Page 28 - 2019年9月第30卷第17期

HPLC-一测多评法测定参芪延肾颗粒中淫羊藿药材中的 6 个黄

酮类成分的含量 Δ

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沈 洁 ，王 琴，熊维建，徐 冲（重庆市中医院药剂科，重庆 400021）
＊
中图分类号 R932；R927.2 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2019）17-2327-05
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2019.17.05
摘 要 目的：建立同时测定参芪延肾颗粒中淫羊藿药材中朝藿定A1、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷及宝藿苷Ⅰ 6个黄
酮类成分含量的方法。方法：采用高效液相色谱（HPLC）法，色谱柱为Waters Symmetry C18，流动相为乙腈-水（梯度洗脱），流速为
1.0 mL/min，柱温为25 ℃，检测波长为270 nm，进样量为10 μL。在外标法的基础上分别采用多点校正法及斜率校正法建立各成
分与淫羊藿苷（参照物）的相对校正因子（fk/s ）以计算各成分含量；比较基于HPLC法的外标法与多点校正法及斜率校正法所得4批
参芪延肾颗粒样品中6个黄酮类成分含量的差异，验证一测多评法的可行性及准确性。结果：朝藿定A1、朝藿定A、朝藿定B、朝藿
定 C、淫羊藿苷及宝藿苷Ⅰ检测质量浓度线性范围分别为 2.03～50.80、4.34～108.60、2.26～56.40、4.14～103.60、4.24～106.00、
1.78～44.60 μg/mL（r 均为 0.999 5）；检测限分别为 65.80、71.49、74.26、68.79、70.56、86.09 ng/mL；定量限分别为 196.62、213.63、
223.72、208.46、215.96、255.88 ng/mL；精密度、稳定性（24 h）、重复性试验的 RSD＜2％（n＝6）；平均回收率为 96.03％～99.04％
（RSD 为 0.65％～1.04％，n＝6）；采用多点校正法，朝藿定 A1、朝藿定 A、朝藿定 B、朝藿定 C、宝藿苷Ⅰ的 fk/s分别为 0.837、0.818、
0.845、0.831、1.387；采用斜率校正法，朝藿定 A1、朝藿定 A、朝藿定 B、朝藿定 C、宝藿苷Ⅰ的 fk/s分别为 0.835、0.815、0.851、0.829、
1.419。采用一测多评两种校正法与外标法所得含量结果比较，无显著性差异（P＞0.05）。结论：建立的HPLC-一测多评法结果准
确，可应用于参芪延肾颗粒中淫羊藿药材中朝藿定A1、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷及宝藿苷Ⅰ6个黄酮类成分的质量
控制。
关键词 参芪延肾颗粒；淫羊藿；淫羊藿苷；黄酮类成分；一测多评法；高效液相色谱法；含量测定；质量控制

Content Determination of 6 Flavonoids in Epimedium brevicornu from Shenqi Yanshen Granules Based on
HPLC-QAMS
SHEN Jie，WANG Qin，XIONG Weijian，XU Chong（Dept. of Pharmacy， Chongqing Hospital of TCM，
Chongqing 400021，China）

ABSTRACT OBJECTIVE：To establish a HPLC method for simultaneous determination of 6 flavonoids in Epimedium brevicornu
from Shenqi yanshen granules，such as epimedin A1，epimedin A，epimedin B，epimedin C，icariin and baohuoside Ⅰ.
METHODS：HPLC method was adopted. The determination was performed on Waters Symmetry C18 column with mobile phase
consisted of acetonitrile-water（gradient elution）at the flow rate of 1.0 mL/min；the column temperature was 25 ℃，and detection
wavelength was 270 nm. The sample size was 10 μ L. Relative correction factors（fk/s ）of each component to icariin（reference
substance）were established by multi-point correction method and slope correction method on the basis of external standard method
to calculate the contents of each component. The contents of 6 flavonoids in 4 batches of Shenqi yanshen granules determined by
HPLC external standard method were compared with by multi-point correction method and slope correction method. Feasibility and
accuracy of quantitative analysis of multi-components by single-marker（QAMS）were validated. RESULTS：The linear range of
epimedin A1，epimedin A，epimedin B，epimedin C，icariin and baohuoside Ⅰ were 2.03-50.80 μg/mL（r＝0.999 5），4.34-108.60
μg/mL（r＝0.999 5），2.26-56.40 μg/mL（r＝0.999 5），4.14-103.60 μg/mL（r＝0.999 5），4.24-106.00 μg/mL（r＝0.999 5），
1.78-44.60 μ g/mL（r＝0.999 5），respectively，the limits of detection were 65.80，71.49，74.26，68.79，70.56，86.09 ng/mL，
respectively；the limits of quantification were 196.62，213.63，223.72，208.46，215.96，255.88 ng/mL，respectively；RSDs of
precision， stability （24 h）， reproducibility tests were less than 2％ （n＝6）， respectively. The average recoveries were
96.03％ -99.04％ （RSDs were 0.65％ -1.04％ ， n＝6）. By
Δ 基金项目：国家自然科学基金资助项目（No.81603611）；重庆市 multi-point correction method，fk/s of epimedin A1，epimedin
社会民生科技创新专项项目（No.cstc2016shms-zd10001）；重庆市科研
A，epimedin B，epimedin C and baohuoside Ⅰ were 0.837，
院所绩效激励引导专项项目（No.cstc2017jxjl130025）；重庆市卫生和
0.818，0.845，0.831，1.387，respectively；by slope correction
计划生育委员会中医药科技项目（No.ZY201702003）
method，fk/s of them were 0.835，0.815，0.851，0.829，1.419，
＊ 药 师 ，硕 士 。 研 究 方 向 ：中 药 制 剂 与 医 院 药 学 。 E-mail：
respectively. There was no significant difference in content
1140426424@qq.com
# 通信作者：副主任中药师，博士。研究方向：中药物质基础。 determination results between two correction methods of
E-mail：103293536@qq.com QAMS and external standard （P＞0.05）. CONCLUSIONS：

中国药房 2019年第30卷第17期 China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 17 ·2327 ·