Page 53 - 2019年9月第30卷第17期
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荷比（m/z）：369.0→176.9，VER m/z：455.0→165.0；锥孔 空白血浆：
电压分别为32、56 V；碰撞能量分别为22、30 eV。 ％ 100
2.5.4 溶液的制备 ①CUR 对照品溶液。精密称取 相对丰度， 50
CUR对照品适量，置于10 mL量瓶中，甲醇超声溶解，并 0
0 0.4 0.8 1.2 1.6 2.0 2.4 2.8 3.2 3.6 4.0
定容至刻度，摇匀，配制成质量浓度为183.7 μg/mL的贮 时间，min
备液，于 4 ℃下保存。精密吸取贮备液适量，用甲醇稀 空白血浆+CUR对照品溶液：
释成质量浓度为 1.79、3.59、7.16、14.35、28.70、57.41、 ％ 100 VER
114.81、229.63、459.25、918.50、1 837 ng/mL 的对照品系 相对丰度， 50
列溶液。②VER溶液：精密称取VER对照品适量，置于 0 0 0.4 0.8 1.2 1.6 2.0 2.4 2.8 3.2 3.6 4.0
10 mL量瓶中，配制成质量浓度为101.2 μg/mL内标贮备 时间，min
A. VER
液，于 4 ℃下保存。精密吸取内标贮备液适量，用甲醇
％ 100 CUR
稀释成质量浓度为101.2 ng/mL的VER溶液。
2.5.5 专属性考察 精密吸取空白血浆、空白血浆+ 相对丰度， 50
CUR 对照品溶液、大鼠灌胃给药 1 h 后的血浆样品，按 0 0 0.4 0.8 1.2 1.6 2.0 2.4 2.8 3.2 3.6 4.0
“2.5.2”项下方法处理，按“2.5.3”项下色谱及质谱条件进 时间，min
B. CUR
样分析，记录色谱图。结果，CUR 与 VER 互不干扰，且 大鼠灌胃给药1 h后的血浆样品：
血浆中的内源性物质对CUR的测定也没有干扰。超高 100
％ VER
效液相色谱-串联质谱图见图6。 50
2.5.6 线性关系考察 取 100 μL 空白血浆，分别加入 相对丰度，
CUR对照品系列溶液10 μL，按“2.5.2”项下方法处理，按 0 0 0.4 0.8 1.2 1.6 2.0 2.4 2.8 3.2 3.6 4.0
时间，min
“2.5.3”项下色谱及质谱条件进样分析，记录峰面积。以 A. VER
CUR 质量浓度为横坐标（x），CUR 与 VER 的峰面积比 ％ 100 CUR
为纵坐标（y）进行线性回归。结果，回归方程为 y＝ 相对丰度， 50
2
0.000 1x－0.001 8（R ＝0.991 8），CUR 的检测质量浓度 0
线性范围为1.79～1 837 ng/mL。 0 0.4 0.8 1.2 1.6 2.0 2.4 2.8 3.2 3.6 4.0
时间，min
2.5.7 精密度试验 取 100 μL 空白血浆，分别制备低、 B. CUR
中 、高（28.70、114.81、459.25 ng/mL）3 个 质 量 浓 度 的 图6 超高效液相色谱-串联质谱图
CUR 血浆样品 6 份，按“2.5.2”项下方法处理，按“2.5.3” Fig 6 UPLC-MS/MS chromatograms
项下色谱及质谱条件进样分析，每个质量浓度同日内连 复冻融3次，然后按“2.5.2”项下方法处理，按“2.5.3”项下
续测定 3 次，考察日内精密度；另每天测定 1 次，连续测 色谱及质谱条件进样分析，记录峰面积。结果，室温放
定6 d，考察日间精密度。结果，CUR低、中、高3个质量 置 12 h 后 CUR 峰面积的 RSD 为 4.71％（n＝6），－20 ℃
浓度样品日内 RSD 分别为 6.73％、5.25％、4.35％（n＝ 冻存 14 d 后 CUR 峰面积的 RSD 为 3.88％（n＝6），－
6），日间RSD分别为13.24％、6.13％、5.87％（n＝6）。 20 ℃至室温反复冻融 3 次后 CUR 峰面积的 RSD 为
2.5.8 准确度试验 取 100 μL 空白血浆，分别制备低、 3.52％（n＝6）。
中 、高（28.70、114.81、459.25 ng/mL）3 个 质 量 浓 度 的 2.5.10 重复性试验 取 100 μL 空白血浆，加入质量浓
CUR 的质控样品，按“2.5.2”项下方法处理，按“2.5.3”项 度为114.81 ng/mL的CUR对照品溶液，按“2.5.2”项下方
下色谱及质谱条件进样分析，记录峰面积并计算对应质 法处理，平行制备6份，按“2.5.3”项下色谱及质谱条件进
量浓度。以测得质量浓度与真实质量浓度的比值计算 样分析，记录峰面积。结果，CUR 峰面积的 RSD 为
准确度。结果，CUR低、中、高质量浓度的准确度分别为 4.37％（n＝6），表明处理方法的重复性良好。
85.51％、91.33％、87.56％，RSD 分别为 7.83％、12.46％、 2.5.11 基质效应 取 100 μL 空白血浆，分别制备低、
10.47％（n＝6）。 中 、高（28.70、114.81、459.25 ng/mL）3 个 质 量 浓 度 的
2.5.9 稳定性试验 取 100 µL 空白血浆，分别制备低、 CUR 的质控样品，按“2.5.2”项下方法处理，按“2.5.3”项
中 、高（28.70、114.81、459.25 ng/mL）3 个 质 量 浓 度 的 下色谱及质谱条件进样分析。每个浓度进行 6 样本分
CUR的质控样品，每个浓度6份，分别进行以下处理：室 析，记录峰面积，并计算CUR峰面积与内标峰面积的比
温放置12 h、－20 ℃冻存14 d后解冻、－20 ℃至室温反 值A1；取100 μL流动相代替空白血浆，按上述方法操作，
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