Page 29 - 2019年9月第30卷第17期

Established HPLC- QAMS method is accurate and suitable for the quality control of epimedin A1，epimedin A，epimedin B，
epimedin C，icariin and baohuoside Ⅰ in E. brevicornu from Shenqi yanshen granules.
KEYWORDS Shenqi yanshen granules；Epimedium brevicornu；Icariin；Flavonoid；QAMS；HPLC；Content determination；
Quality control

参芪延肾方是我院肾病科临床经验方，该方由红 斯 特 生 物 技 术 有 限 公 司 ；淫 羊 藿 苷 对 照 品（批 号 ：
参、淫羊藿、黄芪、大黄、生地、川芎、鳖甲等 7 种药味组 110737-201516，纯度：94.2％）及宝藿苷Ⅰ对照品（批号：
成，在我院主要用于慢性肾病3～4期肾衰的治疗。方中 111852-201603，纯度：99.9％）均购自中国食品药品检
的君药淫羊藿具有温补肾阳、强筋健骨的作用 [1-2] ，其主 定研究院；参芪延肾颗粒（自制，批号：180716、180724、
要化学成分以黄酮为主，如其中的淫羊藿总黄酮具有抗 180730、180802，规格：15 g/袋，临床常用量：一日 2 次，2
骨质疏松、促进人体免疫调节、抗衰老及抗心肌缺氧等 袋/次）；乙腈为色谱纯，其余试剂为分析纯。
作用 [3-5] ，而淫羊藿苷具有降低动脉粥样硬化患者血栓形 2 方法与结果
[6]
成几率及调节血脂 、保护受损神经元及恢复记忆力等 2.1 色谱条件
[7]
药理活性 ，朝藿定 A～C 则均显示出一定的雌激素活 色谱柱：Waters Symmetry C18 （250 mm×4.6 mm，5
[10]
性 [8-9] ，宝藿苷Ⅰ则具有抗肿瘤及提高免疫力的作用 。 μm）；流动相：乙腈（A）-水（B），梯度洗脱：0→10 min，
目前，淫羊藿药材、饮片及含有淫羊藿的成方制剂主要 19％A；10→20 min，19％～30％A；20→35 min，30％A；
以单指标成分（淫羊藿苷）来控制质量 [11-12] ，2015年版《中 35→40 min，30％～40％A；40→70 min，40％A，再运行
国药典》（一部）中规定淫羊藿药材及饮片质量控制检测 5 min；流速：1.0 mL/min；柱温：25 ℃；检测波长：270 nm；
指标为淫羊藿苷和总黄酮，炙淫羊藿饮片检测指标为淫 进样量：10 μL。
羊藿苷及宝藿苷Ⅰ，巫山淫羊藿指标性成分为朝藿定 2.2 溶液的制备
[13]
C 。然而，即便是同种来源，但产地不同的淫羊藿中化 2.2.1 混合对照品溶液的制备 分别精密称取朝藿定
学成分含量亦存在较大差异 ，仅以淫羊藿苷单一指标 A1、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷及宝藿苷Ⅰ
[14]
作为质量控制依据，无法准确反映药材或制剂的质量。 对照品适量，加入甲醇制备成混合对照品溶液，其中朝
一测多评法适用于用一个参照物（对照品价廉易 藿定A1、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷及宝藿
得）同时实现对多个成分（对照品价高难得）的含量测 苷Ⅰ的质量浓度分别为 50.80、108.60、56.40、103.60、
定，是适合中药多成分及整体作用特点的质量评价模 106.00、44.60 μg/mL。
[15]
式 。故本试验采用高效液相色谱法，建立起以淫羊藿 2.2.2 供试品溶液的制备 取参芪延肾颗粒（批号：
苷为内标性成分，得到朝藿定A1、朝藿定A、朝藿定B、朝 180716）研细过 3 号筛，取粉末 0.5 g，精密称定，加入稀
藿定 C、淫羊藿苷及宝藿苷Ⅰ之间的相对校正因子（fk/s ） 乙醇 20 mL，称定质量，超声（功率：500 W，频率：40
的一测多评法，以实现同时测定参芪延肾颗粒中朝藿定 kHz）1 h，冷却后称质量，用稀乙醇补足损失的质量，摇
A1、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷及宝藿苷Ⅰ 匀，滤过，取续滤液，即得。
的含量，并与外标法的含量测定结果进行比较分析，为 2.2.3 阴性样品溶液的制备 根据参芪延肾颗粒处方
参芪延肾颗粒质量控制提供参考。 组成制备缺淫羊藿的阴性样品，按照“2.2.2”项下方法制
1 材料 备阴性样品溶液，备用。
1.1 仪器 2.3 系统适用性考察
Agilent 1260 高效液相色谱仪[包括二极管阵列检 分别取上述混合对照品溶液、供试品溶液、阴性样
测器（DAD）]、Agilent 1260 Ⅱ高效液相色谱仪[包括可 品溶液适量，按“2.1”项下色谱条件测定。结果，在该色
变波长扫描紫外检测器（VWD）]、Agilent 1260 Ⅱ高效液 谱条件下，各待测成分色谱峰均可以达到基线分离，各
相色谱仪（包括DAD）（美国Agilent公司）；BP210S十万 峰之间分离度均大于 1.5，理论板数以淫羊藿苷峰计大
分之一电子天平（德国 Sartorius 公司）；JA3003J 电子天 于1 500。色谱图见图1。
平（上海舜宇恒平科学仪器有限公司）。 2.4 线性关系考察
1.2 药品与试剂 分别精密吸取“2.2.1”项下混合对照品溶液 1、2、5、
朝藿定A1 （批号：140147-77-9，纯度：98.70％）、朝藿 10、15、25 mL，置于 25 mL 量瓶中，用甲醇定量，按“2.1”
定 A（批号：110623-72-8，纯度：98.49％）、朝藿定 B（批 项下色谱条件进样测定，以峰面积为纵坐标（y）、对照品
号 ：110623-73-9，纯 度 ：99.24％）、朝 藿 定 C（批 号 ： 质量浓度为横坐标（x），进行线性回归，得到线性关系，见
10642-44-9，纯度：98.88％），上述对照品均购自成都德 表1。

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