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Hz，-NH），7.05（1H，m，f′-H），7.21（1H，m，f-H），7.30         表 1   不同剂量单体化合物对 HeLa 细胞增殖的影响
        （2H，m，H-k，k′），7.42（2H，t，J＝7.27 Hz，H-j，j′），7.51          （x±±s，n＝3）
        （2H，d，J＝7.27，1.21 Hz，H-g，g′），7.70（4H，dd，J＝7.27，     Tab 1 Effects of different doses of monomeric com-

                                         13
        1.21 Hz，H-3′，3），8.01（2H，s，H-h，I）。 C-NMR（CDCl3，             pounds on the proliferation of HeLa cells（x±±
        150 MHz）δ：20.77（C-3′），37.49（C-c′），49.51（C-2），55.03         s，n＝3）
        （C-2′），64.61（C-4），126.77（C-I），127.06（C-j，j′），127.17  组别          E，％  IC50，μg/mL  组别     E，％  IC50，μg/mL
                                                            空白对照组      0.17±0.05  218.60±3.34  化合物Ⅳ 50 μg/mL组  0.22±0.07  205.41±3.15
        （C-b），128.61（C-k，k′），128.65（C-c，d），128.72（C-h，g），   5-FU 6.25 μg/mL组  0.53±0.08 ＊＊  9.51±0.64 ＊＊  化合物Ⅳ 100 μg/mL组 0.35±0.02 ＊＊
        129.15（C-b′，g′），129.31（C-f′，f），131.91（C-1），133.75   5-FU 12.5 μg/mL组  0.75±0.03 ＊＊  化合物Ⅳ 200 μg/mL组 0.48±0.06 ＊＊
                                                            5-FU 25 μg/mL组  0.62±0.04 ＊＊  化合物Ⅳ 6.25 μg/mL组 0.13±0.07
        （C-i），136.67（C-a），136.72（C-e），167.11（C-m），170.25    5-FU 50 μg/mL组  0.86±0.02 ＊＊  化合物Ⅳ 12.5 μg/mL组 0.26±0.03
        （C-1′），170.74（C-3）。以上波谱数据与文献[25]基本一                 5-FU 100 μg/mL组  0.78±0.05 ＊＊  化合物Ⅳ 25 μg/mL组  0.12±0.06
                                                            5-FU 200 μg/mL组  0.93±0.07 ＊＊  化合物Ⅳ 50 μg/mL组  0.36±0.05 ＊＊
        致，故确定该化合物为橙黄胡椒酰胺，其结构式见图1E。
                                                            化合物Ⅰ 6.25 μg/mL组  0.25±0.07  44.73±1.63 ＊＊  化合物Ⅳ 100 μg/mL组 0.43±0.03 ＊＊
            化合物Ⅵ：无色针状结晶。分子式：C7O3H6，分子                       化合物Ⅰ 12.5 μg/mL组  0.47±0.02 ＊＊  化合物Ⅳ 200 μg/mL组 0.37±0.08 ＊＊
                                                            化合物Ⅰ 25 μg/mL组  0.39±0.01 ＊＊  化合物Ⅴ 6.25 μg/mL组 0.12±0.02  104.44±1.28 ＊
                                                      +
        量 ：138，mp：153～155 ℃ 。 EI-MS：m/z 139 [M + H] 。
                                                            化合物Ⅰ 50 μg/mL组  0.41±0.02 ＊＊  化合物Ⅴ 12.5 μg/mL组 0.28±0.06 ＊
        1 H-NMR（CD3OD，600 MHz）δ：9.68（1H，s，7-CHO），7.30       化合物Ⅰ 100 μg/mL组  0.64±0.09 ＊＊  化合物Ⅴ 25 μg/mL组  0.34±0.04 ＊＊
        （1H，m，H-6），7.28（1H，brs，H-2），6.90（1H，d，J＝8.4         化合物Ⅰ 200 μg/mL组  0.82±0.04 ＊＊  化合物Ⅴ 50 μg/mL组  0.19±0.01
                                                            化合物Ⅱ 6.25 μg/mL组  0.19±0.03  199.62±3.01  化合物Ⅴ 100 μg/mL组 0.22±0.03
        Hz，H-5）。 C-NMR（CD3OD，150 MHz）δ：193.1（C-7），          化合物Ⅱ 12.5 μg/mL组  0.22±0.01  化合物Ⅴ 200 μg/mL组 0.65±0.03 ＊＊
                  13
        153.7（C-4），147.2（C-3），130.8（C-1），126.4（C-6），116.2   化合物Ⅱ 25 μg/mL组  0.47±0.03 ＊＊  化合物Ⅵ 6.25 μg/mL组 0.32±0.03 ＊＊  23.12±0.86 ＊＊
                                                            化合物Ⅱ 50 μg/mL组  0.30±0.06 ＊＊  化合物Ⅵ 12.5 μg/mL组 0.45±0.02 ＊＊
        （C-5），115.3（C-2）。以上波谱数据与文献[26]基本一                   化合物Ⅱ 100 μg/mL组  0.22±0.01  化合物Ⅵ 25 μg/mL组  0.73±0.04 ＊＊
        致，故确定该化合物为原儿茶醛，其结构式见图1F。                            化合物Ⅱ 200 μg/mL组  0.57±0.02 ＊＊  化合物Ⅵ 50 μg/mL组  0.68±0.01 ＊＊
                                                            化合物Ⅲ 6.25 μg/mL组  0.31±0.08 ＊＊  299.31±3.68  化合物Ⅵ 100 μg/mL组 0.74±0.08 ＊＊
        3.2  活性单体的筛选结果                                      化合物Ⅲ 12.5 μg/mL组  0.26±0.06  化合物Ⅵ 200 μg/mL组 0.52±0.07 ＊＊
            与空白对照组比较，5-FU和各化合物（5-FU：6.25～                   化合物Ⅲ 25 μg/mL组  0.14±0.04
                                                                               ＊
                                                                                      ＊＊
        200 µg/mL各剂量，化合物Ⅰ：12.5～200 µg/mL各剂量，                   注：与空白对照组比较，P＜0.05， P＜0.01
                                                                                          ＊＊
                                                                                   ＊
                                                               Note：vs. blank control group，P＜0.05， P＜0.01
        化合物Ⅱ：25、50、200 µg/mL，化合物Ⅲ：6.25、100、200
        µg/mL，化合物Ⅳ：50、100、200 µg/mL，化合物Ⅴ：12.5、
        25、200 µg/mL，化合物Ⅵ：6.25～200 µg/mL各剂量）均可               空白对照组
        使细胞抑制率显著升高，且 5-FU 以及化合物Ⅰ、Ⅴ、Ⅵ
        的 IC50值均显著降低，差异均有统计学意义（P＜0.05 或                      5-FU 50 µg/mL组
        P＜0.01）。其中，化合物Ⅰ、Ⅵ的 IC50值相对较低，提示
        两者对 HeLa 细胞增殖的抑制活性更强，详见表 1。因
        此，选择这2个化合物作为活性单体进行后续试验。                              化合物Ⅰ 50 µg/mL组
        3.3  划痕实验结果
            与空白对照组比较，5-FU 与化合物Ⅰ、Ⅵ组细胞的
        迁移距离均显著缩小，差异均有统计学意义（P＜0.05或                          化合物Ⅵ 50 µg/mL组
        P＜0.01），详见图2、表2。
        3.4 联合用药效果评价结果                                               0 h            24 h           48 h
                                                                 图2 化合物ⅠⅠ、ⅥⅥ对HeLa细胞迁移的影响
            不同剂量的5-FU与化合物Ⅰ、Ⅵ分别联合作用48 h
                                                            Fig 2 Effects of compounds ⅠⅠ，ⅥⅥ on the migration
        后，各组细胞的q值均大于0.9，即两者联用对HeLa细胞
                                                                  of HeLa cells
        的增殖具有相加或增强的协同抑制作用，详见表3。                               [8-11]
                                                            性    。故本研究在此基础上，以传统的周期特异性抗
        4 讨论                                                肿瘤药物 5-FU 作为阳性对照（对多种实体瘤如结直肠
            宫颈癌是临床上最为常见的妇科恶性肿瘤。近年                           癌、胃癌、肝癌、乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、膀胱癌等均具
        来，该病的发病率日益升高，且患者呈年轻化的趋势                     [4，27] ，  有一定的治疗作用      [28-29] ），以人宫颈癌HeLa细胞为对象，
        故寻找有效的治疗方法刻不容缓。本课题组前期研究                             在骆驼刺正丁醇萃取部位分离、纯化的基础上，对其抗
        结果显示，骆驼刺正丁醇萃取部位具有较强的抗肿瘤活                            肿瘤活性单体进行筛选，以期为宫颈癌的早期诊断、治


        ·510  ·  China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 4                                   中国药房    2019年第30卷第4期
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