Page 99 - 2019年9月第30卷第18期

ABSTRACT OBJECTIVE：To establish a determination method for content of polysaccharide in Acanthopanax senticosus，and to
conduct cluster analysis and ultrasonic extraction technology optimization. METHODS：The content of polysaccharide in A.
senticosus was determined by phenol-sulfuric acid method. Cluster analysis was conducted by using SPSS 23.0 software of the
polysaccharide in A. senticosus from 17 habitats. The ultrasonic extraction technology was optimized with L9 （3）orthogonal test
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using extraction temperature，the ratio of material to liquid，extraction time as factors，the content of polysaccharides as index，and
then validated. RESULTS：The linear range of glucose ranged from 0.007 75 to 0.151 mg/mL （r＝0.999 1）；the limits of
quantification and detection were 2.854，0.856 μg/mL；RSDs of precision，stability，and repeatability tests were less than 2％；
recovery rates of the sample were 98.41％ -101.58％（RSD＝1.23％ ，n＝6）. Cluster analysis results showed that 17 batches of
samples could be clustered into three classes；S1，S6，S10，S12 and S13 were clustered into one class；S3-S5 and S7 were
clustered into one class；and the rest samples were clustered into one class. The optimal ultrasonic extraction technology was
extraction temperature 55 ℃，ratio of material to liquid 1 ∶ 10（g/mL），extraction time 35 min. Results of validation tests showed
the content of the polysaccharide under the best process condition was 4.36％（RSD＝0.920％ ，n＝3）. CONCLUSIONS：
Established method is simple，reproducible and suitable for determination of polysaccharide in A. senticosus；the optimized
ultrasonic extraction technology is stable and feasible.
KEYWORDS Acanthopanax senticosus；Polysaccharide；Phenol-sulfuric acid method；Content determination；Orthogonal test；
Ultrasonic extraction technology；Cluster analysis

刺五加为五加科植物刺五加[Acanthopanax seutico- 20170801，纯度：≥99％）；浓硫酸、苯酚均为分析纯，水
sus（Rupr. et Maxim.）Harms]的干燥根、根茎或茎，具有 为蒸馏水。
[1]
益气健脾、补肾安神的功效 ，是我国东北地区珍贵的药 1.3 药材
用植物 。刺五加中含有多糖、三萜皂苷类、黄酮类、木 刺五加药材采自黑龙江省和吉林省的 17 个不同产
[2]
脂素类、香豆素类等多种活性成分 [3-4] 。现代研究表明， 地，经黑龙江中医药大学药学院王振月教授鉴定为五加
刺五加中的多糖成分具有调节免疫、抗肿瘤、抗氧化、降 科植物刺五加[Acanthopanax seuticosus（Rupr. et Max-
[5]
血糖等药理作用，现已成为研究的热点 。 im.）Harms]的茎。将药材样品于45 ℃烘干至恒定质量，
目前，关于刺五加中多糖的研究多集中在药理作用 粉碎后过60目筛，备用。药材样品来源见表1。
等方面 [6-7] ，而对其含量的研究较少。虽然霍文等 比较 表1 药材样品来源
[8]
了产自本溪、穆枝、珲春刺五加中多糖的含量，但样本量 Tab 1 Origin information
较少、结论缺乏代表性。此外，刺五加中多糖的提取常 编号 采集地点 采集时间 茎直径，cm
采用煎煮法和回流法，但提取时间长、操作繁琐，提取 S1 黑龙江省黑河市爱辉胜山林场 2017年9月1日 1.0～1.2
S2 黑龙江省黑河市逊克三间房林场 2017年9月1日 1.0～1.2
率低 [9-10] 。有研究认为，与上述提取方法相比，超声提取
S3 黑龙江省伊春市红星清水河 2017年9月1日 1.0～1.2
法具有省时、高效、能耗低等优点，并且可以大幅度地提 S4 黑龙江省伊春市上甘岭美林林场 2017年9月1日 1.0～1.2
[11]
高多糖的提取率 。基于此，本研究采用硫酸-苯酚法测 S5 黑龙江省伊春市金山屯峰岩山寨 2017年9月1日 1.0～1.2
S6 黑龙江省七台河市勃利通天二林场 2017年9月1日 1.0～1.2
定了刺五加中多糖的含量，并对17个不同产地刺五加进
S7 黑龙江省七台河市勃利福兴林场 2017年9月1日 1.0～1.2
行聚类分析；同时，采用正交试验设计以提取温度、料液 S8 黑龙江省哈尔滨市尚志帽儿山 2017年9月1日 1.0～1.2
比、提取时间为考察因素，多糖含量为考察指标对其超 S9 黑龙江省哈尔滨市尚志横道河子 2017年9月1日 1.0～1.2
S10 黑龙江省哈尔滨市黑龙江中医药大学药用植物园 2017年9月1日 1.0～1.2
声提取工艺进行优化，旨在为其相关产品的开发利用提
S11 黑龙江省牡丹江市林口奋斗林场 2017年9月1日 1.0～1.2
供参考。 S12 黑龙江省双鸭山市饶河大顶子山 2017年9月1日 1.0～1.2
1 材料 S13 黑龙江省双鸭山市宝清县宝密桥林场 2017年9月1日 1.0～1.2
S14 吉林省敦化市松江林场 2017年9月1日 1.0～1.2
1.1 仪器
S15 吉林省松江河林业局抚南 2017年9月1日 1.0～1.2
H1650型台式高速离心机（湖南湘仪实验室仪器开 S16 吉林省吉林石岗镇 2017年9月1日 1.0～1.2
发有限公司）；BGZ-240型真空干燥箱（上海博迅医疗生 S17 吉林省白山市露水河红光林场 2017年9月1日 1.0～1.2
物仪器股份有限公司）；FW100型高速万能粉碎机（天津 2 方法与结果
市泰斯特仪器有限公司）；Spectra Max M2 型多功能酶 2.1 刺五加中多糖含量测定
标仪[美谷分子仪器（上海）有限公司]；KM-822C型超声 采用硫酸-苯酚法测定刺五加中多糖的含量 。
[12]
波清洗器（广州市科洁盟实验仪器有限公司）；AE240型 2.1.1 供试品溶液的制备 取药材样品1.0 g，置于干燥
电子天平（瑞士Mettler-Toledo公司）。 锥形瓶中，称定质量，超声（功率：480 W，频率：40 kHz，
1.2 药品与试剂 下同）提取，提取温度 55 ℃，料液比 1 ∶ 10（g/mL，下同），
葡萄糖对照品（天津市大茂化学试剂厂，批号： 提取时间 35 min 后，取出放冷，再次称定质量，用水补

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