Page 100 - 2019年9月第30卷第18期

足减失的质量，混匀，取提取液 2 mL，置于离心管中， 横坐标、吸光度（y）为纵坐标进行线性回归，得多糖回
以 4 000 r/min离心10 min，取上清液1.0 mL，置于50 mL 归方程为 y＝8.730 4x+0.026 2（r＝0.999 1），表明葡萄
量瓶中，加水定容，即得供试品溶液。 糖质量浓度在 0.007 75～0.151 mg/mL 范围内线性关系
2.1.2 对照品溶液的制备 精密称取经 105 ℃干燥至 良好。
恒定质量的葡萄糖对照品 7.55 mg，置于 50 mL 量瓶中， 2.1.6 定量限与检测限考察 取“2.1.2”项下对照品溶
加水溶解并定容，制成质量浓度为 0.151 mg/mL 的对照 液适量，按“2.1.4”项下方法显色后，于 490 nm 波长处
品溶液。 测定吸光度并计算标准偏差。以标准偏差与标准曲线
2.1.3 空白对照溶液 以水为空白对照溶液。 斜率之比的 10 倍对应的质量浓度作为定量限，以标准
2.1.4 检测波长的确定 精密吸取上述对照品溶液、供 偏差与标准曲线斜率之比的 3 倍对应的质量浓度作为
试品溶液各 2.0 mL，分别置于 10 mL 具塞试管中，加苯 检测限。结果，定量限为 2.854 μg/mL，检测限为 0.856
酚1.0 mL，混匀，加浓硫酸5.0 mL，摇匀后于室温下放置 μg/mL。

30 min，于 200～800 nm 波长下进行全波长扫描。另取 2.1.7 精密度试验 精密量取“2.1.2”项下对照品溶液
空白对照溶液 2.0 mL，于 200～800 nm 波长下进行全波 2.0 mL，按“2.1.4”项下方法显色后，于 490 nm 波长处连
长扫描。结果显示，对照品溶液和供试品溶液在490 nm 续测定 6 次吸光度。结果，吸光度的 RSD 为 0.047％

波长处有最大吸收，空白对照溶液在490 nm波长处没有 （n＝6），表明仪器精密度良好。
吸收，故选择检测波长为490 nm，详见图1。 2.1.8 稳定性试验 精密量取“2.1.1”项下供试品溶液
3.620 （编号：S1）2.0 mL，按“2.1.4”项下方法显色后，分别在室
3.258
2.896 温下放置2、4、6、8、12、24 h时于490 nm波长处测定吸光
2.534
2.172 度。结果，吸光度的RSD为0.126％（n＝6），表明供试品
A 1.810
1.448
1.086 溶液在室温下放置24 h内稳定性良好。
0.724
0.362 2.1.9 重复性试验 取药材样品（编号：S1）1.0 g，共 6
0
200 260 320 380 440 500 560 620 680 740 800 份，按“2.1.1”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1.4”项
λ，nm
A.空白对照溶液 下方法显色后，于490 nm波长处测定吸光度并按标准曲
4.0
3.6 线法计算样品中多糖的含量。结果，多糖的平均含量为
3.2
2.8 4.36％，含量的 RSD 为 1.36％（n＝6），表明本方法重复
2.4
A 2.0 性良好。
1.6
1.2 2.1.10 加样回收率试验 取已知含量的药材样品（编
0.8
0.4
0 号：S1），共 6 份，每份约 1.0 g，精密加入葡萄糖对照品
200 260 320 380 440 500 560 620 680 740 800
λ，nm 44.0 mg，按“2.1.1”项下方法制备供试品溶液，再按
B.对照品溶液
“2.1.4”项下方法显色后，于490 nm波长处测定吸光度并
3.980
3.582
3.184 计算加样回收率，结果见表2。
2.786
2.388 表2 加样回收率试验结果（n＝6）
A 1.990
1.592 Tab 2 Results of recovery tests（n＝6）
1.194
0.796 称样量，g 已知样品含量，mg 加入量，mg 测得量，mg 加样回收率，％ 平均加样回收率，％ RSD，％
0.398
0 1.006 43.63 44.11 88.21 101.07
200 260 320 380 440 500 560 620 680 740 800
λ，nm 1.007 43.65 44.02 88.36 101.58
C.供试品溶液 1.003 43.66 44.09 87.08 98.49 99.87 1.23
图1 紫外吸收光谱图 1.007 43.64 44.10 87.04 98.41
1.002 43.67 44.00 87.35 99.27
Fig 1 UV absorption spectra 1.008 43.69 44.20 88.07 100.40
2.1.5 线性关系考察 分别精密量取“2.1.2”项下对照 2.1.11 样品含量测定 取 17 批药材样品适量，按
品溶液0.1、0.2、0.6、1.0、1.4、2.0 mL，置于2 mL具塞试管 “2.1.1”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1.4”项下方法
中，加水稀释至 2 mL，得到质量浓度分别为 0.007 75、 显色后，于490 nm波长处测定吸光度并按标准曲线法计
0.015 1、0.045 3、0.075 5、0.105 7、0.151 mg/mL的系列线 算多糖含量，各样品平行操作3次，结果见表3。
性关系工作溶液，按“2.1.4”项下方法显色后，于 490 nm 2.2 聚类分析
波长处测定吸光度。以葡萄糖质量浓度（x，mg/mL）为 以多糖含量为变量，采用 SPSS 23.0 软件对数据进

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