Page 57 - 2019年9月第30卷第17期
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1 材料                                                酸溶液（B），梯度洗脱（0～20 min，10％→17％A；20～
        1.1 仪器                                              30 min，17％A；30～45 min，17％→21％A；45～55 min，
            e2695型HPLC仪（包括四元泵洗脱系统、在线真空                      21％ →23％ A；55～70 min，23％ →50％ A）；流 速 ：0.8
        脱气机、标准自动进样器、智能化柱温箱和光电二极管                            mL/min；检测波长：350 nm；柱温：35 ℃；进样量：10 μL。
        阵列检测器）购自美国 Waters 公司；TGL-16B 型高速台                   2.3 方法学考察
        式离心机（上海安亭科学仪器厂）；BP211D 型电子分析                        2.3.1  精密度试验      称取三妹木药材粉末（批次为 S2）
        天平（德国赛多利斯公司）；HWS-28 型电热恒温水浴锅                        2 g，精密称定，按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，按
        （上海齐欣科学仪器有限公司）；DHG-9240A 型电热鼓                      “2.2”项下色谱条件连续进样6次，记录色谱。以夏佛塔
        风干燥箱（上海一恒科学仪器有限公司）；As7240BT 型                       苷峰（8 号峰）为参照峰，考察各共有峰的相对保留时间
        超声波清洗器（天津奥特赛恩斯仪器有限公司）；DP5系                          和相对峰面积。结果表明，各共有峰相对保留时间的
        列超纯水仪（法国密里博公司）。                                     RSD 在 0.03％～0.19％之间（n＝6），相对峰面积的 RSD
        1.2 药品与试剂                                           在 0.03％～0.30％之间（n＝6），表明检测仪器精密度
            共采集三妹木药材10批，经广西中医药大学韦松基                         良好。
        教授鉴定均为豆科胡枝子属植物美丽胡枝子L. formosa                       2.3.2  重复性试验       分别称取同一批三妹木药材粉末
        （Vog.）Koehne.的茎叶；夏佛塔苷对照品（上海诗丹德标                    （批次为S2）2 g，精密称定，按“2.1.2”项下方法平行制备
        准技术服务有限公司，批号：5861，纯度：99.4％）；牡荆素                     供试品溶液 6 份，按“2.2”项下色谱条件进样检测，记录
        对 照 品（中 国 食 品 药 品 检 定 研 究 院 ，批 号 ：111687-           色谱。以夏佛塔苷峰（8 号峰）为参照峰，分别考察各共
        201704，纯度：94.9％）；异牡荆素对照品（云南西力生物                     有峰的相对保留时间和相对峰面积。结果表明，各共有
        技术股份有限公司，批号：BBP00949，纯度：97％）；甲                      峰相对保留时间的 RSD 在 0.12％～1.18％之间（n＝6），
        醇、乙腈为色谱纯（美国Fisher公司）；其他试剂均为分析                       相对峰面积的 RSD 在 0.10％～1.27％之间（n＝6），表明
        纯，水为超纯水。三妹木药材基源信息见表1。                               本方法重复性良好。
                     表1   三妹木药材基源信息                         2.3.3  稳定性试验      称取三妹木药材粉末（批号为 S2）
           Tab 1  Material source information of L. formosa  2 g，精密称定，按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，分别
        药材批次    采收时间          药材产地              经纬度         于制备 0、4、8、10、12、24 h 后按“2.2”项下色谱条件进样
        S1      2018-04-10    广西南宁市邕宁区        N22.0° E108.0°  检测，记录色谱。以夏佛塔苷峰（8号峰）为参照峰，分别
        S2      2018-06-05    广西来宾市金秀县        N23.0° E110.0°  考察各共有峰的相对保留时间和相对峰面积。结果表
        S3      2018-07-07    广西梧州市藤县         N24.0° E110.6°
        S4      2018-07-08    广西来宾市象州县        N23.6° E110.1°  明，各共有峰相对保留时间的 RSD 在 0.07％～2.13％之
        S5      2018-07-11    广西桂林市临桂县        N24.0° E110.2°  间（n＝6），相对峰面积的 RSD 在 0.11％～2.44％之间
        S6      2018-09-03    广西柳州市三江县        N25.0° E109.0°  （n＝6），表明供试品溶液在24 h内稳定性良好。
        S7      2018-09-15    广西来宾市金秀县        N23.9° E110.2°    HPLC指纹图谱的生成与相似度评价、共有峰的相
        S8      2018-10-20    广西南宁市邕宁区        N22.0° E108.0°  2.4
        S9      2018-11-03    广西柳州市三江县        N25.0° E109.0°  关分析
        S10     2018-12-05    广西来宾市金秀县        N24.0° E110.2°  2.4.1 HPLC 指纹图谱的生成        称取 10 批三妹木药材
        2 方法与结果                                             粉末，分别按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，以“2.2”
        2.1  溶液的制备                                          项下色谱条件进样检测，记录色谱。将色谱图导入“中
        2.1.1  混合对照品溶液的制备            分别称取夏佛塔苷对              药色谱指纹图谱相似度评价系统”（2012 版）软件中，以
        照品 1.82 mg、牡荆素对照品 1.34 mg、异牡荆素对照品                   S9号色谱图为参照图谱，将时间窗宽度设为0.2，采用多
        1.54 mg，用 75％乙醇溶解并定容至同一 10 mL 量瓶中，                  点校正法进行色谱峰匹配，选择中位数法生成对照图谱
        摇匀，制成含 0.182 mg/mL 夏佛塔苷、0.134 mg/mL 牡荆              R [10-12] 。对照指纹图谱 R 见图 1，10 批药材样品 HPLC 叠
        素和0.154 mg/mL异牡荆素的混合对照品溶液，备用。                       加指纹图谱见图2。
        2.1.2  供试品溶液的制备          称取批次为 S2 的药材粉末             2.4.2  相似度分析      采用“中药色谱指纹图谱相似度评
        2 g，精密称定，置于 50 mL 量瓶中，加入 75％乙醇 20                   价系统（2012 版）”软件，以药材样品 HPLC 对照图谱 R
        mL，称定质量，超声（功率：500 W，频率：35 kHz）提取                    为参照，进行整体相似度评价。结果显示，10 批药材样
        30 min，冷却至室温，再次称定质量，然后用75％乙醇补                       品相似度在 0.901～0.995 之间，表明不同批次药材样品
        足减失的质量，滤过，续滤液以 13 000 r/min 离心 10                   间差异较小。相似度评价结果见表2。
        min，备用。                                             2.4.3  共有峰的指认及相关分析            确定共有峰12个，通
        2.2  色谱条件                                           过与对照品溶液色谱峰比对（取“2.1.1”项下混合对照品
            色谱柱：Inertsil ODS-3（250 mm×4.6 mm，5 μm）；检        溶液按“2.2”项下色谱条件测定，记录色谱图），确认 8、
        测器：光电二极管阵列检测器；流动相：乙腈（A）-0.2％磷                       10、11 号共有峰分别为夏佛塔苷、牡荆素和异牡荆素。


        ·2356  ·  China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 17                                中国药房    2019年第30卷第17期
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