Page 85 - 2019年2月第30卷第4期
P. 85
表2 化合物ⅠⅠ、ⅥⅥ对HeLa细胞迁移距离的影响(x±±s, 缘的细胞会向空白区域移动,直至愈合,以此来考察受
n=3) 试药物/化合物对细胞迁移能力的影响 。本课题组前
[30]
Tab 2 Effects of compounds ⅠⅠ,ⅥⅥ on migration dis- 期研究发现,骆驼刺提取物对人宫颈癌 HeLa 细胞具有
tance of HeLa cells(x±±s,n=3) 明显的抑制作用,提示其可能具有开发为抗肿瘤药物的
组别 迁移距离,mm 组别 迁移距离,mm 潜质,但关于其对宫颈癌侵袭转移的作用尚未见相关报
空白对照组 2.93±0.09 化合物Ⅰ 50 μg/mL组 1.96±0.06 *
5-FU 50 μg/mL组 1.38±0.04 ** 化合物Ⅵ 50 μg/mL组 2.07±0.07 * 道。故本研究以 5-FU 为阳性对照,采用划痕实验考察
活性单体(化合物Ⅰ、Ⅵ)对 HeLa 细胞迁移的抑制作
**
*
注:与空白对照组比较,P<0.05, P<0.01
Note:vs. blank control group,P<0.05, P<0.01 用。结果显示,与空白对照组比较,5-FU与化合物Ⅰ、Ⅵ
**
*
表3 不同剂量联合用药的q值 组细胞的迁移距离均显著缩小,提示这2个化合物可抑
Tab 3 The q values of combined medication of different 制 HeLa 细胞的体外迁移。其中,化合物Ⅰ的抗肿瘤作
doses 用未见相关报道,化合物Ⅵ的抗肿瘤作用与文献报道 [30]
组别 q 组别 q 基本一致。
5-FU 3.125 μg/mL+化合物Ⅰ 6.25 μg/mL组 0.93 + 5-FU 3.125 μg/mL+化合物Ⅵ 6.25 μg/mL组 1.10 +
5-FU 6.25 μg/mL+化合物Ⅰ 12.5 μg/mL组 0.95 + 5-FU 6.25 μg/mL+化合物Ⅵ 12.5 μg/mL组 0.97 + 联合用药是指两种或两种以上药物同时或先后应
5-FU 12.5 μg/mL+化合物Ⅰ 25 μg/mL组 0.91 + 5-FU 12.5 μg/mL+化合物Ⅵ 25 μg/mL组 1.31 ++ 用,其主要目的是为了增强疗效或减轻毒副作用,但有
5-FU 25 μg/mL+化合物Ⅰ 50 μg/mL组 1.17 ++ 5-FU 25 μg/mL+化合物Ⅵ 50 μg/mL组 1.46 ++
[31]
时也可能会产生相反的效果 。故本研究对 5-FU 与化
注:“+”为“相加”作用,“++”为“增强”作用
合物Ⅰ、Ⅵ的联用效果进行了初探。结果发现,不同剂
Note:“+”means“additive”effect,“++”means“enhanced”effect
量5-FU分别与化合物Ⅰ、Ⅵ联用后对HeLa细胞均具有
疗以及延长患者生存时间、提高患者生存质量提供
相加或增强的抑制作用(q>0.9),提示两者具有一定的
参考。
协同效应。同时,本研究在药物剂量上选择了更低的
本研究采用Sephadex LH-20凝胶柱色谱、ODS柱色
剂量(即 5-FU 3.125 µg/mL+化合物Ⅰ或化合物Ⅵ 6.25
谱、制备型高效液相色谱等技术对骆驼刺正丁醇萃取部
µg/mL),也得到了类似的结果,进一步证实了两者的协
位中的有效成分进行分离和富集,结合其理化性质以及
同作用。
MS、IR、核磁共振等波谱技术对化合物结构进行鉴定。
综上所述,本研究从骆驼刺正丁醇萃取物中共分离
结果显示,本研究共分离得到紫铆素(Ⅰ)、3′,4′,7-三羟
得到了6个化合物,其中紫铆素和原儿茶醛是其正丁醇
基异黄酮(Ⅱ)、对甲氧基苯乙酸(Ⅲ)、4-羟基苯乙酮
萃取部位的活性单体。上述两种单体均可抑制人宫颈
(Ⅳ)、橙黄胡椒酰胺(Ⅴ)和原儿茶醛(Ⅵ)等6个化合物,
癌 HeLa 细胞的增殖与迁移,具有较强的体外细胞抑制
且均为首次从该属植物中分离得到,可为后续该属植物
作用,且与 5-FU 联用后的抑制作用强于两者分别单
的化学成分研究提供参考。本研究以 5-FU 为阳性对
用。但本研究仅从细胞水平初步探讨了骆驼刺正丁醇
照,采用MTT法对上述6个化合物的体外抑制活性进行
萃取部位活性单体化合物对宫颈癌细胞增殖、迁移的抑
评价。结果显示,与空白对照组比较,5-FU 和各化合物
制作用,故其具体机制仍需后续研究进一步验证。
(5-FU:6.25~200 µg/mL 各剂量,化合物Ⅰ:12.5~200
参考文献
µg/mL各剂量,化合物Ⅱ:25、50、200 µg/mL,化合物Ⅲ:
6.25、100、200 µg/mL,化合物Ⅳ:50、100、200 µg/mL,化 [ 1 ] 米克热木·沙衣布扎提,蒋志惠,吾买尔江·牙合甫,等.传
统维药骆驼刺刺糖有效成分及药理作用研究进展[J].中
合物Ⅴ:12.5、25、200 µg/mL,化合物Ⅵ:6.25~200 µg/mL
药材,2016,39(10):2397-2399.
各剂量)均可使细胞抑制率显著升高,其中化合物Ⅰ、
[ 2 ] 韩曾娇.刺糖多糖对巨噬细胞 RAW264.7 的免疫调节及
Ⅴ、Ⅵ的 IC50值较空白对照组显著降低,且化合物Ⅰ、Ⅵ
信号通路的研究[D].乌鲁木齐:新疆医科大学,2017.
的IC50值相对较低,提示其抑制活性更强,这也与本课题
[ 3 ] 波拉提·马卡比力,熊元君,贾晓光,等.骆驼刺糖中黄酮、
[8]
组前期研究结果 相吻合。
异黄酮类化学成分研究[J].新疆中医药,2010,28(2):
当临床诊断为原发肿瘤时,约有50%的患者已发生
53-55.
了远处转移,且大多数恶性肿瘤患者实质上死于肿瘤细 [ 4 ] 刘静,余梦红,张丛敏,等.紫杉醇联合洛铂经介入栓塞给
胞的转移及转移所引发的复杂性病症,可见肿瘤的侵袭 药化疗宫颈癌的临床观察[J].中国药房,2017,28(17):
和转移是导致恶性肿瘤患者死亡的主要原因之一 。 2374-2377.
[18]
划痕实验是评价细胞迁移能力的经典方法:当单层细胞 [ 5 ] LERTKHACHONSUK AA,YIP CH,KHUHAPREMA T,
长满时,人为制造一块空白区域(即划痕)后,处于其边 et al. Cancer prevention in Asia:resource-stratified guide-
中国药房 2019年第30卷第4期 China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 4 ·511 ·