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环孢素（Cyclosporine）也称为环孢菌素或环孢素A，                 在甲醇、乙醇或乙腈中极易溶解，在乙酸乙酯中易溶，在
        为第三代高效免疫抑制剂，用于预防和治疗同种异体器                           丙酮或乙醚中溶解，在水中几乎不溶，结合本品种在不
        官移植后的排斥反应等疾病 ，临床常用剂型为软胶                            同 pH 值介质中溶解度的变化特性及参考《普通口服固
                                  [1]
        囊。环孢素软胶囊的主要成分为环孢素A，其是1971年                         体制剂溶出度试验技术指导原则》 ，选择含 2％SDS 的
                                                                                         [3]
        由瑞士 Sandoz 公司从真菌分离提取出来的一种天然的                       pH 1.2盐酸溶液、含2％SDS的水溶液、含2％SDS的pH
        亲脂性环形 11 肽。环孢素软胶囊的现行质量标准是国                         4.5 醋酸盐缓冲溶液、含2％SDS的pH 5.5 醋酸盐缓冲溶
        家药品标准 WS1-（X-144）-2004Z。在该标准中未设置                   液、含2％SDS的pH 6.8 磷酸盐缓冲溶液和含2％SDS的
        溶出度检查项。环孢素属于生物药剂学处置分类系统                            模拟胃液作为溶出介质。
       （BDDCS）分类中的Ⅱ类药物，即低溶解度-高通透性药                         2.1.2 6种溶出介质的制备 （1）含2％SDS的pH 1.2盐
          [1]
        物 。环孢素软胶囊也是微乳化制剂，对这类制剂，其内                          酸溶液：量取盐酸 7.65 mL，至 1 000 mL 水中，用盐酸调
        容物和囊皮均可能影响药物的溶出行为。在多种pH 溶                          pH 至 1.2，加入 SDS 20 g，混匀即得；（2）含 2％SDS 的水
        出介质中测定溶出曲线是药物审评机构评价口服固体                            溶液：量取水1 000 mL，加入SDS 20 g，混匀即得；（3）含
        制剂内在质量的一种重要手段              [2-3] ，因此，考察该品种不        2％SDS 的 pH 4.5 醋酸盐缓冲溶液：称取醋酸钠 2.99 g，
        同厂家的样品在不同溶出介质中的溶出曲线很有必                             至 1 000 mL 水中溶解，加 2 mol/L 醋酸溶液 14.0 mL，用
        要。目前，国内仿制药质量与疗效一致性评价工作正在                           醋酸或氢氧化钠调整pH 为4.5±0.05，再加入SDS 20 g，
        进行中，而环孢素软胶囊属于国家公布的国家基本药物                           混匀即得；（4）含 2％SDS 的 pH 5.5 醋酸盐缓冲溶液：称
        目录（2012 年版）中（2007 年 10 月 1 日前批准上市的）化               取醋酸钠 5.98 g，至 1 000 mL 水中溶解，加 2 mol/L 醋酸
        学药品仿制药口服固体制剂进行一致性评价的品种，并                           溶液3.0 mL，用醋酸或氢氧化钠调整pH为5.5±0.05，再
        且在公布的第一批参比制剂目录里显示环孢素软胶囊                            加入 SDS 20 g，混匀即得；（5）含 2％SDS 的 pH 6.8 磷酸
        的参比制剂为诺华公司的原研产品。因此，本研究不但                           盐缓冲溶液：取0.2 mol/L磷酸二氢钾溶液250 mL与0.2
        要考察不同溶出介质中不同厂家的仿制制剂与参比制                            mol/L 氢氧化钠溶液 112.0 mL 混合，加水稀释至 1 000
        剂溶出曲线的相似性，还将筛选出最能体现不同厂家产                           mL，再加入 SDS 20 g，混匀即得；（6）含 2％SDS 的模拟
        品质量的溶出介质，为该品种仿制药的质量与疗效一致                           胃液：取胃蛋白酶 3.2 g、氯化钠 2.0 g、浓盐酸 7.0 mL、
        性评价工作提供相关的技术支持，为该品种质量标准的                           SDS 20 g，加水稀释至 1 000 mL，混匀即得。上述 6 种
        提高提供技术参考。                                          溶出介质均采用脱气装置经 40 ℃脱气 40 min 后立即
        1 材料                                               使用。
        1.1  仪器                                            2.1.3  供试品溶液的制备          取本品，分别以上述 6 种介
            Waters液相色谱仪（美国 Waters公司）；Agilent1260           质 900 mL 为溶出介质，转速为 50 r/min，依桨法操作。
        高效液相色谱仪（美国 Agilent 公司）；戴安 U-3000 液相                经 10、15、20、30、45、60、90 min 时，取溶出液 10 mL（每
        色谱仪（美国热电公司）；卢根UDT-812 智能溶出度试验                      次取液均补充相同温度的溶出介质 10 mL），用 0.45 μm
        仪（美国卢根公司）；EDT-14Lx智能试验溶出仪（上海仪                      微孔滤膜过滤后，即得。
        真分析仪器有限公司）；PB-10 酸度计、XS205 电子分析                    2.1.4  对照品溶液的制备          精密称定环孢素对照品 50
        天平（瑞士梅特勒-托利多公司）；FAVD-25 真空脱气仪                      mg，置于10 mL量瓶中，加无水乙醇溶解并稀释至刻度，
       （上海富科思分析仪器有限公司）。                                    摇匀，即得质量浓度为5 mg/mL的对照品贮备液。精密
        1.2  药品与试剂                                         量取上述贮备液 1 mL，置于 100 mL 量瓶中，分别加入 6
            环孢素对照品（中国食品药品检定研究院，批号：                         种不同的溶出介质溶解并稀释至刻度，摇匀，即得到相
        130495-201303，纯度：98.4％）；环孢素软胶囊样品（A厂                应的对照品溶液。
        家为参比制剂厂家，批号：AP19，规格：50 mg；B、C、D厂                   2.2 色谱条件
        家均为仿制制剂厂家，B 厂家样品批号：B0501、B0502、                        采用高效液相色谱法测定环孢素的含量 。色谱柱
                                                                                                  [4]
        B0503，C、D厂家批号分别为：C0601、D0603，规格均为：                 为 Agilent Eclipse XDB-C18 （250 mm×4.6 mm，5 μm）；流
        50 mg）；十二烷基硫酸钠（SDS，美国 Fisher Scientific 公          动相为乙腈-水-磷酸溶液（73 ∶ 27 ∶ 0.25，V/V/V）；检测波
        司，批号：P03897）；盐酸、磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、氢氧                     长为 226 nm；柱温为 60 ℃；流速为 1.0 mL/min；进样量
        化 钠 、氯 化 钠（批 号 分 别 为 ：20180102、20150112、           为20 μL。在该色谱条件下，供试品（A厂家，2％SDS的
        20170822、20170323、20160720，均为分析纯）、胃蛋白酶             模拟胃液，15 min取样）及对照品色谱图见图1。
       （批号：20180308，酶活力：≥1 200 U/g）均来源于国药集                 2.3 方法学考察
        团化学试剂有限公司，水为纯化水。                                   2.3.1  线性关系考察        精密量取“2.1.3”项下对照品贮
        2 方法与结果                                            备液 0.1、0.25、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL 稀释至 100
        2.1  溶液的制备                                         mL，按“2.2”项下色谱条件进样测定，记录峰面积。以环
        2.1.1  溶出介质的选择        查询相关文献[4]，得知环孢素              孢素质量浓度（μg/mL）为横坐标（x）、峰面积为纵坐标


        中国药房    2019年第30卷第17期                                             China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 17  ·2333  ·
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