Page 85 - 2019年2月第30卷第4期
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表2   化合物ⅠⅠ、ⅥⅥ对HeLa细胞迁移距离的影响(x±±s,                  缘的细胞会向空白区域移动,直至愈合,以此来考察受
             n=3)                                          试药物/化合物对细胞迁移能力的影响 。本课题组前
                                                                                             [30]
        Tab 2 Effects of compounds ⅠⅠ,ⅥⅥ on migration dis-  期研究发现,骆驼刺提取物对人宫颈癌 HeLa 细胞具有
               tance of HeLa cells(x±±s,n=3)               明显的抑制作用,提示其可能具有开发为抗肿瘤药物的
        组别            迁移距离,mm    组别              迁移距离,mm   潜质,但关于其对宫颈癌侵袭转移的作用尚未见相关报
        空白对照组         2.93±0.09  化合物Ⅰ 50 μg/mL组  1.96±0.06 *
        5-FU 50 μg/mL组  1.38±0.04 **  化合物Ⅵ 50 μg/mL组  2.07±0.07 *  道。故本研究以 5-FU 为阳性对照,采用划痕实验考察
                                                           活性单体(化合物Ⅰ、Ⅵ)对 HeLa 细胞迁移的抑制作
                                  **
                           *
           注:与空白对照组比较,P<0.05, P<0.01
           Note:vs. blank control group,P<0.05, P<0.01     用。结果显示,与空白对照组比较,5-FU与化合物Ⅰ、Ⅵ
                                      **
                               *
                  表3 不同剂量联合用药的q值                           组细胞的迁移距离均显著缩小,提示这2个化合物可抑
        Tab 3 The q values of combined medication of different  制 HeLa 细胞的体外迁移。其中,化合物Ⅰ的抗肿瘤作
               doses                                       用未见相关报道,化合物Ⅵ的抗肿瘤作用与文献报道                       [30]
        组别                  q   组别                   q     基本一致。
        5-FU 3.125 μg/mL+化合物Ⅰ 6.25 μg/mL组  0.93 +  5-FU 3.125 μg/mL+化合物Ⅵ 6.25 μg/mL组  1.10 +
        5-FU 6.25 μg/mL+化合物Ⅰ 12.5 μg/mL组  0.95 +  5-FU 6.25 μg/mL+化合物Ⅵ 12.5 μg/mL组  0.97 +  联合用药是指两种或两种以上药物同时或先后应
        5-FU 12.5 μg/mL+化合物Ⅰ 25 μg/mL组  0.91 +  5-FU 12.5 μg/mL+化合物Ⅵ 25 μg/mL组  1.31 ++  用,其主要目的是为了增强疗效或减轻毒副作用,但有
        5-FU 25 μg/mL+化合物Ⅰ 50 μg/mL组  1.17 ++  5-FU 25 μg/mL+化合物Ⅵ 50 μg/mL组  1.46 ++
                                                                                    [31]
                                                           时也可能会产生相反的效果 。故本研究对 5-FU 与化
           注:“+”为“相加”作用,“++”为“增强”作用
                                                           合物Ⅰ、Ⅵ的联用效果进行了初探。结果发现,不同剂
           Note:“+”means“additive”effect,“++”means“enhanced”effect
                                                           量5-FU分别与化合物Ⅰ、Ⅵ联用后对HeLa细胞均具有
        疗以及延长患者生存时间、提高患者生存质量提供
                                                           相加或增强的抑制作用(q>0.9),提示两者具有一定的
        参考。
                                                           协同效应。同时,本研究在药物剂量上选择了更低的
            本研究采用Sephadex LH-20凝胶柱色谱、ODS柱色
                                                           剂量(即 5-FU 3.125 µg/mL+化合物Ⅰ或化合物Ⅵ 6.25
        谱、制备型高效液相色谱等技术对骆驼刺正丁醇萃取部
                                                           µg/mL),也得到了类似的结果,进一步证实了两者的协
        位中的有效成分进行分离和富集,结合其理化性质以及
                                                           同作用。
        MS、IR、核磁共振等波谱技术对化合物结构进行鉴定。
                                                               综上所述,本研究从骆驼刺正丁醇萃取物中共分离
        结果显示,本研究共分离得到紫铆素(Ⅰ)、3′,4′,7-三羟
                                                           得到了6个化合物,其中紫铆素和原儿茶醛是其正丁醇
        基异黄酮(Ⅱ)、对甲氧基苯乙酸(Ⅲ)、4-羟基苯乙酮
                                                           萃取部位的活性单体。上述两种单体均可抑制人宫颈
       (Ⅳ)、橙黄胡椒酰胺(Ⅴ)和原儿茶醛(Ⅵ)等6个化合物,
                                                           癌 HeLa 细胞的增殖与迁移,具有较强的体外细胞抑制
        且均为首次从该属植物中分离得到,可为后续该属植物
                                                           作用,且与 5-FU 联用后的抑制作用强于两者分别单
        的化学成分研究提供参考。本研究以 5-FU 为阳性对
                                                           用。但本研究仅从细胞水平初步探讨了骆驼刺正丁醇
        照,采用MTT法对上述6个化合物的体外抑制活性进行
                                                           萃取部位活性单体化合物对宫颈癌细胞增殖、迁移的抑
        评价。结果显示,与空白对照组比较,5-FU 和各化合物
                                                           制作用,故其具体机制仍需后续研究进一步验证。
       (5-FU:6.25~200 µg/mL 各剂量,化合物Ⅰ:12.5~200
                                                           参考文献
        µg/mL各剂量,化合物Ⅱ:25、50、200 µg/mL,化合物Ⅲ:
        6.25、100、200 µg/mL,化合物Ⅳ:50、100、200 µg/mL,化         [ 1 ]  米克热木·沙衣布扎提,蒋志惠,吾买尔江·牙合甫,等.传
                                                                统维药骆驼刺刺糖有效成分及药理作用研究进展[J].中
        合物Ⅴ:12.5、25、200 µg/mL,化合物Ⅵ:6.25~200 µg/mL
                                                                药材,2016,39(10):2397-2399.
        各剂量)均可使细胞抑制率显著升高,其中化合物Ⅰ、
                                                           [ 2 ]  韩曾娇.刺糖多糖对巨噬细胞 RAW264.7 的免疫调节及
        Ⅴ、Ⅵ的 IC50值较空白对照组显著降低,且化合物Ⅰ、Ⅵ
                                                                信号通路的研究[D].乌鲁木齐:新疆医科大学,2017.
        的IC50值相对较低,提示其抑制活性更强,这也与本课题
                                                           [ 3 ]  波拉提·马卡比力,熊元君,贾晓光,等.骆驼刺糖中黄酮、
                      [8]
        组前期研究结果 相吻合。
                                                                异黄酮类化学成分研究[J].新疆中医药,2010,28(2):
            当临床诊断为原发肿瘤时,约有50%的患者已发生
                                                                53-55.
        了远处转移,且大多数恶性肿瘤患者实质上死于肿瘤细                           [ 4 ]  刘静,余梦红,张丛敏,等.紫杉醇联合洛铂经介入栓塞给
        胞的转移及转移所引发的复杂性病症,可见肿瘤的侵袭                                药化疗宫颈癌的临床观察[J].中国药房,2017,28(17):
        和转移是导致恶性肿瘤患者死亡的主要原因之一 。                                 2374-2377.
                                                     [18]
        划痕实验是评价细胞迁移能力的经典方法:当单层细胞                           [ 5 ]  LERTKHACHONSUK AA,YIP CH,KHUHAPREMA T,
        长满时,人为制造一块空白区域(即划痕)后,处于其边                               et al. Cancer prevention in Asia:resource-stratified guide-


        中国药房    2019年第30卷第4期                                               China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 4  ·511  ·
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