Page 107 - 2019年9月第30卷第18期

BC影响不显著。 表5 不同提取方法平均总提取率比较
2.4.3 响应面分析 采用Design-Expert 8.06软件，以提 Tab 5 Comparison of average total extraction rates of
取时间（A）、物料粒度（B）、料液比（C）为考察因素，以总 different extraction methods
提取率为响应值，绘制响应面和等高线图，详见图4。由 提取方法 提取时间，min 平均总提取率，mg/g
图 4 可知，因素 A 与 C 交互作用较为显著，因素 A 与 B、 电磁裂解法 2.50 8.42
超声法 93.00 8.34
因素B与C交互作用不显著。 煎煮法 35.00 8.06
总提取率，mg/g
100.00
8.5 柴胡水提液中柴胡皂苷 a 和柴胡皂苷 d 的含量，该方法
mg/g 8.0 92.00 精密度、稳定性、重复性均较好，可用于同时测定柴胡水
总提取率， 7.5 目 84.00 提液中柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的含量。采用单因素试
7.0
6.5
6.0 B， 76.00 验对影响柴胡皂苷 a 和柴胡皂苷 d 提取的 4 个因素即提
68.00
100.00 3.00 取次数、提取时间、物料粒度、料液比进行优化。综合考
92.00
84.00 2.00 2.50 60.00
B 76.00 1.50 A 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 虑单因素试验结果及节能、省时、经济等因素，确定提取
68.00
60.00 1.00 A，min
A. A-B响应面图 B. A-B等高线图 次数为 1 次，仅对其余 3 个因素通过 Box-Behnken 响应
总提取率，mg/g
1∶40 面法进行优化，得到最优提取工艺为提取时间2.50 min、
8.5
mg/g 8.0 1∶35 过80目筛、料液比1∶28（g/mL）。验证试验得总提取率为
总提取率， 7.0 g/mL 1∶30 8.42 mg/g。与超声法和煎煮法相比，电磁裂解法提取的
7.5
6.5
6.0
5.5 C， 1∶25 总提取率最高，提取时间最短。
柴胡皂苷a和柴胡皂苷d属于柴胡药材中的原生皂
1∶35 3.00
1∶30 2.50 1∶20 苷类成分，其结构不稳定，在煎煮过程中分别易降解为
1∶25 2.00 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00
C 1∶20 1.50 A
1∶15 1.00 A，min [20-21] 。而电磁裂解提取可有效
柴胡皂苷b1和柴胡皂苷b2
C. A-C响应面图 D. A-C等高线图
避免柴胡皂苷a和柴胡皂苷d受热分解，其高效、节能等
总提取率，mg/g
1∶35
8.5 特点可为柴胡的工业化提取提供新思路，并为其合理应
mg/g 7.5 8 1∶30 用及开发提供参考。
总提取率， 6.5 7 6 g/mL C， 1∶25 综上所述，本研究所建含量测定方法简便、准确，可
5.5
1∶20 用于同时测定柴胡水提液中柴胡皂苷 a、柴胡皂苷 d 的
1∶35 100.00
92.00
1∶30 84.00 1∶15 含量；所得优化工艺稳定、可行。
1∶25 76.00 60.00 68.00 76.00 84.00 92.00 100.00
C 1∶20 68.00 B
1∶15 60.00 参考文献
B，目
E. B-C响应面图 F. B-C等高线图 [ 1 ] CHAO Z，ZENG W，LIAO J，et al. DNA barcoding Chi-
图4 各因素对总提取率影响的响应面和等高线图 nese Medicinal Bupleurum[J]. Phytomedicine，2014，21
Fig 4 Response surface and contour plots of the ef- （13）：1767-1773.
fects of each factor on total extraction rate [ 2 ] KANG SJ，LEE YJ，KIM BM，et al. Effect of bupleuri ra-
2.4.4 最优提取条件的确定及验证试验 基于 De- dix extracts on the toxicity of 5-fluorouracil in HepG2
sign-Expert 8.06软件优化得到最佳提取工艺为提取时间 hepatoma cells and normal human lymphocytes[J]. Basic
2.31 min、物料粒度过80.99目筛、料液比1∶28.27（g/mL）， Clin Pharmacol Toxicol，2010，103（4）：305-313.
总提取率预测值为8.48 mg/g。考虑到试验的可操作性， [ 3 ] 黄幼异，黄伟，孙蓉.柴胡皂苷对肝脏的药理毒理作用研
最终最优提取工艺确定为提取时间 2.50 min、过 80 目 究进展[J].中国实验方剂学杂志，2011，17（17）：298-301.
[ 4 ] SUN P，LI Y，WEI S，et al. Pharmacological effects and
筛、料液比 1 ∶ 28（g/mL）。3 次验证试验结果显示，在此
chemical constituents of bupleurum[J]. Mini Rev Med
工艺条件下，平均总提取率为 8.42 mg/g（RSD＝1.2％），
Chem，2019，19（1）：34-55.
预测值与实际值接近，表明模型优化的结果合理、可靠。
[ 5 ] WANG SB，DENG YQ，REN J，et al. Exogenous interleu-
2.5 不同提取方法的比较
kin-10 alleviates allergic inflammation but inhibits local
参考相关文献 [18-19] ，将上述最优提取工艺与超声法、
interleukin-10 expression in a mouse allergic rhinitis mod-
煎煮法进行比较，各方法均平行操作 3 次，结果见表 5。
el[J]. BMC Immunol，2014. DOI：10.1186/1471-2172-15-9.
由表5可见，电磁裂解法可明显缩短提取时间，且平均总 [ 6 ] ASHOUR ML，WINK M. Genus bupleurum：a review of
提取率最高。 its phytochemistry，pharmacology and modes of action[J].
3 讨论 J Pharm Pharmacol，2011，63（3）：305-321.
本研究采用 HPLC 法测定了以电磁裂解法提取的 [ 7 ] 杨志业，刘书芬，晁志，等. HPLC测定新疆柴胡属4种植

·2550 · China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 18 中国药房 2019年第30卷第18期