Page 65 - 2019年2月第30卷第4期

差异有统计学意义（P＜0.01）；与模型组比较，知母皂苷 IL-6、IL-1β、TNF-α等一系列炎症因子，这些炎症因子的
B各剂量组和阳性对照组的细胞相对活力均显著增强， 大量分泌可增加血脑屏障的通透性，并促进自由基释
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差异均有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01），详见表1。 放，从而导致神经细胞受损等毒性反应的发生 。其
3.4 知母皂苷 B 对 AQP-4、IL-6、IL-1β、TNF-α含量的 中，TNF-α作为炎症的“始动因子”，可激活多核白细胞，
影响 从而进一步促进多种炎症因子的释放以激发炎症反应，
与正常组比较，模型组细胞中 AQP-4、IL-6、IL-1β、 参与诱发脑水肿；同时，TNF-α可加重细胞损伤，并可调
TNF-α的含量均显著升高，差异均有统计学意义（P＜ 控早期炎症因子（IL-6、IL-1β等）的表达，以“瀑布式过度
0.01）；与模型组比较，知母皂苷B各剂量组和阳性对照组 炎症级联反应”的方式破坏血脑屏障、加重脑水肿 。由
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细胞中AQP-4、IL-6、IL-1β、TNF-α的含量均显著降低，差 此可见，AQP-4和IL-6、IL-1β、TNF-α在脑水肿发生发展
异均有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01），详见表2。 的病理进程中均具有一定的调节作用，可作为相关研究
表 2 知母皂苷 B 对缺氧/复氧损伤星形胶质细胞中 的考察指标。
AQP-4、IL-6、IL-1β、TNF-α含量的影响（x±±s， 传统中药知母的活性成分知母皂苷B具有抗炎、解
n＝3，pg/mL） 热、抗病毒等诸多药理活性 [13，22] 。虽然也有研究证明知
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Tab 2 Effects of anemarsaponin B on the contents of 母皂苷对脑缺血/再灌注损伤具有一定的保护作用 ，但
AQP-4，IL-6，IL-1 β and TNF-α in hypoxia/ 涉及机制的研究却甚少，且尚未见其对星形胶质细胞的
reoxygenation injury astrocytes（x ±± s，n＝3， 影响及作用机制的相关研究。尼莫地平对预防和治疗
pg/mL） 脑缺血/再灌注损伤具有很好的效果，是脑缺血/再灌注
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组别 AQP-4 IL-6 IL-1β TNF-α 基础研究中的经典阳性药物 。为此，本研究在已有文
正常组 198.73±20.17 128.87±20.01 67.36±6.92 92.77±18.03 献报道的基础上，以尼莫地平为阳性对照，初步探讨了
模型组 401.22±23.62 ＊＊ 478.38±13.92 ＊＊ 510.33±31.55 ＊＊ 562.87±16.98 ＊＊
知母皂苷B低剂量组 355.17±18.81 # 399.91±31.23 # 470.11±14.67 # 367.89±15.58 # 知母皂苷 B 对缺氧/复氧损伤星形胶质细胞的保护作用
知母皂苷B中剂量组 297.34±24.80 # 310.03±8.91 # 329.22±41.01 # 287.98±19.84 ## 及其可能机制。
知母皂苷B高剂量组 247.98±17.01 ## 247.91±10.93 # 239.37±17.59 ## 217.21±22.18 ## 本研究结果显示，与正常组比较，模型组细胞中的
阳性对照组 221.87±12.47 ## 250.61±19.98 ## 179.38±21.44 # 183.98±21.01 ##
LDH相对释放率以及AQP-4、IL-6、IL-1β、TNF-α的含量
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＊
注：与正常组比较， P＜0.05， P＜0.01；与模型组比较，P＜
＊ ＊
均显著升高，细胞的相对活力显著降低。这提示星形胶
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0.05，P＜0.01
＊ ＊
＊
Note：vs. normal group， P＜0.05， P＜0.01；vs. model group， 质细胞发生了缺氧/复氧损伤，模型复制成功。与模型组
# ## 比较，知母皂苷B各剂量组和阳性对照组细胞中的LDH
P＜0.05，P＜0.01
4 讨论 相对释放率以及 AQP-4、IL-6、IL-1β、TNF-α的含量均显
在脑缺血/再灌注损伤的进展后期，作为其必然结局 著降低，细胞的相对活力均显著升高。这提示细胞损伤
的脑水肿不仅可导致患者神经功能严重缺失，还可明显 减弱，且 AQP-4、IL-6、IL-1β、TNF-α的分泌受到明显抑
增高其颅内压，进一步加重脑水肿，从而形成一个不断 制，表明知母皂苷B对缺氧/复氧损伤星形胶质细胞具有
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反复加重的恶性循环 。LDH 是一种主要存在于细胞 一定的保护作用，与本课题组前期在体研究结果 基
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质内的重要的细胞内酶，当细胞膜受到损伤时，LDH 立 本一致。笔者分析其机制可能为：知母皂苷B通过抑制
即迅速地向细胞外泄漏，并释放到培养基中。由于释放 缺氧/复氧损伤星形胶质细胞的炎症始动因子 TNF-α的
出来的 LDH 稳定且敏感，故其释放程度的高低可作为 表达，从而延缓了炎症级联反应的发生；同时，其通过反
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衡量细胞损伤程度的重要指标 。AQP-4作为脑组织中 馈性下调AQP-4的表达，进一步减轻了脑水肿的症状。
最重要的AQP，在脑水肿的发生发展中发挥着重要的作 综上所述，知母皂苷 B 可明显降低细胞损伤程度、
用 [6-9，17] 。该蛋白可控制水分进出脑组织的通道，以维持 增强细胞活力，对缺氧/复氧损伤星形胶质细胞具有一
脑组织的水平衡、炎症因子及星形胶质细胞的正常迁移 定的保护作用，且这种作用可能与其下调 AQP-4 和
等 。AQP-4 与脑水肿关系密切，其参与了多种疾病致 IL-6、IL-1β、TNF-α的分泌有关。但本研究仍然存在如下
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脑水肿的病理过程 。在中枢神经系统中，星形胶质细 不足之处：（1）一般而言，应在离体研究的基础上进行在
胞是体形最大、数量最多的神经胶质细胞，其不仅对维 体研究，而本课题组前期先进行了在体研究，后续为排
持大脑正常功能具有重要的支持和调节作用，还对缺血 除实验动物个体差异等众多干扰因素的影响，再针对星
大脑具有一定的保护作用，且在众多神经细胞中，只有 形胶质细胞进行的离体研究；（2）除AQP-4外，分布于星
星形胶质细胞能够分泌、表达AQP-4 。有研究指出，脑 形胶质细胞及神经细胞连接终足上的缝隙连接蛋白 43
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缺血卒中可能会导致星形胶质细胞等神经细胞产生 （Cx43）对血脑屏障的内环境及稳定性也具有重要意

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