Page 35 - 2019年9月第30卷第17期

60 SDS 的 pH 5.5 醋酸盐缓冲溶液、2％SDS 的 pH 6.8 磷酸
盐缓冲溶液、2％SDS 的模拟胃液）为溶剂各配制 6 份样
40
mAU 环孢素 品，按“2.2”项下色谱条件测定各样品中环孢素的溶出
20 量，结果，6 种介质下环孢素峰面积的 RSD 分别为
1.23％、1.62％、1.31％、1.26％、1.43％、1.57％（n＝6），表
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 明本文建立的测定方法重复性良好。
t，min 2.3.5 回收率试验 精密称取环孢素对照品适量（按样
A.供试品溶液
品中环孢素平均溶出量的80％、100％、120％取量），共
60
9份，每个浓度3份。按50 mg的处方比例加入相应的混
40 合辅料，置于 10 mL 量瓶中，用无水乙醇溶解并稀释至
mAU 环孢素
20 刻度，滤过，取续滤液 1 mL，置于 100 mL 量瓶中，分别
加6种介质（2％SDS 的pH 1.2盐酸溶液、2％SDS的水溶
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 液、2％SDS的pH 4.5醋酸盐缓冲溶液、2％SDS的pH 5.5
t，min 醋酸盐缓冲溶液、2％SDS 的 pH 6.8 磷酸盐缓冲溶液、
B.对照品溶液
2％SDS的模拟胃液）稀释至刻度。结果，各介质下的平
图1 高效液相色谱图 均回收率分别为 99.1％、98.9％、98.5％、98.4％、98.9％、
Fig 1 HPLC chromatograms 99.7％（RSD均小于2.0％，n＝9）。
（y）进行线性回归，得环孢素在6种介质（含2％SDS的pH 2.4 溶出曲线的考察
[3]
1.2盐酸溶液、含2％SDS的水溶液、含2％SDS的pH 4.5 2.4.1 转速的选择 在相关的溶出度指导原则 中指
醋酸盐缓冲溶液、含2％SDS的pH 5.5醋酸盐缓冲溶液、 出：应用转篮法时，常用的搅拌条件（或搅拌速度）为
含2％SDS的pH 6.8 磷酸盐缓冲溶液、含2％SDS的模拟 50～100 r/min；应用桨法时，转速为 50～75 r/min。由于
5
胃液）中的回归方程分别为y＝1.405 7×10 x+3.032 6×10 4 该品种为胶囊剂，内容物为油状液体，转篮法不利于其
5
4
（r＝0.999 9）、y＝1.612 2×10 x+2.124 7×10（r＝0.999 8）、 溶出。又因使用该药物的人群为中老年人，转速设为
y＝1.538 1×10 x－1.192 6×10（r＝0.999 7）、y＝1.723 9× 50 r/min 时与用药人群体内胃肠蠕动强度相当。因此，
4
5
10 x+2.814 5×10（r＝0.999 6）、y＝1.667 8×10 x+3.221 7× 本文选择桨法，转速为 50 r/min。
5
4
5
10（r＝0.999 8）、y＝1.586 9 × 10 x + 3.341 8 × 10（r＝ 2.4.2 溶出体积的选择 依据文献[3]中所述，溶出装置
4
5
4
一般采用大杯法，介质体积为 900～1000 mL，不建议采
0.999 9）。结果表明，环孢素检测质量浓度线性范围为
用小杯法。因此，本文溶出装置选择大杯，溶出介质体
5～250 μg/mL。
积选择900 mL。
2.3.2 稳定性试验 精密量取“2.1.3”项下供试品溶液
2.4.3 溶 出 曲 线 的 测 定 取 样 品 12 粒 ，照“2.1.3”
适量，分别于室温下放置0、1、2、4、6、8、12 h时按“2.2”项
“2.1.4”项下方法分别制备供试品溶液和对照品溶液，照
下色谱条件进样测定，记录峰面积。结果，在 6 种介质
“2.2”项下色谱条件测定，按外标法计算每粒胶囊各时间
（含2％SDS的pH 1.2盐酸溶液、含2％SDS的水溶液、含
点的溶出量，并采用各时间点下12粒样品溶出量的平均
2％SDS 的pH 4.5醋酸盐缓冲溶液、含2％SDS 的pH 5.5
值为纵坐标，溶出时间为横坐标，绘制溶出曲线。5批样
醋酸盐缓冲溶液、含2％SDS的pH 6.8磷酸盐缓冲溶液、
品在6种溶出介质中的溶出曲线见图2。
含 2％SDS 的模拟胃液）中环孢素峰面积的 RSD 分别为
2.4.4 不同介质中的溶出曲线评价 美国 FDA 和国家
0.89％、0.93％、0.84％、0.75％、0.91％、0.57％（n＝7），表
药品审评中心的指导原则均推荐采用相似因子（f2 ）法评
明供试品溶液在室温下放置12 h 内稳定性良好。
价试验药品与对照药品体外溶出曲线的差异，当 f2数值
2.3.3 精密度试验 取“2.1.4”项下对照品溶液按“2.2” 在 50～100 内，认为 2 条溶出曲线相似 [3，5] 。在含 2％
项下色谱条件连续进样测定6次，记录峰面积。结果，6 SDS的pH 1.2盐酸溶液、含2％SDS的模拟胃液的2种介
种介质（2％SDS 的pH 1.2盐酸溶液、2％SDS的水溶液、 质中，环孢素 15 min 的累积溶出量均达到 85％，由于这
2％SDS 的pH 4.5醋酸盐缓冲溶液、2％SDS 的pH 5.5醋 个结果在评审原则中可以判定其是相似的，所以在这 2
酸盐缓冲溶液、2％SDS 的 pH 6.8 磷酸盐缓冲溶液、2％ 种介质下不需要再用 f2法判断其相似性，而其他 4 种介
SDS 的 模 拟 胃 液）中 环 孢 素 峰 面 积 的 RSD 分 别 为 质下15 min时未达到85％，故需要采用f2法判断。
0.26％、0.88％、0.55％、0.70％、0.79％、0.69％（n＝6），表 在 4 种溶出介质中，选取 3 至 4 个时间点 （15、30、
[3]
明仪器精密度良好。 45、60 min），计算f2。结果显示，D厂家样品与参比制剂
2.3.4 重复性试验 取样品（批号：B0501），按“2.1.3”项 相似度最高，其余2家样品分别与参比制剂在不同溶出
下方法，以 6 种介质（2％SDS 的 pH 1.2 盐酸溶液、2％ 介质中存在一定的差异，与溶出曲线结果一致。5 批样
SDS 的水溶液、2％SDS 的 pH 4.5 醋酸盐缓冲溶液、2％ 品在4种溶出介质中的f2值详见表1。
·2334 · China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 17 中国药房 2019年第30卷第17期