Page 30 - 2019年9月第30卷第17期
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300                                              仪器具有良好的精密度。
                朝藿定A                                       2.7 稳定性试验
          200    朝藿定C  淫羊藿苷
         mAU   朝藿定A1   朝藿定B                                    取参芪延肾颗粒（批号：180716）分别在制备成供试
                                                 宝藿苷Ⅰ
          100                                              品溶液后0、3、6、9、12、24 h进样，计算得朝藿定A1、朝藿
           0                                               定 A、朝藿定 B、朝藿定 C、淫羊藿苷及宝藿苷Ⅰ的峰面
                                                           积的RSD分别为0.23％、0.21％、0.17％、0.18％、0.25％、
            20  25  30  35   40  45  50  55  60   65  70
                                t，min                      0.57％（n＝6），结果表明供试品溶液在 24 h 内具有良好
                            A.混合对照品溶液                      的稳定性。
          300                                              2.8 重复性试验
                                                               取参芪延肾颗粒（批号：180716）细粉 0.5 g，平行 6
          200
         mAU                                               份，精密称定，按照“2.2.2”项下方法分别制备供试品溶
          100
                                                           液，计算得朝藿定 A1、朝藿定 A、朝藿定 B、朝藿定 C、淫
           0                                               羊藿苷及宝藿苷Ⅰ 含量的 RSD 分别为 1.69％、1.69％、
                                                           1.73％、1.76％、1.89％、1.44％（n＝6），结果表明该方法
            20  25  30  35   40  45  50  55  60   65  70
                                t，min                      具有良好的重复性。
                             B.阴性样品溶液
                                                           2.9 加样回收率试验
          125    朝藿定C                                          取适量的参芪延肾颗粒（批号：180716）细粉约0.25
          100                                              g，各6份。分别加入相应低、中、高量的朝藿定A1、朝藿
         mAU  75  朝藿定A1  淫羊藿苷  朝藿定A                        定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷及宝藿苷Ⅰ对照品，
          50
          25           朝藿定B                      宝藿苷Ⅰ      制备成供试品溶液，测定峰面积，计算得朝藿定A1、朝藿
           0                                               定 A、朝藿定 B、朝藿定 C、淫羊藿苷及宝藿苷Ⅰ平均回
            20  25  30  35   40  45  50  55  60   65  70   收 率 分 别 为 96.13％ 、97.77％ 、99.04％ 、96.03％ 、
                                t，min                      98.70％、98.91％，RSD％分别为 0.65％、1.03％、0.87％、
                             B.供试品溶液
                                                           0.78％、0.75％、1.04％，详见表2。
                      图1   高效液相色谱图
                   Fig 1  HPLC chromatograms               2.10  一测多评法
                                                           2.10.1  多点校正法       以不同进样体积（1、2、3、4、5、6
                  表1    6个成分的线性关系结果
                                                           μL）进样，计算所得相对校正因子（fk/s ），取其平均值作为
            Tab 1 Linear relationships for 6 components
                                                           定量的fk/s，fk/s＝（cs×Ak ）/（ck×As ）；在此公式中，cs为参照物
        成分         线性方程            r         线性范围，μg/mL
                 y=16.772x-4.552 2  0.999 5   2.03～50.80   淫羊藿苷的质量浓度，As为参照物淫羊藿苷的色谱峰峰
        朝藿定 A1
        朝藿定A     y=16.374x-9.277 6  0.999 5   4.34～108.60  面积，Ak为待测成分色谱峰的峰面积，ck为待测成分质量
        朝藿定B     y=17.097x-6.253 9  0.999 5   2.26～56.40   浓度  [16-17] 。应用多点校正法计算其他成分相对于参照物
        朝藿定C     y=16.659x-9.292 5  0.999 5   4.14～103.60
        淫羊藿苷     y=20.093x-11.943  0.999 5    4.24～106.00  淫羊藿苷的fk/s，结果见表3。
        宝藿苷Ⅰ     y=28.520x-13.231  0.999 5    1.78～44.60   2.10.2  斜率校正法       通过标准曲线方程X＝Y/a计算X
        2.5  检测限及定量限考察                                     与Y的斜率之比即fk/s （fk/s＝ak/as ），其中as为参照物淫羊藿
            取“2.2.1”混合对照品溶液逐步稀释并按“2.1”项下                   苷的斜率，ak为待测成分的斜率。应用斜率校正法计算
        色谱条件进样测定，记录各色谱峰，以信噪比 3 ∶ 1 时确                      得到朝藿定 A1、朝藿定 A、朝藿定 B、朝藿定 C 及宝藿苷
        定检测限，以信噪比10 ∶ 1时确定定量限。结果，朝藿定                       Ⅰ 相 对 于 淫 羊 藿 苷 的 fk/s 分 别 为 0.835、0.815、0.851、
        A1、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷及宝藿苷Ⅰ                        0.829、1.419。
        检 测 限 分 别 为 65.80、71.49、74.26、68.79、70.56、86.09    2.10.3 fk/s 的重现性     考察不同的色谱系统[Agilent
        ng/mL；定 量 限 分 别 为 196.62、213.63、223.72、208.46、     1260（DAD）、Agilent 1260 Ⅱ（VWD）、Agilent 1260 Ⅱ
        215.96、255.88 ng/mL。                               （DAD）] 及 不 同 的 色 谱 柱（Diamonsil C18、Aligent C18、
        2.6 精密度试验                                          Phenomenex C18、ODS-3 C18、Waters C18 ）对 fk/s （多点校正
            精密吸取同一份混合对照品溶液10 μL，连续进样6                      法）的影响。结果，各 fk/s的 RSD 均＜5％（n＝6），不同仪
        次，计算得朝藿定 A1、朝藿定 A、朝藿定 B、朝藿定 C、淫                    器及不同色谱柱下的fk/s见表4。
        羊藿苷及宝藿苷Ⅰ的峰面积的 RSD 分别为 0.19％、                       2.10.4  待测成分色谱峰的定位            以淫羊藿苷峰为参照
        0.20％、0.41％、0.59％、0.24％、0.40％（n＝6），结果表明            峰，计算不同仪器和不同色谱柱（同“2.10.2”项）项下朝


        中国药房    2019年第30卷第17期                                             China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 17  ·2329  ·
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