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柴胡始载于《神农本草经》,为伞形科植物柴胡(Bu- 子分析天平、AB135-S 型十万分之一电子分析天平(瑞
pleurum chinense DC.)或 狭 叶 柴 胡(Bupleurum scor- 士Mettler-Toledo公司)。
zonerifolium Willd.)的干燥根,被列为上品,是具有一种 1.2 药品与试剂
2 000多年药用历史的传统中药,具有和解退热、疏肝解 柴胡皂苷 a 对照品(批号:P03M9F50593,纯度:≥
郁、升举阳气之功效 [1-2] 。现代药理学研究表明,柴胡具 98%)、柴胡皂苷d对照品(批号:Z08A8L33357,纯度:≥
有抗炎、抗病毒、保肝、降血脂、免疫调节等作用 [3-5] ,临床 98%)均购自中国食品药品检定研究院;乙腈为色谱纯,
常用含柴胡的药物有柴胡口服液、柴胡注射液、柴胡片、 其他试剂均为分析纯,水为超纯水。
柴胡滴丸等。柴胡主要含皂苷类、黄酮类、多糖类、挥发 1.3 药材
油类等成分 [6-7] ,其中皂苷类成分是其药效物质基础之 柴胡饮片(批号:171101)购于酒泉市培丰中药材生
一,主要成分柴胡皂苷 a 和柴胡皂苷 d 也是柴胡含量测 态种植加工有限公司,经长春中医药大学药学院翁丽丽
定的指标性成分 [7-8] 。柴胡皂苷常用的提取方法有乙醇 教授鉴定为柴胡(B. chinense DC.)的干燥根。
回流法、煎煮法、浸渍法、超声法等,虽然这些方法在一 2 方法与结果
定程度上可满足提取要求,但存在能耗高、工艺繁琐、有 2.1 柴胡水提液中柴胡皂苷a、柴胡皂苷d的含量测定
效成分损失多等缺点 [9-11] 。电磁裂解提取法是一种新型 采用 HPLC 法测定柴胡水提液中柴胡皂苷 a、柴胡
的提取方法,具有提取时间短、提取效率高、提取产物 皂苷d的含量 。
[16]
活性强的优点,并可在常温下进行,避免了不稳定性成 2.1.1 色谱条件 色谱柱:SB-C18 (250 mm×4.6 mm,5
分受热分解 [12-15] 。基于此,本研究以水为提取溶剂,采用 μm);流动相:乙腈(A)-水(B),梯度洗脱(0~50 min,
电磁裂解仪(见图1)提取了柴胡中柴胡皂苷a和柴胡皂 25%A→90%A;50~55 min,90%A);柱温:40 ℃;流速:
[16]
苷 d;参考 2015 年版《中国药典》(一部)方法 采用高效 1.0 mL/min;检测波长:210 nm;进样量:10 μL。在该色
液相色谱法(HPLC)测定了柴胡水提液中柴胡皂苷 a 和 谱条件下,各成分分离度均大于2.5,理论板数以柴胡皂
柴胡皂苷 d 的含量;通过 Box-Behnken 响应面法优化其 苷 a、柴胡皂苷 d 计均不低于 35 000,阴性溶液对测定无
提取工艺,并与超声法和煎煮法进行比较,旨在为柴胡 干扰,详见图2。
皂苷 a 和柴胡皂苷 d 的提取提供一种新的方法,为制药 柴胡皂苷a 柴胡皂苷d
75
工业生产中绿色环保、节能减耗提取设备的研发提供
50
参考。 mAU
2 3 25
1
0
14 16 18 20 22 24
t,min
A.混合对照品溶液
柴胡皂苷a
60
柴胡皂苷d
40
mAU
20
0
14 16 18 20 22 24
7 6 5 4
t,min
注:1、3、4、6.阀门;2.电场处理器;5.粉碎机;7.可变速度循环泵 B.供试品溶液
75
Note:1,3,4,6. valve;2. electric field processor;5. grinder;7.
variable speed circulation pump 50
图1 电磁裂解仪 mAU
25
Fig 1 Electromagnetic cracking equipment
0
1 材料 14 16 18 20 22 24
t,min
1.1 仪器 C.阴性溶液
1260 型 HPLC 仪,包括四元梯度泵、可变波长扫描 图2 高效液相色谱图
紫外检测器、自动进样器、色谱工作站(美国 Agilent 公 Fig 2 HPLC chromatograms
司);KQ5200DE型超声波清洗器(昆山美美超声仪器有 2.1.2 混合对照品溶液的制备 取柴胡皂苷 a 对照品、
限公司);电磁裂解仪(长春中医药大学中药药剂实验室 柴胡皂苷d对照品各适量,精密称定,置于同一25 mL量
自制,专利号:ZL201721353456.1);L-204型万分之一电 瓶中,加甲醇溶解并定容,制成柴胡皂苷 a、柴胡皂苷 d
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