品（中国食品药品检定研究院，批号：100121-201805，纯                    茶碱含量的 RSD 为 1.82％（n＝6），表明方法重复性
        度：99％）；乳糖（天津市大茂化学试剂厂）；无水茶碱原                         良好。
        料药（批号：157744，纯度：99％）、微晶纤维素、羟丙基甲                     2.2.6  稳定性试验      取无水茶碱原料药适量，按“2.2.1”
        基纤维素（HPMC）K4M、HPMC K100M（上海阿拉丁生                     项下方法制备溶液（7 μg/mL），于常温、避光的条件下分
        物科技有限公司）；磷酸氢钙、微粉硅胶（本溪普智医药                           别放置 0、1、2、3、4 h 时，在 272 nm 波长处测定吸光度。
        科技有限公司）；其余试剂均为分析纯，水为去离子水。                           结果，吸光度值的 RSD 为 0.83％（n＝5），表明对照品溶
        2 方法与结果                                             液在上述条件下4 h内稳定性良好。
        2.1 自制缓释片的制备                                        2.3  自制缓释片的累积释放度测定及与参比制剂的相
            拟定自制缓释片的片质量为200 mg，采用湿法制粒                       似因子计算
        法制备。取无水茶碱原料药，过80目筛，取20 g，按相应                            按照2015年版《中国药典》（四部）通则0931第二法
                                                                  [7]
        处方比例加入黏合剂（HPMC K4M、HPMC K100M）和                    （浆法） 测定自制缓释片的累积释放度。以水 900 mL
        相应稀释剂（乳糖/微晶纤维素/磷酸氢钙），采用等量递                          为溶出介质，设置转速为50 r/min、温度为37 ℃，分别于
        加法混合均匀；加入 80％乙醇 20 mL 制备软材，过 20 目                   0.5、1、2、4、6、8、12 h时取溶出液5 mL，并及时补加等温
        筛制粒；于 60 ℃烘干，过 16 目筛整粒，加入 1％微粉硅                     度、等体积溶出介质。取样液经 0.22 μm 微孔滤膜滤过
        胶，混匀；采用单冲压片机以6 t的压力进行压片，即得。                         后，分别精密量取滤液 4、4、2、1.5、1.5、1、1 mL 置于 10
        2.2  茶碱的含量测定                                        mL量瓶中，加水稀释并定容。按“2.2”项下紫外-可见分
            参照 2015 年版《中国药典》（四部）通则 0401“紫外-                 光光度法，以水为空白对照，在272 nm波长处分别测定
        可见分光光度法”测定茶碱含量。                                     上述稀释溶液的吸光度，根据“2.2.2”项下回归方程计算
                       [7]
        2.2.1  检测波长的选择         精密称取干燥至恒质量的无                 其各时间点累积释放度：累积释放度＝[（吸光度值－
        水茶碱对照品 7 mg，加水配制成 7 μg/mL 的对照品溶                     0.01）×溶液体积/0.049]×100％。
        液，采用紫外-可见分光光度计在200～400 nm波长范围                           根据释放度测定结果计算自制缓释片与参比制剂
        内扫描，结果在272 nm波长处有最大吸收；同法测定其                                                              1
                                                            释放曲线的相似因子（f2）：f2＝50×lg{[1+ ∑t＝1 （Rt－
                                                                                                     n
        余辅料，结果在272 nm波长下均无吸收。因此，本研究                                                              n
                                                              2 －0.5
        选择272 nm为茶碱的检测波长。                                   Tt ）]  ×100}，其中，n为时间点个数，t为具体时间点，Rt
        2.2.2  线性关系考察        精密称取干燥至恒质量的无水                  为某个时间点时自制缓释片累积释放度，Tt为某个时间
        茶碱对照品 16 mg，加水配制成 160 μg/mL 的对照品贮                   点时参比制剂累积释放度。
        备液；精密吸取该贮备液，加水稀释制成质量浓度分别                            2.4  自制缓释片处方工艺筛选
        为1、2、4、8、10、16 μg/mL的系列线性对照品溶液，分别在                  2.4.1 CPPs 的确定     综合考虑所有当前试验条件下可
        272 nm波长处测定吸光度。以茶碱质量浓度（c，μg/mL）                     控的、可能造成影响的变量，通过查询相关文献                    [8-10] 和预
        为横坐标、吸光度（A）为纵坐标进行线性回归，得回归方                          试验评估各变量风险，最终确定CPPs，详见表1。
        程为A＝0.049c+0.001（R ＝0.999 9）。结果表明，茶碱检               2.4.2  自制缓释片处方工艺的筛选              保持低风险因素
                             2
        测质量浓度的线性范围为1～16 μg/mL。                              不变，即设置试验温度为 25 ℃、湿度为 50％，采用适量
        2.2.3  检测限和定量限考察           精密称取乳糖、微晶纤维              微粉硅胶作为润滑剂，按原料药占比为50％（即质量比，
        素、磷酸氢钙各 3 000 mg，HPMC K4M、HPMC K100M                下同）进行制片。从表 1 中选择风险度高的 1 个定性变
        各 500 mg，加水配制成 1 000 mL 溶液，再以水稀释 100                量（稀释剂种类）和 3 个定量变量[片径、黏合剂性质（即
        倍，制得空白辅料溶液，在272 nm波长处测定吸光度，记                        HPMC K4M 和 HPMC K100M 不同配比）、黏合剂用量
        录噪音波动范围。另取无水茶碱对照品 1 g，以空白辅                         （即每片中 2 种 HPMC 总量）]为 CPPs，考察其对自制缓
        料溶液 1 000 mL 溶解并梯度稀释，在 272 nm 波长处测                  释片体外释放行为的影响。以上述 4 个 CPPs 为自变量
        定吸光度，分别以3、10倍噪音值对应的药物质量浓度作                          [稀释剂种类（X1 ）、片径（X2 ）、HPMC K4M 占 2 种 HPMC
        为检测限和定量限。结果显示，茶碱的检测限和定量限                            总量比例（简称为“HPMC K4M 比例”，X3 ）、HPMC 总量
        分别为15、50 ng/mL。                                    （X4 ）]，以自制缓释片和参比制剂的相似因子（Y1，本研究
        2.2.4  精密度试验      取“2.2.1”项下7 μg/mL的对照品溶            为仿制药研发，故优先考虑相似因子）以及自制缓释片
        液，在 272 nm 波长处连续测定 6 次吸光度。结果，吸光                     在2、4、6、12 h时的累积释放度（分别为Y2、Y3、Y4、Y5 ）这5


        ·2504  ·  China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 18                                中国药房    2019年第30卷第18期
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